疏风饮抗Ⅰ型超敏反应实验研究

目的 研究疏风饮抗Ⅰ型超敏反应的作用机制.方法 应用卵白蛋白造成Ⅰ型超敏反应动物模型,采用ELISA法测定疏风饮对大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及免疫球蛋白E(IgE)含量的影响.结果 疏风饮可增加模型大鼠血清IFN-γ含量(P＜0.05),降低模型大鼠血清IL-4、IgE含量(P＜0.01).疏风饮组和扑尔敏组比较无显著差异(P＞0.05);疏风饮组IFN-γ/IL-4高于模型组,有显著差异(P＜0.05),而和扑尔敏组比较无显著差异(P＞0.05).结论 疏风饮防治皮肤Ⅰ型超敏反应性疾病(急性荨麻疹)的作用机制可能与其通过对某些细胞因子的调节,对机体内Th1/Th2平衡产生影响有关.     

舒康平喘胶囊对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子的影响

目的：探讨舒康平喘胶囊对哮喘大鼠Th1、Th2细胞亚群反应及Th1／Th2失衡的影响及防治哮喘的作用机制。方法：将大鼠分为正常对照组、哮喘模型组、舒康平喘胶囊高、中、低剂量组、激素对照组，以卵蛋白腹腔注射致敏加雾化激发建立大鼠哮喘模型。用ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IFN-γ、IL-4、IL-5水平及IFN-γ／IL-4值的变化。结果：与哮喘模型组比较，舒康平喘胶囊高、中剂量组和地塞米松组IFN-γ水平均明显升高（P〈0．05），IL-4水平显著降低（P〈0．01或P〈0．05），IL-5水平明显降低（P〈0．01或P〈0．05）、IFN-γ／IL-4值显著升高（P〈0．01）。结论：舒康平喘胶囊具有增强Th1细胞亚群优势反应，抑制Th2细胞亚群优势反应和调节免疫失衡的作用，减轻气道炎症，降低气道高反应性，可能是舒康平喘胶囊治疗哮喘的机制之一。     

银屑病血热及血瘀证患者外周血Th1/Th2细胞表达差异研究

目的探讨银屑病血热及血瘀证的发病与外周血I型T辅助细胞（T helper cell 1,Th1）／Ⅱ型T辅助细胞（Thelper cell2,Th2）细胞轴漂移的相关性,观察血热及血瘀证银屑病患者与健康人外周血Th1/Th2细胞表达的差异。方法银屑病患者血热证组及血瘀证组各15例,健康对照组16例,采用流式细胞仪（flowcytome-try,FACS）检测单个核细胞（theperipheralbloodmononuclearcells,PBMCs）中CD4＋T细胞内细胞因子γ-干扰素（1-interferon,IFN-γ）、白介素-4（jnterleukin．4,IL-4）的表达情况;ELISA法检测不同证候银屑病患者血清中Thl型主要细胞因子IFN-γ和Th2型主要细胞因子IL-4的水平,并进行银屑病皮损面积和严重程度指数（the Psoriasis Areaand Severity Indexscore,PASI）评分。结果FACS结果示：血热证组外周血PBMCs中CD4＋IFN-γ水平显著高于血瘀证组及健康对照组（P〈0．05）,且与PASI评分呈正相关（P〈0．05）。ELISA结果示：血热证组外周血清中IFN-γ水平显著高于血瘀证组及健康对照组（P〈0．05）,血热证组血浆中IFN．叫水平与PASI评分呈正相关（P〈0．05）,血瘀证组血浆中IFN-γ水平与PAS1评分呈负相关（P〈0．05）。血热证组外周血清中IL-4水平显著低于血瘀证组及健康对照组（P〈0．05）。结论外周血Th1细胞在血热型银屑病的发病中占主导地位,当血热型银屑病向血瘀型转化或正常转归时,外周血Th1细胞的表达下降。     

