半乳糖化磁性白蛋白阿霉素纳米粒与阿霉素对大鼠的毒性比较

目的　比较研究半乳糖化磁性白蛋白阿霉素纳米粒 (AGMAN)和阿霉素 (ADM )对大鼠的毒性作用。方法　将AGMAN和ADM分为几个不同的剂量组 ,观察静脉给药后的两种药物的急性LD5 0 ,同时将未死亡的动物进行肝肾功能 ,心肌酶学的检查 ,观察其改变。结果　半乳糖化磁性白蛋白阿霉素纳米粒比阿霉素的LD5 0显著的提高。动物的肝肾功能损害明显减轻。结论　AGMAN具有很安全的用药范围 ,对动物的主要器官及全身的毒副作用相对ADM也有明显的减轻     

半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常大鼠体内的靶向性分布的研究

目的 观察半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒(Gal-MADM)在正常肝脏中的靶向性,并观察Gal-MADM在全身各脏器的分布特征。方法 使用放射示踪技术,用125I标记纳米粒。肝动脉注射,分别于注药后5、15、30、60、120min处死,立即取肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血作γ计数。用同样的方法进行白蛋白磁性阿霉素纳米粒(MADM)在大鼠体内分布实验。结果 Gal-MADM和MADM肝摄取分别在注射后5 min后最高,分别为15 054.4 CPM／g和6 186.7 CPM／g,各时相前者的肝摄取率均为同时刻后者的2-3倍。在肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血的分布两药差异有高度显著性(P<0.05)。结论Gal-MADM在正常肝组织中有明显的主动靶向性,Gal-MADM主要分布肝脏,其它的脏器含量少。     

外加磁场对半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布的影响

目的　观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常肝脏中的靶向性 ,并观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在全身各脏器的分布特征及外加磁场对其分布的影响。方法　大鼠正中开腹 ,肝动脉插管并固定 ,肝动脉注射12 5I半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒 (相当于阿霉素0 .5mg/kg) ,左外叶加磁场 ,磁场应用 3 0min ,移去磁场后 ,动物立即处死 ;对照组 :肝动脉注射半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒 ,左外叶不加磁场 ,3 0min后 ,移去磁场后 ,动物立即处死 ,立即取靶区肝、非靶区肝、肾、心、肺、小肠、脾及周围血作γ计数。肝组织作病理切片。结果　注入的纳米粒75 %～ 85 %分布于肝脏 ,其他脏器极少。病理切片显示磁区小动脉见大量纳米粒存在 ,对照组及非磁区肝中纳米粒很少见。结论　半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常肝组织中有明显的磁靶向性 ;在磁场作用下 ,半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒主要分布于肝脏 ,其他脏器含量很少 ;实验组肾、心、肺、小肠、脾及外周血与对照组的放射活性比较明显降低 ,表明磁性物质的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少     

磁性阿霉素维拉帕米清蛋白纳米粒的制备及性能检测

目的 制备磁性阿霉素维拉帕米清蛋白纳米粒并检测其磁性、载药量、粒径大小等物理性能,为进一步进行动物实验和临床应用奠定基础.方法 先将市售棉籽油精制,再将盐酸阿霉素、盐酸维拉帕米、人血清蛋白及Fe3O4磁粉按一定比例混合,采用加热固化法制备磁性阿霉素维拉帕米清蛋白纳米粒.用透射电子显微镜检测颗粒形态和粒径大小.倒置显微镜下观察载药纳米粒的磁响应性和结构.绘制标准曲线,高效液相色谱仪检测纳米粒中维拉帕米的载药量,荧光分光光度仪检测阿霉素的载药量.结果 纳米粒大小均一,形态规则,呈圆球形,磁响应性好.平均粒径约0.5 μm,维拉帕米载药量为0.8%,阿霉素载药量为1.25%.结论 加热固化法可以制备出同时包载两种药物的纳米粒,物理性能良好,制备方法简便,实验条件容易控制.     

表阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒治疗移植性肝癌

目的 观察表阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒对移植性肝癌的治疗效果。方法 建立SD大鼠移植性肝癌动物模型，14d后，从中随机取12只，测定肿瘤的长短径，为治疗前的肿瘤体积。并将余下肿瘤模型大鼠随机分为4组，每组12只。除生理盐水组外，EPI组给表阿霉素每只1．67mg／kg体重，EPI—PACA—NP组给表阿霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒每只相当于1．67mg／kg体重表阿霉素。PACA-NP组给空白纳米粒每只相当于EPI-PACA-NP组所给纳米粒不载药纳米粒的量。1周后记录肿瘤治疗后的生长率、肿瘤的坏死范围，存活天数，生命延长率。结果治疗后各组间肿瘤体积差异有统计学意义（P＜0．05），EPI—PACA—NP组的肿瘤体积和肿瘤生长率显著低于其他组（P＜0．01）。病理切片可见EPI—PACA—NP组可见肿块里有大面积无核结构，纤维组织替代，以重度坏死为主，无轻度坏死。与NS组和EPI组比较，EPI—PACA—NP组大鼠平均生存时间延长（P＜0．01）；且以EPI组作为对照组，则EPI—PACA—NP组大鼠的生命延长率增加80．95％。结论 尾静脉注射EPI—PACA—NP组肿瘤生长率明显降低、生命延长率显著提高（P＜0．01）。     

硬脂酸阿霉素纳米粒的制备及在抗肝癌中的应用

目的　合成硬脂酸聚乙二醇阿霉素纳米微粒(doxorubicin solid lipid nanoparticles polyethylene glycol, DOX SLNs PEG)并检测其相关参数,观察其对人肝癌细胞杀伤作用。方法　以“乳化蒸发 低温固化”法合成 DOX SLNs PEG 纳米粒,透射电镜计算粒径,分光光度法计算载药率,MTT法观察对肝癌细胞的体外杀伤作用。结果　DOX SLNs PEG 纳米粒平均粒径( 120±4 84) mm,包封率68 6%,体外释放实验提示,7 d可释放所载60%左右的药物;体内抑瘤实验表明:控释制剂间隔给药疗效已优于未包载药物每日给药的疗效,量效关系明显。结论　DOX SLNs PEG纳米粒可有效抑制肝癌细胞的生长。     

磁性阿霉素白蛋白纳米粒在移植性肝癌模型中的磁靶向性

目的：观察磁性阿霉素白蛋白纳米粒在移植性肝癌模型中的磁靶向性，并观察磁性白蛋白纳米粒在各脏器中的分布特征。方法：建立大鼠移植性肝癌模型。大鼠正中开腹，胃十二指肠动脉插管固定。实验组，肝肿瘤区外加磁场，肝动脉注射磁性阿霉素白蛋白纳米粒(相当于阿霉素0．5mg／kg)，磁场应用30min，移去磁场后，动物立即处死。对照组肝肿瘤区不加磁场，肝动脉注射同样剂量的纳米粒后30min处死。动物处死后，立即取肿瘤组织、非磁区正常肝组织、心、肾、脾、肺、小肠和胃作了计数，肿瘤组织、肝组织送病理切片检查。结果：肝肿瘤区应用磁场30min后，磁区肿瘤组织的放射活性较非磁区肝组织的放射活性明显增加，磁区肿瘤组织的放射活性为非磁区正常肝组织的放射活性的8．7倍。对照组在没有磁场存在的情况下，肿瘤组织的放射活性为正常肝脏的2．8倍。实验组肺的放射活性较对照组明显降低。肾、心、脾、小肠和胃两组之间无明显差异。另外，实验组脾、肺和胃与肿瘤组织的放射活性之比较对照组大为降低。注入纳米粒800%以上分布于肝脏。结论：在磁场的作用下，磁性阿霉素白蛋白纳米粒在大鼠移植性肝肿瘤中的聚集明显增加。即使肝肿瘤区没有外加磁场，由于肿瘤组织和正常肝组织血管密度的差异，磁性阿霉素白蛋白纳米粒在肿瘤组织中的分布明显高于正常肝组织。实验组脾、肺、胃与肿瘤组织的放射活性比值大大低于对照组，说明磁场的存在使这些脏器的相对药物暴露明显降低。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒体外杀伤肝癌细胞的实验研究

目的 研究半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(Gal-MADM-NP M)在体外对人肝癌细胞系HepG2的杀伤作用。方法应用光镜、电镜下的形态学观察,DNA电泳以及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测杀瘤活性。结果 形态出现明显改变,电镜证实出现细胞凋亡;白蛋白磁性阿霉素纳米粒联合磁场(MADM-NP M)组和半乳糖化白蛋白阿霉素纳米粒(Gal-ADM-NP)组抑制率及半数抑制率剂量相似(P>0.05),Gal-MADM-NP M组抑制率明显提高,半数抑制剂量明显降低(P<0.01)。结论MADM-NP M、Gal-ADM-NP、Gal-MADM-NP都具有明显抑制体外培养肝癌细胞生长增殖的作用。Gal-MADM-NP M对人肝癌细胞杀伤作用较性MADM-NP及Gal-ADM-NP为强,作用机制可能与半乳糖配体的特异性介导和人肝癌细胞上半乳糖受体的识别内吞作用及联合外磁场有关。     

