人细胞色素P4502E1基因在胚胎鼻咽组织、鼻咽癌细胞和组织中的表达

背景与目的有研究表明,亚硝胺类化学物质能诱导体内外鼻咽细胞癌变,但作为间接致癌物,其活化主要依赖细胞色素P4502E1(CYP2E1)的代谢.本研究旨在探讨人细胞色素P4502E1(hCYP2E1)基因在化学物质二亚硝基哌嗪(N,N-dinitrosopiperazine,DNP)致鼻咽癌变中的可能作用,为鼻咽癌病因和发病学机制提供新的证据.方法采用RTPCR方法检测8例胚胎鼻咽组织,10例鼻咽癌活检组织,5株鼻咽癌细胞系(CNE1,CNE2,HNE1,HNE2,HNE3)和1株体外恶性转化的鼻咽细胞系(7429)CYP2E1mRNA水平的表达.用不同浓度(200,250,300μg/ml)化学致癌物DNP作用于体外培养的正常鼻咽细胞后,也用RTPCR检测其CYP2E1mRNA表达.结果(1)100%胚胎鼻咽组织(8/8)和鼻咽癌细胞系(6/6,含7429细胞系)、80%(8/10)的鼻咽癌活检组织均存在CYP2E1的表达;(2)经DNP处理的胚胎鼻咽细胞CYP2E1表达增高.结论鼻咽部存在可诱导的CYP2E1基因表达,提示该基因在亚硝胺类间接致癌物(如DNP)致鼻咽癌变过程中可能发挥重要作用.     

细胞色素P4502E1基因与鼻咽癌易感性分析

目的：为了探讨鼻咽癌的病因发病机理,进一步揭示鼻咽癌的易感因素,本文进行了细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１（ＣＹＰ２Ｅ１） 基因多态性与鼻咽癌易感性关系的研究。方法：采用病例－ 对照分子流行病学方法分析１０５ 例鼻咽癌患者和９３ 例正常人体细胞ＣＹＰ２Ｅ１ 基因型。结果： 发现ＲｓａＩ和ＰｓｔＩ识别的ＣＹＰ２Ｅ１ 基因纯合子突变型（Ｃ２／Ｃ２） 在鼻咽癌人群为５－７ ％ ,显著高于正常人群（１－１％ ） 分布（χ２ ＝ ４－８６ ,Ｐ＜ ０－０５） ;携带Ｃ２／Ｃ２ 基因型个体发生鼻咽癌的危险性比携带其它基因型个体高５ 倍左右。结论：ＣＹＰ２Ｅ１ 基因的多态性可能是鼻咽癌易感的因素之一。     

细胞色素P4502E1基因多态与贲门癌易感性关系探讨

 目的　探讨细胞色素P4 5 0 2E1(CYP2E1)基因多态与贲门癌易感性的关系。方法　采用病例对照研究方法和聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)检测技术 ,对 15 9例贲门癌患者和 192例对照的CYP2E1基因多态性进行分析。结果　CYP2E13种基因型在贲门癌病例组和对照组的分布差异有显著性 (χ2 =16 .0 4 ,P <0 .0 1) ,比值OR为 2 .37(95 %CI :1.5 2～ 3.70 )。贲门癌病例组CYP2E1(c1/c1)基因型频率为 6 0 .4 % ,对照组为 4 0 .1%。吸烟且携带CYP2E1(c1/c1)基因型的个体与携带CYP2E1(c1/c2或c2 /c2 )基因型的不吸烟者相比 ,患贲门癌的OR为 4 .6 8(95 %CI:2 .19～ 10 .0 4 )。结论CYP2E1基因多态性与贲门癌易感性有关 ,与吸烟协同作用使贲门癌的危险显著增加     

细胞色素P450 2E1基因多态与肝癌遗传易感性研究

目的：探讨细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因多态与肝癌的关系。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对８４例肝癌患者和１４４例健康对照的细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因ＲｓａⅠ多态进行检测。结果：病例组基因型Ａ频率为７１．４３％,等位基因ｃ１频率为８４．５２％,对照组则分别为５５．５６％和７５．３５％,两组差别均有统计学意义（Ｐ〈０．０５）。其比值比分别为２．００和１．７９,提示具有基因型Ａ或等位基因ｃ１的个体患肝     