止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子影响的实验研究

目的：观察中药复方止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响,从而进一步深化探讨名老中医经验方的作用机制。方法：随机将60只SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、止咳平喘合剂大、中、剂小剂量组,每组均为10只,以卵白蛋白（oval albumin,OVA）复制哮喘大鼠模型,采用ELISA方法检测血清中IL-4、IFN-γ含量,取右肺组织行HE染色进行形态学观察。结果：模型组血清中IL-4明显高于空白对照组（P〈0.01）,而IFN-γ明显低于空白对照组（P〈0.01）,存在IL-4/IFN-γ失衡;与模型组相比,阳性对照组、中药大剂量与中剂量组IL-4含量降低（P〈0.05）,而IFN-γ含量均有升高（P〈0.01～0.05）;并且血清IL-4与IFN-γ呈明显负相关（r为-0.974,P〈0.01）。结论：IFN-γ/IL-4的失衡参与哮喘发病过程,止咳平喘合剂可能通过下调IL-4的水平和提高IFN-γ的含量,纠正Th1/Th2细胞因子的失衡,进而减轻气道炎症。     

射贝止咳液对小儿咳嗽变异，陡哮喘免疫调节作用的研究

目的观察射贝止咳液对咳嗽变异性哮喘患儿T细胞细胞免疫和T细胞体液免疫比值（Th1／Th2）的作用。方法将95例2007年12月～2009年6月在甘肃省中医院儿科门诊就诊的咳嗽变异性哮喘患儿,随机分为治疗组50例,对照组45例。治疗前后分别检测血清IgE水平及细胞因子IFN—γ、IL-4水平。结果治疗组和对照组在治疗前血清IgE水平及细胞因子IFN-γ、IL-4、IFN—γ／IL-4差异均无显著性意义（P〉0．05）,但治疗后,以上指标差异有非常显著意义（P〈0．01）。结论咳嗽变异性哮喘患儿血清IgE水平高,Th1／Th2失衡。射贝止咳液可能通过抑制IL-4水平及提高IFN-γ水平,使Th1／Th2失衡得到一定程度的纠正,从而控制气道炎症,减缓哮喘发作。     

抗敏丸治疗荨麻疹作用机制的实验研究

目的:通过抗敏丸对Ⅰ型超敏反应动物模型的实验观察,研究其治疗荨麻疹的作用机制。方法:应用卵白蛋白造成I型超敏反应动物模型,测定大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒,颈动脉取血测大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及免疫球蛋白E(IgE)含量。结果 :抗敏丸可显著减少大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒(P0.05),显著升高血清IFN-γ含量(P0.05),降低血清IL-4、IgE含量(P0.05)。结论:抗敏丸具有抗Ⅰ型超敏反应的作用。     

长蛇灸治疗脾肾两虚型慢性疲劳综合征临床疗效及对细胞因子的影响

目的：观察长蛇灸治疗脾肾两虚型慢性疲劳综合征的临床疗效及对血清IL-2、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的影响。方法：将59例患者随机分为治疗组30例和对照组29例。治疗组采用长蛇灸配合俞募配穴针灸治疗;对照组采用俞募配穴针灸治疗,连续治疗4周。对比两组患者临床疗效;用放免法测定两组治疗前后血清IL-2、TNF-α水平,用ELISA法测定两组治疗前后血清IFN-γ水平。结果：两组患者疗效比较,治疗组总有效率63．3％;对照组总有效率41．4％。两组比较,具有显著性差异（P〈0．05）。治疗组治疗后IL-2、IFN-γ、TNF-α水平均显著升高（P〈0．05或P〈0．01）,对照组治疗后IL-2、IFN-γ水平显著升高（P〈0．05）,TNF-α无明显变化（P〉0．05）;两组治疗后比较,IL-2、IFN-γ、TNF-α水平均有显著性差异（P〈0．05）。结论：长蛇灸配合俞募配穴针灸可较大地提高脾肾两虚型慢性疲劳综合征患者的疗效,其取效的机制可能是升高患者血清IL-2、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的水平,提高免疫力。     