阿霉素纳米粒逆转P-gp介导的膀胱移行细胞癌多药耐药的实验研究

目的：观察阿霉素聚氰基丙烯酸异丁酯纳米粒（阿霉素纳米粒）对多药耐受糖蛋白（P－glycoprotein，P－gp）介导的膀胱移行细胞癌细胞多药耐药（MDR）的逆转。方法：MTT法观察MDR的逆转，流式细胞仪检测细胞内阿霉素（Dox）浓度。结果：阿霉素纳米对敏感株的细胞毒作用与阿霉素差异无显著性意义（P＞0.05)；耐药株对阿霉素纳米较对Dox敏感4.5倍（P＜0.05），细胞内阿霉素浓度显著增高为其机制。结论：阿霉素纳米可有效逆转P－gp介导的MDR。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响

目的 研究半乳糖化磁性白蛋白阿霉素纳米粒(Gal-MADM)对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响。方法应用Gal-MADM于HepG2细胞,并设A组:RPMI 1640对照组、B组:普通盐酸阿霉素(ADM)组、C组:磁性白蛋白阿霉素纳米粒联合磁场(MADM M)组、D组:半乳糖化白蛋白阿霉素纳米粒(Gal-ADM)组、E组:Gal-MADM联合磁场(Gal-MADM M)组。药物作用后以β-actin基因作为参照,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织蛋白酶(C)B mRNA的表达差异,应用Transwell小室检测体外侵袭力的变化,并用裸鼠肝癌皮下转移模型检测对体内侵袭力的影响。结果Gal-MADM作用HepG2肝癌细胞后CB mRNA表达降低较其他各组更为明显且有显著性,侵过小室滤膜细胞数目减少于其他各组且差异有显著性(P<0.01),裸鼠肝癌生长明显受到抑制(P<0.01)。结论Gal-MADM抑制肝癌细胞株HepG2的侵袭力的作用较ADM、MADM和Gal-ADM为强。     

磁性蛋白微球阿霉素的定性研究

目的　对采用改良方法自行制备抗肿瘤药物磁性白蛋白微球阿霉素进行定性研究和评价。方法　采用改良方法自行制备抗肿瘤药物磁性白蛋白微球阿霉素 ,并经细胞图像分析仪二值化处理 ,优选出符合静脉用药的最佳磁微球 (0 .91± 0 .3 3 ) μm ,并以小鼠和豚鼠为实验对象 ,对该复合物进行定性分析 ,观察 (长达 6周 )该复合药物的急性、亚急性等毒性实验 ,并作相应的病理学检查。同时 ,测定其LD50 值。结果　该复合药物对实验动物的组织细胞并没有毒性损伤 ,也没有在体内蓄积。其LD50 值为 2 3 .3mg/kg体重 ,高于单纯阿霉素静脉给药的LD50 值 (2 0 .0mg/kg体重 )。结论　该复合物毒性很小 ,具有可靠的安全性 ,并优于单纯阿霉素。     

阿霉素磁性蛋白微球靶向治疗鼠种植性胃肿瘤

目的 探讨阿霉素磁性蛋白微球联合外磁场体内外抑制肿瘤生长的机制。方法 Ｗｉｓｔａｒ大白鼠３２只,用ＭＴ法检测阿霉素磁性蛋白微球对Ｗａｌｋｅｒ－２５６细胞的抑制率及半数抑制剂量;观察其体仙靶向治疗敏感细胞鼠种植性胃肿瘤的疗效。结果 阿霉素磁性蛋白微球与游离阿霉素体外对肿瘤细胞的生长抑制率相似,联合外磁场后其抑制率作用明显增强。靶向组对种植瘤的抑制率达８２．５２％,荷瘤动物生成时间明显延长,延长率达２     

