HBsAg检测的胶体金法与ELISA法效果比较

乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的检测方法有许多种,本文通过对150份体检血清标本通过胶体金法与ELISA法两种方法同步检测,从而对两种方法的检测效果进行比较。     

HCV基因分型试剂盒评价血清盘的构建与应用

目的构建HCV基因分型试剂盒评价血清盘,对国内HCV基因分型试剂盒进行评价与应用,以评估我国HCV基因分型试剂盒的质量。方法收集全国不同省份、不同人群疑似HCV的样本,首先对样本进行筛查试验和病毒载量检测,选取样本的病毒载量大于1 000 IU/ml,再用测序法确定样本的HCV基因型,对确定基因型的样本进行分析,每个基因亚型选择2支,再加上2支病毒载量为阴性的样本,构建成1套HCV基因型试剂盒评价盘,分装并评价其稳定性,并利用评价盘对HCV基因分型试剂盒进行质量评估。结果 HCV NS5B区、CORE区测序基因型结果与血清盘参考预期结果的准确性均为100%(7/7);828份样本中共检测出7种基因亚型,分别为1a、1b、2a、3a、3b、6a、6n,未检测到其他罕见型别(4型、5型),综合考虑各方面因素,每个基因亚型选择2支样本再加上2支HCV阴性样本共16支样本,组成HCV基因型试剂盒评价盘;经反复冻融3次后检测基因型,其稳定性无影响;利用构建的HCV基因型评价盘对分型试剂盒进行评价,其基因型检出准确性为9/14,其中试剂盒检测范围之内的5种型别有1个样本未检测(3b),而对于检测范围之外的基因型(1a、6n),将基因型1a均错判为1b(2/2)。结论本实验室构建的HCV基因分型评价盘充分考虑了我国HCV基因型的流行情况及国内HCV基因分型试剂盒的检测范围,能够对国内HCV基因分型试剂盒的质量进行有效评价。     

ToRCH-IgM ELISA试剂盒的研制和应用

目的 建立快速、敏感、特异性强、重复性好的抗ＴｏＲＣＨ－ＩｇＭ诊断方法。方法 在传统ＥＬＩＳＡ间 接法基础上进行了改良,在试剂盒的研制过程中,使用了自制的吸附剂、加速剂和稳定剂,建立一种抗ＴｏＲＣＨ－ＩｇＭ／ＥＬＩＳＡ快速诊断方法。结果 改良的ＴｏＲＣＨ－ＩｇＭ／ＥＬＩＳＡ诊断试剂具有快速、敏感、特异性强、重复性好等优点。结 论 该试剂可用于ＴｏＲＣＨ－ＩｇＭ的检测。     

ELISA法与胶体金试纸条检测HBsAg差异分析

目的探究胶体金试纸条与ELISA法检测HBsAg临床应用价值。方法分别用胶体金试纸条与ELISA法检测360份标本中的HBsAg,并对阳性率进行比较,然后将强阳性的10份标本作倍比稀释,观察2种检测方法灵敏度的差异。结果2种方法的阳性率之间无显著差异,ELISA法灵敏度较胶体金试纸条灵敏度高。结论2种方法皆是检测HBsAg的良好方法,胶体金试纸条法操作简便、快速适用于急诊及健康人群的筛查,ELISA法适用于常规检测。     

应用国产疏水介质纯化重组HBsAg的研究

用国产Butyl－S－Sepharose流水介质,以HIC技术纯化rHBsAg（CHO细胞产）,与瑞典Pharmacia公司生产的同类流水介质对照。比较通过HIC后rHBsAg的漏出,纯化rHBsAg终产品性状和纯度等指标。结果表明二者差异无显著意义,且国产流水介质纯化的HBsAg的某些性状有所改善。     

DTP—ELISA试剂盒的试制及应用

本文用 ELISA 法测定了普通人群和免疫前后人血清中白喉、破伤风及百日咳(DTP)抗体水平,并与经典的破伤风抗毒素小鼠中和试验(TNT)、白喉抗毒素家兔皮内中和试验(DNT)及百日咳细菌凝集试验(PA)进行了比较。同时试制出 DTP 血清抗体定性和定量检测药盒。结果表明,在人血清抗体测定中 ELISA 与 TNT、DNT 及 PA 的符合率分别为91.5%、97.9%和91.5%,三者间有良好一致性。20份免疫马血清破伤风抗毒素测定表明 ELISA 与 TNT 相关良好(r=0.84,P<0.01)。以国际上公认的免疫保护水平(TAT≥0.01IU/ml、DAT≥0.01IU/ml 和 PA≥1∶320)为标准,换算成 ELISAP/N 比值(≥2.1)作为试剂盒判断标准,测定了100份普通人群和81例 DTP 接种前后小儿血清,结果100份普通人群血清中含的抗白喉、破伤风及百日咳抗体者分别为28%、38%和45%;接种后小儿血清阳性率分别为88.9%、(白喉)、90.1%(破伤风)和81.5%(百日咳)。ELISA 法具有良好重复性和敏感性,简便经济,可作为临床和流行病学调查及菌苗效果监测的有效工具。     

