抗胃癌生物活性肽对苛胃癌裸鼠酯酶同工酶代谢的影响

非特异性酯酶同工酶活性的异常升高及异常同工酶谱的表达与恶性肿瘤的发生密切相关抗胃有癌活性肽是从处理后胃癌细胞诱导的相关动物脾脏中提取出来的一种新型学应答调节剂。实验表明，这一活性物质对胃癌细胞有很强的特异性抑制作用，并能在体内产生多种生物学效应。     

抗胃癌生物活性肽对荷胃癌裸鼠LDH同工酶谱的影响

目的 :探索抗胃癌生物活性肽对荷胃癌BGC 82 3裸鼠LDH同工酶谱的影响。方法 :裸鼠皮下接种BGC 82 3细胞建立胃癌模型 ,3d后治疗组腹腔注射抗胃癌活性肽 ,对照组注射生理盐水 ,30d后处死鼠 ,用高pH不连续性聚丙烯胺凝胶电泳分析脾脏、胃、肝脏、肿瘤组织的LDH同工酶谱及LDH同工酶活性变化。结果 :与对照组比较 ,抗癌活性肽治疗组LDH同工酶谱发生改变 ,LDH5活性显著减弱。结论 :抗胃癌活性肽具有调节荷瘤裸鼠LDH同工酶代谢的作用 ,确切的机制将做进一步研究     

抗胃癌生物活性肽对荷胃癌裸鼠LDH同工酶谱的影响

目的：探索抗胃癌生物活性肽对荷胃癌BGC-823裸鼠LDH同工酶谱的影响。方法：裸鼠皮下接种BGC-823细胞建立胃癌模型，3d后治疗组腹腔注射抗胃癌活性肽，对照组注射生理盐水，30d后处死鼠，用高pH不连续性聚丙烯胺凝胶电泳分析脾脏，胃，肝脏，肿瘤组织的LDH同工酶谱及LDH同工酶活性变化。结果：与对照组比较，抗癌活性肽治疗组LDH同工酶谱发生改变，LDH5活性显著减弱。结论：抗胃癌活性肽具有调节荷瘤裸鼠LDH同工酶代谢的作用。确切的机制将做进一步研究。     

肿瘤的共刺激分子B7基因疗法研究进展

近年来,人们对肿瘤的基因治疗研究已取得了重大进展,其中,对共刺激分子基因治疗的研究成为近几年来的热门课题之一。共刺激分子主要有B7、ICAM-1、LFA-3和VCAM-1等,而B7分子是1982年Clark等人在研究B细胞分化表面标志时发现的一种主要表达于活化B细胞表面的蛋白分子。随着B7分子研究的深入,人们知道B7是淋巴细胞活化所需的最重要且最具代表性的共刺激分子之一。肿瘤细胞表面往往缺乏或低表达B7分子,从而逃过免疫监视得以生长。针对这个现象,人们采     

IL-12协同B7-1转基因细胞增强C57BL/6小鼠的抗肿瘤免疫

目的:应用逆转录病毒构建IL-12、B7-1表达载体,以研究基因修饰的肿瘤细胞的癌疫苗作用.方法:将两种表达载体分别转染EL-4胸腺瘤细胞,使该细胞能表达分泌B7-1或IL-12,并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果.结果当接种了EL-4/IL-12转染细胞后,在C57BL/6同系鼠中其基因导入细胞的肿瘤原性比较EL-4/Wt和EL-4/Neo组明显减少(P＜0.01),在EL-4/IL-12组的肿瘤被排斥后,实验动物体内诱发了抗EL-4/Wt的全身性、保护性免疫,用51Cr释放测定法证明有一个较强的抗EL-4/Wt和一个较弱的抗同系Lewis肿瘤细胞的CTL活性,体内淋巴细胞消除分析的结果提示减少的肿瘤原性主要与CD4+、CD8+和NK细胞有关.用EL-4/IL-12基因转染的瘤细胞进行疫苗治疗比较用EL-4/Neo瘤细胞作疫苗治疗能更加有效地延缓已建立的EL-4/Wt肿瘤的生长(P＜0.005),EL-4/IL-12和EL-4/B7-1基因联合转染组比用单一的转基因细胞增强了治疗效果(P＜0.005).结论:研究结果提示应用IL-12进行血液肿瘤的治疗是有效的,IL-12和B7-1联合使用在未来人类癌症的治疗中有一定的应用前景.     