五虎汤对哮喘婴幼儿DC刺激T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ的影响

目的：观察五虎汤对哮喘婴幼儿树突状细胞（DC）刺激T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ的影响。方法：将60例哮喘婴幼儿随机分为2组各30例,对照组予西药常规治疗;治疗组予五虎汤治疗。另选健康组婴幼儿10例。以Thomas法分离、培养并诱导治疗组及对照组哮喘婴幼儿和健康婴幼儿外周血DC细胞,并与健康儿童的T淋巴细胞共同培养后,采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）检测各组患儿血清中IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ浓度。结果：哮喘婴幼儿DC刺激T淋巴细胞分泌IL-2较健康组显著降低（P〈0．05）,而IL-4、IL-5较健康组显著升高（P〈0．01）,IFN-γ与健康组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）;五虎汤治疗后IL-2较治疗前显著增高（P〈0．01）,而IL-4、IL-5均较治疗前显著降低（P〈0．05,P〈0．01）,且治疗组IL-4、IL-5下降幅度均较对照组显著（P〈0．01）。结论：五虎汤具有抑制哮喘患儿Th2类细胞因子IL-4、IL-5的产生,提高IL-2水平,从而调节Th1／Th2的作用。     

黄芪对哮喘大鼠神经内分泌免疫网络相关指标的影响

目的 观察益气药黄芪对支气管哮喘（以下简称哮喘）反复发作模型大鼠神经内分泌免疫（NEI）网络相关指标的影响。方法 取健康清洁级雄性挪威大鼠54只,分为正常组、模型组、黄芪低、中、高剂量组。除正常组外,其他4组均行哮喘造模,黄芪不同剂量组分别灌胃给予相应剂量的黄芪,模型组给予等量生理盐水。用Realtime—PCR法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清细胞因子（IL-4、IL-6、IFN-γ）和血清皮质酮（CORT）的含量;肺组织采用HE染色观察其病理变化。结果 各组大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血清ACTH无明显变化,造模后各组大鼠血清CORT水平升高（P〈0．05）;黄芪低组大鼠血清CORT含量显著高于其他各组（P〈0．05或P〈0．01）;黄芪高组血清IL-4和IL-6含量显著下降（P〈0．01）,且有量效关系;IFN-γ各组间比较差异无显著性。各组大鼠肺组织病理变化比较差异无显著性。结论 哮喘大鼠存在NEI网络相关指标的紊乱;黄芪可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能,改善Th1和Th2型细胞因子的平衡,从而调节了NEI网络的紊乱。     

清养透解合剂对阴虚质系统性红斑狼疮患者Th1／Th2细胞漂移的影响

目的观察清养透解合剂对阴虚质系统性红斑狼疮患者Th1／Th2细胞漂移的影响。方法将60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,同时选取门诊健康体检者30例为健康组。治疗组采用清养透解合剂及西医常规疗法治疗,对照组给予中药安慰剂（合剂）及西医常规疗法。两组疗程均为3个月,治疗前后采用免疫酶联法检测血清IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10水平。结果④治疗组、对照组治疗前与健康组比较,血清Thl类细胞因子（IFN-1、IL-12）、Th2类细胞因子（IL4、IL-10）、Thl／Th2（IFN-γ／IL-4、IL-12／IL—10）差异均有统计学意义（P〈0．01）。②治疗前后组内比较,治疗组血清Th1类细胞因子（包括IL-12、IFN-1）、Th2类细胞因子（包括IL-10、IL-4）、Th1／Th2差异有统计学意义（P〈0．05）,对照组各项指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。③治疗后治疗组与对照组组间比较,各项指标差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论阴虚质系统性红斑狼疮患者存在Th1／Th2细胞比值向Th2漂移,清养透解合剂可改善患者Th1／Th2细胞因子失衡。     

