急性肺血栓栓塞大鼠肺组织中COMT和MAO表达降低

目的探讨急性肺血栓栓塞大鼠的肺组织中儿茶酚胺代谢相关酶类氧甲基转移酶(COMT)和单胺氧化酶(MAO)的表达变化。方法建立大鼠急性肺血栓栓塞模型,分别在血栓栓塞后1、8、24和48 h采取心脏穿刺法取血,用半定量RT-PCR法和Western blot法检测COMT、MAO-A及MAO-B的mRNA和蛋白表达;用HPLC法检测血清中儿茶酚胺水平。结果在急性肺栓塞的不同时间点,COMT、MAO-A及MAO-B的mRNA和蛋白水平均逐渐降低,而血清中肾上腺素(EPH)和去甲肾上腺素(NE)呈逐渐升高趋势。结论急性肺栓塞大鼠的血清儿茶酚胺水平升高源自肺组织内的降解减少。本研究部分阐明了急性肺栓塞导致肺动脉高压的分子机制。     

大鼠急性肺血栓栓塞后血中DBP、RBP和TTR表达降低

目的探讨急性肺血栓栓塞时维生素D结合蛋白(DBP)、维生素A结合蛋白(RBP)和甲状腺素转运蛋白(TTR)的表达变化及对代谢的影响。方法用颈静脉插管注入血栓的方法制备大鼠急性肺栓塞模型。用Western blot检测DBP、RBP和TTR蛋白水平,RT-PCR法检测肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平,放射免疫法测定FT4和25(OH)D3的血清浓度,微量荧光法测定维生素A的血清浓度。结果急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平,肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平均逐渐降低;而血清中这3个结合蛋白的配体FT4、25(OH)D3和维生素A的水平明显升高。结论急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平降低是由于肝细胞合成减少所致,从而释放出更多的配体。升高的25(OH)D3、维生素A和FT4分子在急性肺栓塞后的一系列病理生理变化中将发挥重要作用。     

大鼠急性肺栓塞后SMP-30表达下降及其对细胞凋亡的影响

目的：研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中衰老标记蛋白质30(SMP-30)的表达变化及其对Fas诱导的细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠急性肺栓塞模型，分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h进行支气管肺泡灌洗，然后开胸取出肺组织。常规提取肺组织的总RNA和总蛋白，以正常组为对照，采取半定量RT-PCR的方法研究SMP-30在mRNA水平表达的变化；采用Western blotting方法进一步验证SMP-30在蛋白水平表达的变化；采用免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中SMP-30以及肺泡巨噬细胞中IL-8在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况；采用TUNEL法研究急性肺栓塞后组织细胞的凋亡情况；最后采用ELISA法检测急性肺栓塞后肺泡灌洗液中sFasL的浓度变化。结果:在大鼠急性肺栓塞后的不同时点，SMP-30的mRNA水平和蛋白水平均逐渐降低，在24和48 h下降最为明显。免疫组化研究表明SMP-30主要分布在支气管黏膜上皮细胞和肺泡上皮细胞，急性肺栓塞后SMP-30在上述细胞内的表达均明显降低。TUNEL染色发现随着SMP-30表达的降低，肺组织内出现明显的细胞凋亡现象，同时肺泡灌洗液中sFasL的浓度升高，肺泡巨噬细胞内IL-8的表达也明显升高。结论:大鼠急性肺栓塞后肺组织内SMP-30的表达明显降低，可能促进Fas－FasL细胞凋亡系统的活化。     

人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。     

SB203580对急性肺栓塞后肺动脉高压及MCP-1表达的影响

 目的：观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)与急性肺栓塞（pulmonary thromboembolism, PTE）后肺动脉高压形成的关系;探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）特异性抑制剂SB203580对急性PTE后肺动脉高压及MCP-1表达的影响。方法：采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组,每组观察1 h、4 h和8 h 3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及SB203580组进行药物预处理;在1 h、4 h和8 h检测各组肺动脉平均压力（mean pulmonary artery pressure, MPAP）和MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果：（1）在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较溶剂对照组显著升高（P<005）;（2）在相同时点,C1142组及SB203580组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较急性PTE组显著降低（P<005）。结论：（1）急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE性肺动脉高压的形成;（2）SB203580可能通过p38 MAPK信号转导通路,下调MCP-1表达,降低急性PTE肺动脉压力。     