国产试剂配制D-MEM与GIBCO生产的D-MEM比较

应用国产氨基酸、无机盐、葡萄糖等全部国产试剂,按 D-MEM 组成,自行配制的3D-MEM与 GIBCO 生产的 D-MEM 进行平行试验,比较对分泌 HBsAg 工程细胞的支持生长能力和产生 HBsAg 数量的效果。结果指出:二者未见有任何差别,无论细胞形态,维持细胞生长时间,细胞密度完全一样。分泌 HBsAg工程细胞在该培养液中连传7代,生长良好,长期培养核型无任何改变,用两种培养液培养该细胞,HBsAg分泌水平相同,均可达到反相血凝滴度1∶1024的水平。     

浅析ELISA法质量控制要点

ELISA法,即酶联免疫吸附实验,是应用免疫学技术测定标本的方法,主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。由于ELISA法的特异性及高灵敏度等特点,该方法在医学检测、生物制品研究等方面得到及其广泛的应用,因此,准确的实验结果至关重要。但是,由于ELISA法的高敏感性,ELISA法的试验结果易受多种因素影响,为了得到准确的实验结果,必须严格遵守操作规程,加强实验质量控制。因此,质量控制是保证实验结果准确性的关键,根据本实验室多年的实验操作经验,就ELISA法实验操作中的质量控制要点进行了简要阐述。     

检测疫苗中小牛血清残存量ELISA试剂盒的研制

目的　建立一种简便、灵敏、特异、准确的疫苗中小牛血清残存量检测方法。方法　采用ELISA双抗体“夹心法” ,即固相载体上包被特异性抗小牛血清抗体 ,加入待测样品 ,反应后再加入酶标记抗小牛血清抗体 ,经显色后测定。结果　固相载体最适包被抗体的量为 1μg/孔 ,反应体系的pH为6 .8～ 7.2 ,两步反应的最佳时间各为 1h ,最适温度为 37℃。检测的最适抗原 (小牛血清 )范围为 2 0～ 10 0ng/ml,该试剂盒的灵敏度为 3ng/ml ,变异系数CV(n =2 8孔 /次 )平均为 5 .7%。经检测 6批疫苗的结果与放免结果相符合。结论　该法特异性强 ,灵敏度高 ,为疫苗中小牛血清残存量的检测提供了一种新方法     

检测HIV-1抗体的合成肽ELISA试剂盒的制备及应用

应用 HIV-18 P41抗原决定簇的合成肽作为抗原,建立了合成肽 ELISA 试剂盒,并用于血清HIV—1抗体的初筛试验。其 P/N 值为7.58,阴性平均 OD 值仅0.139,无假阳性和假阴性。用该试剂检测云南边境居民血清807份,其结果与应用进口 ELISA 试剂盒和免疫印迹法所测的结果相同,该试剂可用于HIV—1抗体检测。     

应用ELISA与中和试验测破伤风抗毒素的比较

用ELISA间接法测得的TT，DT．DTP免疫豚鼠后的破伤风毒素水平，与用中和试验所得结果之间有很好的相关性。ELISA毒素结合抑制法测得的标抗、马抗TT血清、DTP免疫的豚鼠血清的抗毒素水平与中和毒素试验所得结果之间也有很好的相关性。ELISA方法简单、经济，结果可靠，适于检测破伤风抗毒素水平。     

36例低水平HBsAg的临床检测与评估

全面检测低水平乙肝表面抗原(HBsAg)患者的各项临床指标,比较酶联免疫分析法(ELISA)与微粒子酶免疫分析法(MEIA)在临床检测中的灵敏度,评估检测低水平HBsAg的临床价值。     

国产HIV抗体诊断试剂的质量评价

目的评价国产ＨＩＶ抗体诊断试剂的质量。方法用４４００份义务献血员的血样,评价国内９ 个厂家的 ＨＩＶ抗体诊断试剂的特异性;ＨＩＶ抗体阳性样品 ３ ３６８份,评价试剂的灵敏度;测定各试剂结果的真实性 及相关质量指标。结果国产ＨＩＶ抗体诊断试剂的特异性、阳性预示值基本在９９％以上,但灵敏度仍存在一定差 距。结论通过对国内主要生产厂家生产的试剂质量的评价,了解制品质量,有益于进一步提高国产试剂的质量。     