交变磁场介导下半乳糖白蛋白磁性阿霉素对人肝癌细胞和肝细胞的影响

目的 观察半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒联合交变磁场对肝癌细胞和人肝细胞的影响.方法 将人肝癌细胞HepG2及人肝细胞L-02细胞,随机分成A1、A2组(即RPMI 1640对照组),B1、B2组(游离阿霉素),C1、C2组(半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒),D1、D2组(阿霉素纳米粒),E1、E2组(半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒),实验组每组含有0.5 mg/L或等量的阿霉素;除C1、C2组外,其他各组置交变磁场(频率为100 kHz、磁场强度为15 kA/m)中,作用30 min.通过细胞计数、Hoechst荧光染色、DNA蛋白电泳、流式细胞仪检测,观察细胞生长曲线、细胞形态、细胞凋亡及细胞周期的变化.结果 (1)E1、E2组,HepG2和L-02细胞增殖抑制作用最强,DNA梯形带最明显,细胞凋亡率分别达40.12%、45.3%;S期细胞分别为39.53%、53.46%,明显高于其他组(P＜0.01);(2)L-02细胞的形态改变、细胞增殖抑制、细胞凋亡率明显强于HepG2细胞(P＜0.05).结论 半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒在交变磁场介导下,对HepG2和L-02细胞产生热化疗协同增效的作用.     

阿霉素磁性蛋白微球的改良法制备

目的　采用改良方法自行制备抗肿瘤药物阿霉素磁性蛋白微球 ,为进一步的动物实验和临床应用奠定基础。方法　自行研制改良法 ,制备阿霉素磁性蛋白微球 ,即人体血清白蛋白1 4 0mg、阿霉素 30mg、化学合成磁粉 50mg经精制棉籽油乳化交联混合而成。 结果　改良方法可靠 ,制备的阿霉素磁性蛋白微球形态较理想 ,符合静脉用药。平均直径为 (1 .0 2 0 0± 0 .0 0 94) μm ;形状因子为 :0 .7780± 0 .0 32 2。结论　改良方法可行可靠 ,为阿霉素磁性蛋白微球在以后的动物实验和临床应用上奠定了良好的基础     

半乳糖化磁性阿霉素白蛋白纳米粒对大鼠移植性肝癌模型bcl-2/bax蛋白表达的研究

目的　半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒 (Gal MADM NP)治疗大鼠移植性肝癌对肿瘤细胞凋亡bcl 2及bax蛋白表达的影响。方法　采用SABC法进行免疫组织化学染色观察bcl 2及bax蛋白的表达。结果　注射Gal MADM NP(肿瘤区加磁场 )组免疫组织化学显示bcl 2蛋白表达阳性率 2 3 .5 3 % ,低于ADM组 5 4.5 5 %及NS组 71.43 % (P <0 .0 1) ,bax蛋白表达阳性率88.2 4% ,高于ADM组 45 .45 %及NS组 2 8.5 7%。结论　Gal MADM NP组在适当外加磁场的作用下 ,能够降低bcl 2蛋白表达 ,增加bax蛋白表达 ,促进移植肝癌肿瘤细胞凋亡。     

Effects of captopril on morphologic changes in kidney of spontaneously hypertensive rats with adriamycin nephropathy

Antihypertensive therapy has been shown to slow down the progression of chronic renal failure. Angiotensin converting enzyme inhibitors and calcium antagonists have been emphasized as the agents with the most protective effect. Our previous study showed that captopril slowed down renal function deterioration in the early course of adriamycin (ADR) nephropathy in spontaneously hypertensive rats (SHR). The present study was undertaken with the aim to examine morphologic changes associated with that slower renal function deterioration. Adult (24 weeks) female SHR were randomly divided into the following groups: the control group (n = 12) was given tap water to drink; the adriamycin (ADR) group (n = 25) was treated with ADR; the ADR-captopril (ADR-C) group (n = 27) was treated with ADR and thereafter with captopril (60 mg/kg/day). Rats were sacrificed at weeks 6, 12 and 18 and histologic analysis was semiquantitatively performed. In the control group the glomeruli exhibited only minor changes at the end of the study. In the ADR group slight glomerular mesangial hypercellularity appeared in the sixth week and progressed in focal and segmental sclerosis. Some glomeruli showed segmental proliferation and increased fibrular matrix of a tuft adherent to a fibrocellular crescents. In the ADR-C group, glomeruli with a slight increase of mesangial matrix were seen at the end of the sixth week, mesangial hypercellularity developed until the end of the sixth week, mesangial hypercellularity developed until the end of the 12th week and segmental glomerulosclerosis until the end of the study. Semiquantitative analysis revealed that the mean semiquantitative scores for mesangial expansion and glomerular sclerosis were significantly lower in ADR-C group than in ADR group thoughout the study. We concluded that captopril slowed down mesangial expansion and reduced the development of glomerular sclerosis.