B7-H1在卵巢癌组织中表达的临床意义

目的 探讨B7-H1在卵巢癌组织中表达的临床意义.方法 将收治的112例上皮性卵巢癌及10例良性卵巢囊肿的组织蜡块制作成组织芯片,免疫组化检测芯片协同刺激分子B7-H1的表达情况,χ2检验B7-H1表达水平与患者临床病理参数的关系.生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验及多因素COX回归.结果 B7-H1在良性卵巢囊肿中均为低表达,在卵巢癌组织中高表达率为55.4%(62/112);其表达水平与患者年龄、组织类型、细胞分化、肿瘤大小及是否合并CA125升高无关(P>0.05),而与患者FIGO分期及是否转移密切相关(P<0.05);B7-H1高表达组与低表达组患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)比较差异均有统计学意义(χ2值分别为24.9和17.51,P值均<0.001).COX回归分析表明,B7-H1表达水平和FIGO分期是影响患者生存的独立预后因素.结论 卵巢癌组织中B7-H1的表达水平与预后差和生存期短相关,可为卵巢癌的免疫靶向治疗提供思路.     

协同刺激分子B7-H4与肿瘤微环境的研究进展

协同刺激分子B7-H4是B7家族新成员,具有负性T淋巴细胞免疫调节作用。B7-H4在肿瘤微环境中的表达、调控和功能对肿瘤免疫逃逸起到重要的作用。研究B7-H4在肿瘤微环境的表达及意义,不仅有助于阐明肿瘤免疫逃逸机制,更为肿瘤免疫治疗提供新的靶点和策略。     

GM-CSF及B7-1基因修饰的肿瘤细胞疫苗抗肿瘤的研究

目的：研究ＧＭ－ＣＳＦ及Ｂ７－１基因修饰的肿瘤细胞作为瘤苗的有效性。方法：我们将小鼠ＧＭ－ＣＳＦ及ＣＤ８０基因通过逆转录病毒载体分别导入ＥＬ－４淋巴瘤细胞中,进而研究了ＥＬ－４／ＧＭ－ＣＳＦ及ＥＬ－４／Ｂ７－１在同系Ｃ５７Ｂ习中的成瘤性及其诱导抗肿瘤免疫的效果。结果：转Ｂ７－１基因的肿瘤细胞诱发了ＣＤ８０的高表达。转基因的肿瘤细胞在同源小鼠中的成瘤性下降,免疫原笥增强。在肿瘤生长的早期对实验性荷瘤     

转导B7-1基因消除IFN-γ对黑色素瘤转移潜力的增强作用

γ干扰素(IFN-γ)可通过增加MHCⅠ类分子或其它机制增强多种肿瘤的转移能力,而将T细胞共刺激分子B7基因导入肿瘤细胞能增强机体免疫系统对肿瘤的攻击。本文以Lipofectamine转染法将小鼠B7-1(mB7-1)基因导入B16黑色素瘤低转移株,导入空载体(只含neo基因)的B16细胞作对照。亲本B16细胞和基因转导细胞(B16-B7-1和B16-neo)经100U/ml IFN-γ预处理36小时后进行实验性肺转移试验,同时流式细胞分析细胞表面MHCⅠ类和Ⅱ类分子的表达。结果发现,IFN-γ预处理明显增强B16和B16-neo细胞的肺转移能力,而经IFN-γ预处理的B16-B7-1细胞转移能力并不增强,其实验性肺转移结节数与未经处理的对照组无差别。流式细胞分析显示IFN-γ预处理使B16、B16-neo和B16-B7-1三种细胞的MHCⅠ类(H-2K~b和H-2D~b)分子均明显增高,但IFN-γ增加B16-B7-1细胞MHCⅡ类分子I-A~b表达程度显著高于其它两种细胞。结果表明,转导B7-1基因可降低IFN-γ诱导的B16细胞转移能力,MHCⅡ类分子表达增高可能在其中起一定作用。     