国产与进口复肥肥效比较

龙游化工厂采用尿素、过磷酸钙、钾盐等粉状基础肥料进行掺混造粒,并用硫酸铵包裹,自然干燥而制成的三元复合肥料,经我所与龙游县农业局、龙游区农技站等单位协作,在大麦、油菜、苎麻、柑桔、茶叶等作物上进行大田肥效试验,增产效果显著。为了深入研究龙游化工厂复肥的增产效果、肥料利用率及其后效,进行了盆栽试验,     

国产抗-HIV检测试剂的质量评价

应用国家HIV质控参比品及美国BBI抗体参比血清对国内生产的抗－HIV检测试剂质量进行了考核，并与国外试剂进行了比较。结果显示，国产试剂在HIV抗体阳性标本检出率方面基本达到了国外试剂的水平，但在特异性方面尚有待改进。     

国产转子与进口转子的分析比较

通过国产增产节能型郭与进口转子的运行特点对比、效率计算和振动的频率谱分析,比较两者的优缺点,同时也对国产转子提出了改进建议。     

检测疫苗残余牛血清ELISA试剂的质量控制

目的　检测疫苗残余牛血清ELISA试剂的质量控制。方法　将用于生产的 10批牛血清混合后 ,免疫家兔制备抗血清 ,以纯化抗牛血清兔IgG作为包被抗体、HRP 酶标抗体作为指标抗体 ,采用ELISA双抗体夹心法进行线性范围、精密度、准确度、特异性评价等一系列检测。结果　兔抗牛免疫血清双扩效价可达 1∶16 ,免疫血清、纯化抗体和酶标抗体均含有抗牛血清白蛋白及牛IgG等多种蛋白成分的抗体 ;检测疫苗中残余牛血清含量最佳线性范围为 0 78～ 2 5ng/ml,精密度 (回收率为 80 %～ 112 . 5 % ,CV为 2 . 5 %～ 9 0 % )和准确度 (回收率为 96 . 7%～112 . 5 % ,CV为 1. 4 %～ 9 .4 % )良好 ,检测限度为 1 5ng/ml,检测限量为 3ng/ml;与正常马、兔、豚鼠血清以及不同病毒性疫苗基质液均无交叉反应 ,可定量检测不同病毒性疫苗中的残余牛血清。结论　所制备的ELISA试剂特异性强 ,灵敏度高 ,重复性好 ,适用于常规疫苗中残余牛血清的检测。     

国产硫化仪与进口硫化仪的比较

随着橡胶行业的蓬勃发展,越来越多的橡胶制品厂对橡胶硫化测试仪器(简称硫化仪)的需求增加。对于刚刚接触该仪器的用户来说,选择适当的型号至关重要。根据近来一些企业提出的问题,现将国产(以北京环峰化工机械实验厂的产品为例)和进口(以美国孟山都产品为例)两种设备进行简单的比较。硫化仪可分为有转子型和无转子型;直接绘图输出(输出到打印机或其它绘图设备)和计算机同步信号输出(可实现自动控制)。有转子型的硫化仪也称为盘式硫化仪,国产型号为P3555,进口型号为孟山都ODR2000;无转子型国产型号为MM4130,孟山都为MDR2000。一、P3555与…     

BCG-CpG-DNA对重组HBsAg的免疫佐剂作用

目的研究BCG-CpG-DNA对重组HBsAg的免疫佐剂作用。方法以BCG-CpG-DNA与重组HBsAg混合免疫小鼠,以铝佐剂疫苗为对照,采用放射免疫法检测抗-HBs中和抗体水平,ELISA法分析抗体亚类,酶联免疫斑点试验(ELIS-POT)检测CD8+细胞毒T淋巴细胞(CTL)功能。结果BCG-CpG-DNA能提高抗-HBs中和抗体水平,促进抗原特异性IgG2a的产生,诱导Th1型免疫应答,与铝佐剂协同作用能部分逆转Th2反应。同时能增强抗原特异性CD8+T淋巴细胞的杀伤作用,实验组与对照组比较差异有显著意义。结论BCG-CpG-DNA对HBsAg有较好的免疫佐剂作用,有可能成为一种新型的免疫佐剂。     

国产与进口钢丝绳输送带生产线分析比较

对国产和加拿大进口两条钢丝绳输送带生产线的技术特征、各部分功能、生产效率和产品质量进行了分析比较．指出了改进完善设备功能的方法。两条生产线生产的输送带外观质量相差无几，而进口生产线生产输送带的内在质量要高于国产生产线。