CYFRA21—1在原发性肝癌诊断中的应用

目的探讨血清肿瘤标志物CYFRA21-1检测原发性肝癌（primary hepatic cancer,PHC）的诊断价值。方法2003年7月至2007年12月收治的330例肝病患者。其中组织病理学诊断为原发性肝癌者192例,非原发性肝癌者138例。采用电化学发光免疫分析法对330例肝病患者的血清CYFRA21-1水平进行检测。结果血清CYFRA21-1水平PHC组为（9．73±1．02）ng／mL,非PHC患者为（1．33±0．26）ng／mL,两组间差异具有统计学意义（P〈0．01）,不同组织学分型的PHC患者血清CYFRA21—1水平之间的差异也具有统计学意义（P〈0．01）。结论检测血清中CYFRA21-1水平对HPC的诊断有一定的指导意义。     

大鼠脊髓全横断损伤后Wnt信号基因的表达

目的探讨大鼠脊髓全横断损伤后,Wnt信号基因在不同时相脊髓表达的变化及意义。方法成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组分为术后1d、3d、7d、14d、21d组,每组5只。SCI组大鼠T11脊髓段做全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,术后大鼠进行BBB运动功能评分。采用半定量RT-PCR方法检测脊髓损伤组织中Wnt信号基因的表达。结果SCI组所有动物在术后均表现为双后肢瘫痪,BBB运动功能评分明显低于sham组。SCI组在脊髓横断术后1d、3d、7d Wnt3a表达均较sham组明显增加;尾侧端Wnt3a较同时相头侧端的表达多,且在21d又出现明显的升高。在sham组和SCI组均未检测到神经基因蛋白1(Ngn1)的表达。发状分裂相关增强子1(Hes1)的表达在SCI后第1d较sham组有明显的下降,第3d出现升高,之后逐渐下降。结论Wnt信号可能参与了脊髓损伤后修复再生的过程。     

CA19-9、CA125、CEA和CYFRA21-1检测对肺腺癌患者骨转移的诊断价值分析

目的 研究CA19-9、CA125、CEA和细胞角蛋白19片段(CYFRA 21-1)检测对肺腺癌患者骨转移的诊断价值,为临床诊断提供参考.方法 选取2015年1月至2015年12月在我院住院治疗的肺腺癌患者90例,对所有患者行CA19-9、CA125、CEA、CYFRA 21-1检测以及骨显像检查,对比骨转移患者与非骨转移患者四项肿瘤标志物检测情况及阳性分布.结果 骨显像阳性患者血清中CA19-9、CA125、CEA以及CYFRA 21-1四项肿瘤标志物的检测结果以及阳性率均显著高于骨显像阴性患者,且差异均具有统计学意义(P＜0.05);四项肿瘤标志物从正常浓度到1～3倍浓度再到大于3倍浓度患者的骨显像阳性率呈阶梯式上升.结论 CA19-9、CA125、CEA以及CYFRA 21-1四项肿瘤标志物在肺癌骨转移患者中的阳性率均较高,可在监测肺癌骨转移时作为参考指标.     

褪黑素后干预促进急性坏死性胰腺炎大鼠硫氧还蛋白-1的表达

目的 观察褪黑素后干预对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠表达硫氧还蛋白-1（TRX-1）的影响。方法 大鼠随机分成对照组,ANP模型组（模型组）,褪黑素后干预组（后干预组）,每组各24只。模型组腹腔注射6％左旋精氨酸 25mL/kg 体重,间隔1h,共3次,诱发ANP;后干预组在诱发ANP后30min腹腔注射0.25%褪黑素20mL/kg 体重1次;对照组腹腔注射等容积生理盐水。术后6 、12 和24h分别处死8只大鼠,留取动脉血和胰腺组织标本待测。取胰腺组织做病理学检查并评分;测定胰腺组织匀浆丙二醛（MDA）、髓过氧化酶（MPO）的含量;ELISA检测血清TRX-1水平;免疫组织化学测定胰腺组织TRX-1的表达;RT-实时荧光定量PCR测定胰腺组织TRX-1 mRNA的表达。结果 模型组胰腺组织病理评分及MDA、MPO水平较对照组显著升高(p<0.05),后干预组显著回降(p<0.05);模型组血清的TRX-1量在6和12 h较对照组显著降低(p<0.05),后干预组较模型组显著增高(p<0.05);后干预组胰腺组织TRX-1蛋白 and TRX-1mRNA表达峰值从模型组的制模后12 h 提前到制模后6 h。结论 褪黑素后干预ANP大鼠可能是通过提高组织和血清TRX-1的水平,减轻大鼠胰腺组织的损伤。     