细胞色素P450 2E1和畸胎瘤细胞源性生长因子在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）中细胞色素P450 2E1（CYP2E1）、畸胎瘤细胞源性生长因子（PCDGF）的表达与肿瘤临床病理参数之间的关系.方法 选择郑州市第一人民医院外科2007年7月至2011年5月间手术切除ESCC标本42例及20例癌旁正常组织.采用免疫组织化学方法检测食管鳞状上皮中C YP2E1与PCDGF的表达.结果 ESCC中CYP2E1、PCDGF的阳性表达率分别为83.3％（35/42） 、88.1％（37/42）,均较正常食管上皮明显增加（P＜ 0.05）;PCDGF与肿瘤的组织分化程度（r=0.444,P＜ 0.05）、浸润深度（r=0.332,P＜0.05）、淋巴结转移（r=0.476,P＜0.05）和TNM分期（r=0.450,P＜ 0.05）有关;CYP2E1的表达与肿瘤的组织分化程度呈负相关（r=-0.518,P＜0.05）,而与浸润深度呈正相关（r=0.388,P＜ 0.05）.CYP2E1和PCDGF在肿瘤中的表达有相关性（r=0.483,P＜ 0.05）.结论 ESCC中CYP2E1和PCDGF相互协同参与了肿瘤生长、浸润和转移,可能成为判断食管癌生物学行为及患者预后的重要指标.     

93. 细胞色素P450 2E1在人鼻咽部的表达及体外表达模型的建立

细胞色素P4502E1是细胞色素P450（CYPs）超家族的主要成员之一，参与内源性固醇类、脂肪酸和外源性的药物、酒精及化学致癌物的代谢。亚硝胺是一类环境中广泛存在的间接致癌物，它在体内的代谢活化主要由CYP2E1介导。本室早些时候曾应用二亚硝基哌嗪（DNP）体外诱导人胚鼻咽上皮细胞恶性转化获得成功，因此推测在鼻咽部可能存在DNP的代谢活化酶。本文采用RT-PCR对8例人胚鼻咽上皮细胞（HENE）、1例恶性转化鼻咽细胞系(7429）、5例鼻咽癌细胞系（CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、HNE3）和10例鼻咽癌（NPC）活检组织CYP2E1表达检测后，结合Western blot对CNE2的CYP2E1表达分析，首次发现了CYP2E1在鼻咽组织的表达。同时，发现200 μg/ml～300 μg/ml DNP能使CYP2E1 cDNA在HENE细胞表达明显增强。这些结果提示CYP2E1可能在DNP诱发的正常人胚鼻咽上皮细胞恶性转化中起作用。基于CYP2E1在化学致癌物遗传毒理学中的重要作用，为进一步对其肿瘤发生相关功能研究的需要，我们采用基因重组的方法构建了人CYP2E1 cDNA真核表达载体pcDNA3.1-2E1，经脂质体Lipofectamine介导分别转入NIH3T3和CNE2细胞系，通过G418筛选后随机挑选若干抗性克隆扩大培养，建成稳定传代的转染细胞株。利用PCR和Southern blot对各转染细胞克隆外源基因整合情况进行了鉴定，结果显示有4个克隆NIH3T3-A4、NIH3T3-A8、CNE2-R12、CNE2-R18呈Southern杂交阳性，且经RT-PCR及Western blot分别证实了外源基因的稳定表达。说明人CYP2E1 cDNA真核表达细胞株的建立成功。用乙醇及DNP分别对此模型进行诱导后的表达检测发现CYP2E1蛋白水平的增加主要与mRNA水平增高有关，可能是二者介导了CYP2E1的转录活化或mRNA的稳定。可以预见，CYP2E1 cDNA真核表达细胞株的建立将为CYP2E1相关的化学致癌机制的阐明打下坚实基础。     

细胞色素P450 2E1基因多态性与食管癌易感性关系的Meta分析

目的探讨细胞色素P450 2E1（CYP2E1）基因多态性与食管癌易感性的关系。方法检索CBMdisc、CMCC、CNKI、Medline、Pubmed等数据库,并收集未公开发表的文章及硕、博士学位论文,获得有关CYP2E1基因多态性与食管癌易感性的关系的文献进行Meta分析,以病例组及对照组CYP2E1基因型分布的比值比（OR值）为效应指标,确定纳入标准,对文献进行筛选,异质性检验,然后应用Meta分析软件RevMan4．2．2对各研究原始数据进行统计处理,计算合并OR值及95％可信区间。结果按照纳入标准,最终进入系统评价的文献共有11篇病例对照研究,其中食管癌患者1094例,对照1329例,Meta分析结果合并OR=2．61,95％可信区间为1．68—4．05,说明CYP2E1基因型频率分布与食管癌的关联有统计学意义。结论对目前相关研究结果的Meta分析显示,CYP2E1基因多态性与食管癌易感性之间存在相关,即携带Rsa Ⅰ／PstⅠ识别的野生型CYP2E1基因纯合子的个体发生食管癌的危险性较高。     