咳喘六味合剂对RSV感染哮喘大鼠气道炎症和气道高反应性的影响

目的观察咳喘六味合剂对呼吸道合胞病毒（RSV）感染哮喘大鼠气道炎症和气道高反应性的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只。磷酸盐缓冲液（PBS）组为对照组,为非卵白蛋白（OVA）致敏和不感染RSV。OVA／RSV组应用OVA致敏、激发并用RSV滴鼻,复制病毒感染哮喘动物模型。咳喘六味合剂低、中、高各剂量组在造模的基础上以咳喘六味合剂灌胃治疗。Buxco系统测定大鼠气道高反应性。麻醉处死动物,ELISA法检测大鼠外周血中自细胞介素4（IL-4）、白细胞介素13（IL-13）、干扰素-γ（IFN-γ）的表达;HE染色观察肺病理变化。结果HE染色显示,咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘大鼠气道炎症。各治疗组较OVA／RSV组相比各浓度Penh值均降低（P〈0．01）,但各治疗组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。与PBS组比较,其余各组IFN-γ下降（P〈0．01）,OVA／RSV组IL-4、IL-13增高（P〈0．01）,各治疗组IL-4、IL—13差异无统计学意义（P〉0．05）。各治疗组较OVA／RSV组,IFN-γ增高,IL-4、IL—13降低（P〈0．05,P〈0．01）。与咳喘六味合剂中剂量组比较,咳喘六味合剂低、高剂量组IFN-γ下降（P〈0．01）,而IL-4、IL-13差异无统计学意义（P〉0．05）。结论咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎症因子的表达,从而控制哮喘合并RSV感染。     

二仙汤、二至丸和地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞的调节作用

目的探讨二仙汤、二至丸和地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞的调节作用。方法取小鼠脾脏和卵巢分别制备脾单个核细胞和卵巢颗粒细胞,于24孔板中培养,分别加入二仙汤、二至丸以及地黄煎的水提物和醇提物,以香菇多糖水溶剂为阳性对照药物,运用MTT法观察细胞增殖情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中IL-1、IFN-γ及E2的浓度。结果二仙汤、二至丸、地黄煎各组对脾单个核细胞及卵巢颗粒细胞均具有较好的增殖作用(P0.05,P0.01);三方均可提高小鼠脾单个核细胞培养上清液中IL-1、IFN-γ的含量(P0.05,P0.01),但与阳性对照组相比,三方均无差异(P0.05);三方均可提高小鼠卵巢颗粒细胞上清液中的E2水平(P0.01,P0.05);与阳性对照组相比,三方均无差异(P0.05)。结论二仙汤、二至丸、地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞均有较好的调节作用。     

补肾法和清肝法对慢性乙型肝炎患者细胞免疫调控作用的比较研究

目的比较补肾法和清肝法治疗轻中度慢性乙型肝炎患者的疗效及其对细胞免疫功能的调控作用。方法采用随机、对照方法将40例患者分为补肾组和清肝组,各20例;补肾组给予巴菟补肾益肝颗粒,清肝组给予双虎清肝颗粒,疗程12周。观察治疗前后中医证候积分、肝功能、T淋巴细胞亚群和IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ等细胞因子变化。结果补肾组总有效率为95．0％,对照组为90．0％;两组临床疗效比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。治疗后两组中医证候积分均显著降低（P〈0．01）,且补肾组积分降低幅度较清肝组显著（P〈0．05）。治疗后,两组主要症状积分较治疗前均显著降低（P〈0．01）,补肾组腰膝酸软、耳鸣等症状积分显著低于清肝组（P〈0．05）。两组肝功能指标有不同程度改善（P〈0．05,P〈0．01）,但两组之间无显著性差异（P〉0．05）。补肾组CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋T淋巴细胞比例显著提高（P〈0．05）,而清肝组治疗前后T淋巴细胞亚群均无统计学差异（P〉0．05）;两组间比较,各T淋巴细胞亚群均无统计学差异（P〉0．05）。补。肾组IL-2、IFN-γ水平显著增加（P〈0．05）,IL-6、IL-8水平降低（P〈0．05）,清肝组IL．6水平降低（P〈0．05）;两组间比较,IL-2、IL-6、IL-8、IFN-γ均有显著差异（P〈0．05）。结论补肾法和清肝法均能显著改善慢性乙型肝炎患者的临床症状和肝功能,但补肾法免疫调控作用显著优于清肝法。     