细胞角蛋白19片断时间分辨荧光免疫分析试剂盒的评价及临床应用研究

目的对自制的细胞角蛋白19片断（CYFRA21—1）时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂盒进行临床检测评价，并为该试剂盒在临床的应用提供科学依据。方法用自制试剂盒检测采集到的血清1057例．罗氏（Roche）的电化学发光（ECLIA）CYFRA21—1作为对照试验，操作按试剂盒说明书进行，最后对自制试剂盒的准确性和相关性等指标进行计算。结果本试剂盒在ROC曲线中的AUC^ROC值为0．989，检测性能优秀。与Roche电化学发光试剂盒比较，其阳性符合率为97．40％，阴性符合率为98．33％，差异均无统计学意义（P〉0．05）。自制试剂盒测定的TRF值与电化学发光法测定值相接近，相关系数为0．977，两者相关性好（P〈0．01）。结论本试剂盒检测性能满足临床应用的需要。     

血清CYFRA21-1和CA1 9-9在胃肠道恶性肿瘤诊断中的应用

目的:探讨血清CYFRA21-1和CA19-9的检测对诊断胃肠道恶性肿瘤的临床价值.方法:采用免疫放射度量分析法(IRMA)法测定74例胃肠道恶性肿瘤患者和35例健康对照者的血清CYFRA21-1和CA19-9含量.结果:胃肠道恶性肿瘤组患者血清CYFRA21-1水平(5.55± 5.96ng/ml)和CA19-9水平(73.01±86.12u/m1)明显高于健康对照组,差异性十分显著(P＜0001);在74例胃肠道恶性肿瘤中,血清CYFRA21-1的阳性率为45.9%,血清CA19-9的阳性率为40.5%.联合检测两者的阳性率为66.2%.结论:血清CYFRA21-1和CA19-9对胃肠道恶性肿瘤的诊断具有较高的临床实用价值,联合检测两者可提高检出率.     

肺密度三维定量分析对急性肺栓塞的诊断价值

【摘要】目的:探讨肺密度三维定量分析对急性肺栓塞的诊断价值。方法:回顾性收集行CT肺动脉造影（CTPA）检查者,证实为肺栓塞者195例,非肺栓塞者177例,两位影像科医生对CTPA进行阅读,记录栓子位置以及间接征象。结果:肺栓塞患者最常见的临床症状气促、咳嗽、胸痛分别占41%、39%、34%。53%的肺栓塞患者具有明确的危险因素。共发现412个栓子,间接征象在急性肺栓塞和非肺栓塞患者中出现率具有显著性差异（P<0.05）,包括:马赛克征（20.3％ vs 0％）、磨玻璃影（23.1% vs 9.4%）、肺实变（46.7% vs 18.8%）、肺不张（17.2% vs 2.8%）、胸腔积液（34.9% vs 23.3%）、胸膜肥厚粘连（77.8% vs 25.1%）。肺密度分析发现的肺野局限性低密度区在栓塞组和非栓塞组具有差别（47.2% vs 13.9%, P<0.05）。且局限性密度减低区与栓子位置的符合率为89.2%。结论:基于肺密度三维定量分析获得的局限性肺密度改变,结合肺栓塞患者的临床信息与CTPA其他间接征象对急性非栓塞诊断具有提示作用。     

D-二聚体联合纤维蛋白原对2型糖尿病患者急性肺栓塞的诊断价值

目的:探讨D-二聚体(D-dimer,D-D)联合纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)对2型糖尿病内科住院患者急性肺栓塞的诊断价值.方法:选择2013年1月至2016年3月经CT肺动脉造影确诊急性肺栓塞的2型糖尿病内科住院患者及同期排除肺栓塞的2型糖尿病患者各80例,检测D-D及FIB水平.结果:在2型糖尿病急性肺栓塞患者中,D-D及FIB水平明显高于对照组.D-D和FIB单独检测诊断急性肺栓塞时的灵敏度、特异度、约登指数及ROC曲线下面积分别为:72.5％,42.5％;62.5％,91.25％;0.35,0.338;0.675(95％CI:0.597～0.747),0.669(95％CI:0.590～0.741);两者联合检测诊断急性肺栓塞时灵敏度为85.0％,特异度为60.0％,约登指数为0.45,工作特征曲线(receiver operatorcharacteristic,ROC)下面积为0.773(95％CI:0.700～0.835).D-D和FIB联合检测诊断急性肺栓塞时的ROC曲线下面积与单独检测D-D,FIB比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:D-D联合FIB可作为2型糖尿病内科住院患者急性肺栓塞早期诊断时简单易行可靠的检测指标.     