中国人群细胞色素CYP2E1基因多态性与肝癌易感性的Meta分析

目的 探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法 计算机检索CBM、CNKI、VIP、Pubmed、Ovid等数据库,收集有关中国人群CYP2E1基因多态性与肝癌易感性的病例对照研究,以病例组和对照组CYP2E1基因型分布的比值比(odds ratio,OR)为效应指标,对文献进行评价筛选、异质性检验,应用RevMan 4.3软件对各研究原始数据进行统计,计算合并OR值及95%可信区间(confidential interval,CI).结果 最终纳入5篇病例对照研究,其中肝癌患者789例,对照864例,Meta分析结果 OR及95%CI为1.15(0.94～1.41),说明CYP2E1基因型分布与肝癌的关联性无统计学意义.结论 虽然中国人群CYP2E1基因型频率分布可能与患肝癌风险增加有关,但目前相关研究结果 的Meta分析尚不能得出单一基因CYP2E1是肝癌易感性基因的肯定结论 ,需进一步开展严格设计的流行病学研究加以证实.     

细胞色素P-450 1A1在人胎肾上腺细胞中的表达

目的 :研究与前致癌物和致突变物代谢活化密切相关的细胞色素P 4 5 0 (cytochromeP 4 5 0 ,CYP)1A1在人胎肾上腺细胞中的表达。方法 :用酶学和RT PCR技术检测胎肾上腺和肝细胞中CYP1A1酶活性和mR NA表达 ,并进行比较。结果 :人胎肾上腺和胎肝微粒体中不能检测到CYP1A1标志酶 7-乙氧异唑O -脱乙基酶 (EROD)活性 ,同时在CYP1A1诱导剂 3 -甲基胆蒽 ( 0 .5～ 2 .0 μmol·L-1,2 4h)诱导的人胎肾上腺细胞中也不能检测到EROD活性。而动物在体实验表明 ,3 -甲基胆蒽 ( 2 5mg/kgip ,qd× 3 )致成年大鼠肝脏EROD活性增强的同时 ,大鼠肾上腺EROD活性也提高。大鼠肾上腺EROD活性明显低于肝脏。RT -PCR结果进一步表明 ,胎肾上腺和胎肝中存在CYP1A1mRNA表达。结论 :和胎肝一样 ,胎肾上腺中存在低表达量的CYP1A1,提示发育期间的胎肾上腺具有潜在的致癌可能性     

细胞色素P450 2E1基因多态性与肺癌易感性的研究

目的 :研究与致癌物有关的代谢酶细胞色素P45 0 2E1(CYP 2E1)基因多态性和饮酒与肺癌易感性的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)和限制性片段长度多态性 (RestrictionFregmentLengthPolymorphisms ,RFLP)方法 ,分析 91例肺癌患者和 138例对照的Rsal认别的CYP 2E1基因型。 结果 :本次研究结果为CYP 2E1基因型频率在肺癌组和对照组的分布差异无显著性意义 (χ2 =1 35 5 ,P >0 0 5 ) ;CYP 2E1C1/C1基因型或饮酒单因素作用的比值比 (OddsRatil,OR)分别为 1 389和 3 33,而两者联合作用的OR为 5 4 1。结论 :CYP 2E1基因多态性与肺癌无明显相关性 ,但与饮酒有联合作用。     

细胞色素P450酶系在人鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的表达

背景与目的：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生与环境及遗传因素密切相关。环境中各种前致癌物需经代谢酶包括细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450)的活化才具有致癌作用。本研究拟检测鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的CYP450基因表达,以了解与鼻咽部组织中致癌物代谢活化有关的CYP450基因。方法：利用下述两种方法检测CYP450基因的表达：(1)混合7例鼻咽非癌组织的RNA构建cDNA文库,进行克隆测序及生物信息学分析;(2)逆转录14例鼻咽癌组织及8例鼻咽非癌组织的RNA为cDNA,以PCR扩增检测CYP450基因的表达。结果：cDNA文库检测的CYP450基因EST(Expressed SequenceTag)有CYP1Bl、CYP2F1、CYP2J2、CYP4B1、CYP4F12、CYP5A(TBXAS1)、CYP20A1和CYP51A1,其中CYP481的EST拷贝数最高,达16个拷叭;RT—PCR检测表达的CYP450基因有CYP1A1、CYP1B1、CYP2A6、CYP2A13、CYP286、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP2El、CYP2Fl、CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7、CYP4B1,其中CYP1B1、CYP286、CYP481已经在文库检测有表达。总共有19个CYP450基因在鼻咽癌及鼻咽非癌组织表达,表达较高的基因有CYP1B1、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A5和CYP481。结论：鼻咽部组织表达CYP450基因种类较多,其中包括与前致癌物代谢活化相关的基因。     