IL-12协同B7-1转基因细胞增强C57BL/6小鼠的抗肿瘤免疫

目的：应用逆转录病毒构建IL－12、B7－1表达载体,以研究基因修饰的肿瘤细胞的癌疫苗作用。方法：将两种表达载体分别转染EL－4胸腺瘤细胞,使该细胞能表达分泌B7－1或IL－12,并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果。结果：当接种了EL－4／IL－12转染细胞后,在C57BL／6同系鼠中其基因导入细胞的肿瘤原性比较EL－4／Wt和EL－4／Neo组明显减少（P＜0．01）,在EL－4／IL－12组的肿瘤被排斥后,实验动物体内诱发了抗EL－4／Wt的全身性、保护性免疫,用51Cr释放测定法证明有一个较强的抗EL－4／Wt和一个较弱的抗同系Lewis肿瘤细胞的CTL活性,体内淋巴细胞消除分析的结果提示减少的肿瘤原性主要与CD4＋、CD8＋和NK细胞有关。用EL－4／IL－12基因转染的瘤细胞进行疫苗治疗比较用EL－4／Neo瘤细胞作疫苗治疗能更加有效地延缓已建立的EL－4／Wt肿瘤的生长（P＜0．005）,EL－4／IL－12和EL－4／B7－1基因联合转染组比用单一的转基因细胞增强了治疗效果（P＜0．005）。结论：研究结果提示应用IL－12进行血液肿瘤的治疗是有效的,IL－12和B7－1联合使用在未来人类癌症的治疗中有一定的应用前景。     

B7-1基因转染小鼠EL-4淋巴瘤诱导带瘤宿主抗瘤效应的体内研究

本文研究了IL-2、IL-4、IL-6基因转染后B16黑色素瘤细胞表面MHCⅠ类抗原及ICAM-1的表达水平,并探讨了其在CTL诱导过程中的作用.结果表明,IL-2、IL-4、IL-6基因转染的B16黑色素瘤细胞表面MHCⅠ类抗原及ICAM-1表达均高于野生型B16黑色素瘤细胞及转染对照质粒的B16黑色素瘤细胞.体内接种后,小鼠脾脏CTL活性明显增强,CTL培养体系中IFN-γ、TNF-α的分泌水平也增高.在CTL诱导体系中加入抗ICAM-1单抗可以抑制CTL的活化,加入抗MHCⅠ类分子单抗后可使CTL的活化完全阻断.这提示细胞因子基因转染可能通过使肿瘤细胞表面MHCⅠ类抗原、ICAM-1的表达增加,从而增强瘤苗的免疫原性.     

mB7－1基因转染小鼠黑色素瘤细胞诱导的抗瘤效应研究

目的：研究共刺激Ｂ７－１（ＣＤ６０）在诱导有效的抗肿瘤免疫反应反应中所起的作用。方法：在体外,三种肿瘤细胞与同上鼠脾淋巴细胞混合培养（ＭＬＴＣＳ）后,测定淋巴细胞增殖指数（ＭＴＴ法）和特异杀伤活性（ＬＤＨ释放改良法）;ＭＴＴＩ地测定肿瘤细胞体外增殖能力后,将Ｂ１６－ｎｅｏ和Ｂ１６－ｍＢ７－１妆种于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下后观察成瘤期、荷瘤小鼠存活以及肿瘤结节生长速度。结果：与野生型Ｂ１６细胞和模拟转     