生化汤逆转甲氨蝶呤诱导的干扰素-γ免疫抑制作用

目的 观察生化汤对甲氨蝶呤（MTX）诱导的干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)免疫抑制的逆转作用。     

湿邪对不同梯度的寒邪犯肺大鼠细胞因子变化影响

目的 研究湿邪对不同梯度的寒邪犯肺所导致的大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6, IL-6）、白细胞介素4（interleukin- 4, IL- 4）、γ干扰素（interferon-γ, IFN-γ）等细胞因子水平变化的影响。 方法 将104只SPF级Wistar大鼠按随机数字表法分为13组,每组8只：常温对照组、寒邪6组和寒湿（寒邪夹湿邪）6组,寒邪分为恒定低温与温差两种。其中恒定低温再分为10 ℃、0 ℃、－10 ℃ 3个不同梯度组,温差组分为20～10 ℃、20～0 ℃、20～－10 ℃ 3个不同梯度组。第1天将大鼠置于相应环境的调温箱中饲养2 h后取出,置于常温饲养,观察大鼠一般状况,4天后取材。检测肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-4的含量。 结果 与相同温度的寒邪组比较,各寒湿组大鼠肺组织匀浆中TNF-α和IL-6水平均有不同程度的显著上升（P<0.01）,IFN-γ水平显著下降（P<0.01）,IL-4水平显著上升（P<0.05或P<0.01）,IFN-γ/IL-4比值显著下降（P<0.01）。 结论 湿邪能够明显加重寒邪对肺脏的损害,从而引起炎症相关细胞因子不同程度的变化,且湿邪能明显加重寒邪犯肺所导致的机体 Th1/Th2免疫应答不同程度的失衡。     

椒梅连理汤抗慢性溃疡性结肠炎的实验研究

目的 观察椒梅连理汤抗实验性溃疡性结肠炎的作用,探讨其治疗作用可能的免疫学机制.方法 将43只SD大鼠随机分为4组:正常组10只,模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP组)、椒梅连理汤组(中药组)各11只.采用三硝基苯磺酸法制备大鼠溃疡性结肠炎模型,分别予以相应药物1 ml/100 g灌胃,每天1次,连续4周.检测大鼠血清及结肠黏膜中白介素1β(IL-1β)、白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 模型组大鼠肠黏膜出现充血、水肿、增生和溃疡,SASP组和中药组较模型组明显好转.与正常组比较,模型组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α明显升高(P<0.05),IL-4明显下降(P<0.05),SASP组、中药组和模型组比较,IL-1β、IL-6、TNF-α降低(P<0.05),IL-4升高(P<0.05).SASP组和中药组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 椒梅连理汤能有效对抗实验性溃疡性结肠炎,与SASP相当,通过调节IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4含量可能是其治疗机制之一.     

小儿喘咳液合苍耳子散对哮喘大鼠血清IFN-γ、IL-4、ECP表达影响的研究

目的：研究小儿喘咳液合苍耳子散对哮喘的疗效及作用的机制。方法：将90只大鼠随机分成空白组、模型组、西药组、喘咳液大、中、小剂量组与合方大、中、小剂量组9个组,每组10只,进行哮喘气道重塑模型制备,分别用采用不同的干预方案,观察各组大鼠症状及血清干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）的变化。结果：与空白组比较,模型组大鼠血清IFN-γ水平明显下降,IL-4、ECP水平明显上升,IFN-γ／IL-4比值明显下降,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）;与模型组比较,西药组、喘咳液各剂量组及合方各剂量组IFN-γ水平明显上升,IL-4、部分组别ECP水平下降,IFN-γ／IL-4比值明显上升,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：小儿喘咳液合苍耳子散抑制气道炎症的直接作用机制为调整失衡Th1／Th2类细胞因子的比值,降低血清ECP水平。     

毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响

目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠（SPF级）作为研究对象。实验分为7组：毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT—PCR法测定肺组织中INF—γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Western blot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指教明显高于正常组（P〈0．001）,利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低（P〈0．001或P〈0．01）,其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组（P〈0．001）;毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义（P〉0．05）。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达（P〈0．001）,抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组（P〈0．05）。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。