细胞色素P450 1A2的转基因细胞及其应用

1引言 细胞色素P450(CYP是一种含血红素酶,广泛分布于从细菌到动物中,能代谢各种外源性和内源性化合物.动物肝微粒体中的CYP能代谢外源性物质,如药物、农药、环境污染物、前突变物和/或前致癌物.细胞色素P450 1A2(CYP1A2)能代谢芳香胺、杂环胺、黄曲霉素B1等许多类化合物.转CYP1A2的各种细胞系的建立为研究CYP1A2的功能提供了新的工具.到目前为止,已经建立的细胞系有细菌、酵母菌、昆虫细胞和哺乳动物细胞.最近,CYP1A2和其他微粒体电子转运系统如NADPH-细胞色素P450还原酶共同表达成功,提高了异源性CYP1A2的代谢能力.另外,为了重建杂环胺的完全代谢活化系统,建立了同时表达CYP1A2和二相酶(phase Ⅱ enzyme)N-乙酰转移酶的细胞系.各种永生的细胞系已经在毒理学试验领域内取得发展.下面按不同的细胞系说明它们的应用.     

细胞色素P450 2E1基因多态性与结直肠癌易感性的关系

目的：研究细胞色素P4502E1（CYP2E1）基因多态性与结直肠癌易感性的关系。方法：对315例结直肠癌患者和439名对照人群进行病例对照研究,PCR-RFLP检测其基因型。结果：1）c1/c1、c1/c2和c2/c2基因型分布频度在结直肠癌组和对照组间差异有统计学意义,Х^2=6.58,P=0.037。与c1/c1基因型相比,c2/c2基因型发生结肠癌的危险性显著升高;2）有饮酒习惯者发生结直肠癌的危险性显著升高;3）CYP2E1RsaⅠ多态与饮酒习惯有显著的协同作用。结论：CYP2E1RsaⅠ基因多态和饮酒习惯影响结直肠癌的易感性,二者在结直肠癌发生中有显著的协同作用。     

BκF对体外培养人肝细胞诱导细胞色素P4501A的研究

目的: 研究体外培养的人肝细胞经苯并[κ]萤蒽(BκF)诱导后其细胞色素P4501A(CYP1A)亚家族的组成.方法:采用Bis-Tris-HCI缓冲的聚丙烯酰胺凝胶免疫印迹电泳系统和多克隆羊抗人CYP1A1/CYP1A2及兔抗人CYP1A2抗体对经5 μmol/L BκF诱导24 h的6名捐献者的肝细胞中表达的CYP1A1和CYP1A2进行分离鉴定.结果:6份样品中5份仅检出CYP1A1,而另1份则2种CYP均被检出,其CYP1A1/CYP1A2的比值为0.942;溶剂对照诱导的肝细胞CYP1A1和CYP1A2均未检出.结论:新鲜的人肝细胞经BκF诱导后CYP1A亚家族的表达因人而异,与直接从组织制备的人肝微粒体中的CYP1A的水平有明显不同.     

细胞色素氧化酶P4502C19的研究进展

细胞色素氧化酶P4502C19（CYP2C19）又称S-美芬妥英差劲化酶，其活性在人群分布中呈明显的遗传多态性。全文就近几年的P4502C19的检测方法，基因多态性分子机制，基因多态性与药物和肿瘤易患性的关系等研究进展作一综述。     

细胞色素P450 2E1和谷胱甘肽转硫酶P1基因与食管癌易患性

目的研究与致癌物亚硝胺代谢激活有关的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因（ＣＹＰ２Ｅ１）,和与致癌物代谢解毒有关的谷胱甘肽转硫酶Ｐ１基因（ＧＳＴＰ１）多型性与食管癌易患性的关系。方法采用病例－对照分子流行病学方法。以ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法分析食管癌、食管上皮重度增生病例,和与其年龄性别配对的正常对照者（各４５例）ＣＹＰ２Ｅ１和ＧＳＴＰ１的基因型。结果ＧＳＴＰ１基因型在病例和对照者中的分布无显著差别,但ＲｓａＩ识别的ＣＹＰ２Ｅ１基因型,在食管癌、食管上皮重度增生病例及其正常对照者中的分布差别显著。ＣＹＰ２Ｅ１突变型基因频率在正常对照组中为５５．６％,显著高于食管上皮重度增生病例（１７．８％）和食管癌病例（２０．０％;χ２＝２０．８,Ｐ＜０．００１）;携带野生型ＣＹＰ２Ｅ１的个体,发生食管上皮重度增生和食管癌的危险性,比携带变异型ＣＹＰ２Ｅ１的个体各高５倍。结论ＣＹＰ２Ｅ１基因是涉及食管癌变早期过程的遗传易患性因素。