树突状细胞与髓性白血病的免疫治疗 *

目的：我们应用逆转录病毒构建了ＩＬ－１２,Ｂ－７和ＧＭ－ＣＳＦ表达载体,以研究基因修的肿瘤细胞的癌疫苗作用。方法：将３种表达载体分别转染ＥＬ－４胞腺瘤细胞并研究了该基因导入细胞的抗肿瘤免疫效果。结果：当接种子ＥＬ４／ＩＬ－１２细胞后,在Ｃ５７ＰＬ／６同系鼠中其基因导入细胞的肿瘤原性比较ＥＬ４／Ｗｔ和ＥＬ－４／Ｎｅｏ组明显减少（Ｐ〈０．０１）。在ＥＬ４／ＩＬ－１２被排斥后,体内试验中诱发了实验动物抗     

GM-CSF gene or B7-1 gene modified murine EL-4 cells vaccine

Since 1990, gene transduced tumor vaccine has been studied. Many articles reported that tumor cells transduced with some cytokine or costimulatory molecule could induce system antitumor immunity[1,2] In this study, EL-4 lymphoma was transduced with recombinant retrovirus containing the murine GM-CSF gene and B7-1 gene, respectively. The effect of gene transduction on antitumor immunity was investigated.MATERIALS AND METHODSMice and Cell Lines Female C57BL/6 mice were bought from …     

GM—CSF基因修饰的肿瘤细胞疫苗对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

目的研究GM-CSF基因修饰的肿瘤细胞作为瘤苗的可行性.方法通过逆转录病毒载体,将小鼠GM-CSF基因导入EL-4淋巴瘤细胞中,研究EL-4/GM-CSF在同系C57BL/6小鼠中的成瘤性及其诱导抗肿瘤免疫的效果.结果EL-4/GM-CSF细胞在小鼠中的成瘤性下降,50%小鼠无瘤生存.射线灭活的EL-4/GM-CSF瘤苗能有效地保护野生型肿瘤细胞的攻击,在肿瘤生长的早期对实验性荷瘤小鼠进行治疗,能延长荷瘤宿主的存活时间(33.1±1.8)与对照组EL-4/Wt(23.2±1.5天)比差异有显著性(P＜0.01).基因修饰的瘤苗作用明显增强.结论GM-CSF基因修饰的肿瘤疫苗可诱导较强的抗肿瘤免疫反应,导致肿瘤的部分根除,本实验为基因修饰的肿瘤疫苗的临床应用提出了一定的实验依据.     

ANTITUMOR IMMUNITY AND VACCINE EFFECT INDUCED BY IL—12 SYNERGIZES B7—1 GENE TRANSFECTED CELLS

Cytokines play an crucial role in the induction of antitumor immunity. It have been demonstrated that cytokines such as IL-2, IL-4, IL-12 could stimulate immunity response in many basic and clinical experiment[1-3]. Interleukin 12 (IL-12) is a heterodimeric cytokine which consists of p40 and p35 subunits. It stimulates the proliferation and activation of T lymphocyte and other killer cells and induces the production of IFN-g by these cells[4, 5]. IL-12 promotes T helper type 1 responses.…     

共刺激分子4-1BBL和B7-1在人脑胶质瘤细胞中的表达

背景与目的：4-1BBL和B7-1为诱导和维持T细胞活化提供了重要的共刺激信号,目前被认为是提高抗肿瘤免疫的治疗靶点。本研究探讨4-1BBL和B7-1在7株胶质瘤细胞系表面的表达情况。方法：用流式细胞仪检测7株胶质瘤细胞株表面的共刺激分子4-1BBL和B7-1的表达,同时用MTT法分析胶质瘤细胞系对抗癌药物长春新碱（VCR）敏感性,并分析4-1BBL的表达与耐药性的相关性。结果：发现在所检测的胶质瘤细胞表面有不同程度的表达4-1BBL,但均不表达B7-1。其中T98G和MGR1细胞表面的4-1BBL表达〉30％,对VCR不敏感。UW28、SKMG1、MGR2、SF767、SKMG4细胞表面的4-1BBL表达〈10％。对VCR敏感。结论：本研究所检测的胶质瘤细胞均不表达共刺激分子B7-1。但有不同程度的表达4-1BBL,并且4-1BBL高表达的胶质瘤细胞对长春新碱敏感性差。     