Prognostic and predictive value of carcinoembryonic antigen and cytokeratin-19 fragments levels in advanced non-small cell lung cancer patients treated with gefitinib or erlotinib

Purpose: The prognostic and predictive value of pretreatment serum levels of carcinoembryonic antigen (CEA) and cytokeratin-19 fragments (CYFRA 21-1) were assessed in advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) patients treated with gefitinib or erlotinib. Materials and Methods: Pretreatment CEA and CYFRA 21-1 were measured in 123 advanced NSCLC patients receiving gefitinib or erlotinib. High CEA levels (h-CEA) were significantly associated with females, patients with adenocarcinoma, and non-smokers. Results: Low CYFRA 21-1 levels (l-CYFRA) were significantly associated with a good performance status (ECOG PS 0-1). The overall response rate (RR) was 27.6%, and higher RR was associated with adenocarcinoma, h-CEA, and epidermal growth factor receptor (EGFR) mutation. Patients with h-CEA had significantly longer progression-free survival (PFS) (p=0.021). Patients with l-CYFRA had significantly longer PFS and overall survival (p=0.006 and p<0.001, respectively). Of note, h-CEA and l-CYFRA had good prognosis in patients with unknown EGFR mutation status or patients with squamous cell carcinoma (p=0.021 and p=0.015, respectively). A good ECOG PS (HR=0.45, p=0.017), h-CEA (HR=0.41, p=0.007), l-CYFRA 21-1 (HR=0.52, p=0.025), and an EGFR mutation (HR=0.22, p<0.001) were independently predictive of a longer PFS. Conclusion: h-CEA and l-CYFRA 21-1 may be prognostic and predictive serum markers for higher response and longer survival in patients with advanced NSCLC receiving gefitinib or erlotinib, especially in patients with unknown EGFR mutation status or patients with squamous cell carcinoma.     

肿瘤标志物联合检测对良恶性胸腔积液鉴别诊断的意义

目的探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、CYFRA21-1和铁蛋白(Fer)在鉴别良恶性胸腔积液中的临床意义。方法应用化学发光法对53例恶性胸腔积液和41例良性胸腔积液中的CEA、CA19-9、CYFRA21-1和Fer进行含量检测,并对测定的结果进行比较。结果恶性胸腔积液组的四项指标高于良性组,差异具有统计学意义(P<0.01)。四项肿瘤标志物诊断恶性胸腔积液的阳性率分别为:CEA 75.47%,CYFRA21-1 77.35%,CA19-9 66.03%,Fer 52.8%。四项标志物联合检测阳性率可达90.1%。结论四项肿瘤标志物联合检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断有重要意义。     

Neutrophil-to-lymphocyte ratio for the assessment of hospital mortality in patients with acute pulmonary embolism

Introduction

Neutrophil-to-lymphocyte ratio (NLR), which is an essential marker of inflammation, has been shown to be associated with adverse outcomes in various cardiovascular diseases in the literature. In this study we sought to evaluate the association between NLR and prognosis of acute pulmonary embolism (APE).

Material and methods

We retrospectively evaluated blood counts and clinical data of 142 patients with the diagnosis of pulmonary embolism (PE) from Ondokuz Mayis University Hospital between January 2006 and December 2012. The patients were divided into two groups according to NLR: NLR < 4.4 (low NLR group, n = 71) and NLR ≥ 4.4 (high NLR group, n = 71).

Results

Massive embolism (66.2% vs. 36.6%, p < 0.001) and in-hospital mortality (21.1%, 1.4%, p < 0.001) were higher in the high NLR group. In multivariate regression analysis NLR ≥ 5.7, systolic blood pressure (BP) < 90 mm Hg, serum glucose > 126 mg/dl, heart rate > 110 beats/min, and PCO₂ < 35 or > 50 mm Hg were predictors of in-hospital mortality. The optimal NLR cutoff value was 5.7 for mortality in receiver operating characteristic (ROC) analysis. Having an NLR value above 5.7 was found to be associated with a 10.8 times higher mortality rate than an NLR value below 5.7.

Conclusions

In patients presenting with APE, NLR value is an independent predictor of in-hospital mortality and may be used for clinical risk classification.