HSA基因转染小鼠淋巴细胞EL-4诱导宿主的体内抗瘤效应

将热稳定抗原(Heat-stable Antigen,简称HSA)的cDNA与质粒载体(PcDNA3)连接,构建成真核表达载体,通过电穿孔的方法将重组质粒导入到小鼠淋巴瘤细胞EL-4中,使其表达抗性基因和HSA分子,通过高剂量G418(400μg/ml)选择培养和有限稀释法克隆,获得高比例表达HSA的阳性细胞克隆,以提供活化T细胞所必需的协同刺激信号,从而诱导宿主体内有效的抗肿瘤免疫应答。实验发现:表达HSA的EL-4淋巴瘤细胞在同系小鼠(C57BL/6)体内的致瘤性明显较野生型肿瘤弱。HSA~ EL-4瘤细胞经丝裂霉素灭活后,腹腔免疫同系小鼠后可获得对低剂量(2×10~3/鼠)野生型瘤细胞EL-4攻击的免疫保护效应。用HSA~ 瘤细胞灭活后作为瘤苗治疗早期带瘤动物显示一定的治疗效果。     

4-1BBL基因修饰colon26细胞的体内抗肿瘤作用

背景与目的:研究4-1BBL基因修饰的小鼠结肠癌细胞瘤苗在小鼠体内诱导产生免疫反应及抗肿瘤效应的能力. 材料与方法:采用脂质体介导法将真核表达质粒pMKIT/4-1BBL导人小鼠结肠癌细胞colon26,经G418筛选后获得4-1BBL稳定高表达细胞克隆colon26/4-1BBL和空载体细胞克隆colon26/pMKITneo,以丝裂霉素C处理,制成癌细胞瘤苗.将野生型colon26、eolon26/pMKITneo和colon26/4-IBBL细胞分别接种于BALB/c小鼠右侧背部皮下,观察细胞致瘤性.取MMC处理的colon26细胞、colon26/pMKITneo细胞和colon26/4-1BBL细胞,分别腹腔免疫BALB/c小鼠,采用改良MTT法测定CTL和NK细胞杀伤活性,取血清用ELISA法测定IL-2、IFN-γ含量.于BALB/c小鼠皮下接种colon26细胞制备早期癌模型,第2 d腹腔注射colon26/4-1BBL瘤苗,7 d后再注射1次,观察肿瘤生长情况.结果:与野生型colon26和colon26/pMKITneo细胞相比,colon26/4-1BBL细胞在小鼠体内的致瘤性明显下降,表现为肿瘤结节出现时间延迟,肿瘤体积明显小于对照组(P＜0.05).MMC处理的肿瘤细胞瘤苗免疫小鼠后,colon26/4-1BBL组小鼠CTL和NK细胞的杀伤活性明显增高(P＜0.05);血清IL-2和IFN-γ的含量明显增高(P＜0.01);而且能对亲本肿瘤细胞colon26产生免疫保护作用,大部分小鼠能保持无瘤状态长期存活(100 d以上).colon26/4-1BBL瘤苗治疗后,部分小鼠保持无瘤生存,成瘤小鼠肿瘤生长缓慢,小鼠生存期明显延长(＞70 d).结论:4-1BBL基因修饰的小鼠结肠癌细胞瘤苗能显著增强小鼠的免疫功能,并能产生显著的抗肿瘤作用.