二羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7生长影响

大豆异黄酮是豆科植物的重要成分.近年来研究显示,其具有抗肿瘤作用,尤其对人类乳腺癌细胞株及前列腺癌细胞株均具有明显的体外抗肿瘤作用.献表明,二羟异黄酮可以抑制细胞增殖及阻滞细胞周期.本实验初步探讨二羟异黄酮的抗肿瘤作用.     

三羟异黄酮对人乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察三羟异黄酮对体外培养的人乳腺癌细胞MDA—MB—435S细胞存活率、细胞周期和凋亡的影响。方法 用噻唑蓝(MTT)法观察三羟异黄酮对MDA—MB—435S细胞生长的影响；流式细胞仪观察三羟异黄酮处理人乳腺癌细胞后细胞周期改变的剂量效应和时间效应；吖啶橙／溴乙锭染色法在荧光显微镜下观察三羟异黄酮对MDA—MB—435S细胞的凋亡作用。结果 随剂量增大和作用时间延长，三羟异黄酮对细胞增殖的抑制作用逐渐增强。同时可以阻滞细胞周期于G2—M期，而且随剂量的增大，作用时间的延长，阻滞作用也增强。经吖啶橙染色法于荧光显微镜下可见，随三羟异黄酮剂量增大，细胞凋亡也逐渐明显。结论 三羟异黄酮可抑制人乳腺癌细胞的增殖，其作用机制可能包括诱导细胞凋亡和G2—M期阻滞。     

三羟异黄酮拮抗表皮生长因子促乳腺癌细胞增殖

目的通过体外细胞，观察三羟异黄酮(genistein)和表皮生长因子(EGF)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法用不同剂量genistein、不同剂量EGF、固定剂量genistein和EGF的混合液，作用于体外培养的雌激素受体阳性(ER^ )人乳腺癌细胞株MCF-7，作用不同时间后，用噻唑蓝(MTT)法测定细胞生长情况。结果genistein剂量超过25μmol／L以后对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖均有抑制作用，而且随剂量增大和作用时间延长其抑制作用逐渐增强，其中50μmol／L为最适宜浓度，EGF剂量超过4．15nmol／L以后对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增有明显的促进作用，而且随剂量增大和作用时间延长其作用逐渐增强，其中8．30nmol／LEGF联合作用于MCF-7细胞，则可显示出两者有交互作用，EGF对细胞的促增殖作用可以被genistein的作用逆转。结论genistein可抑制EGF诱导的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖。     

三羟异黄酮对乳腺癌异种移植瘤血管生成影响

目的 探讨三羟异黄酮(genlstein)对原癌基因(HER-2／neu)高表达乳腺癌血管形成的影响及其与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法 应用基因转染技术建立HER—2／neu高表达的乳腺癌细胞(MCF—7／HER—2)。免疫缺陷裸鼠(BALB／c)皮下接种乳腺癌(MCF—7和MCF—7／HER—2)细胞，其中接种MCF—7／HER—2细胞的裸鼠随机分为3组：对照组；genistein处理组：HER—2／neu抗体处理组。应用免疫组化法观察移植瘤内微血管密度(microvessel density，MVD)和VEGF的表达变化。结果 MCF—7／HER—2移植瘤与MCF—7移植瘤相比血管密度较大。VEGF表达增强；MCF—7／HER—2移植瘤经genistein和HER—2／neu抗体处理后。移植瘤的血管密度减少，VEGF表达降低。结论 HER—2／neu高表达能促进乳腺癌的血管生成，genistein可能通过下调VEGF的表达从而抑制HER—2／neu高表达乳腺癌的血管生成。     

三羟异黄酮抑制人乳腺癌作用机制的研究进展

三羟异黄酮（genistein，Gen）是一种异黄酮类化合物，天然的Gen主要存在于豆科类植物中。有关Gen生理功能研究始于20世纪50年代。1980年，Troll等首次报道在动物饲料中添加大豆异黄酮制品能降低x线诱导的大鼠乳腺癌发生率。自此，关于Gen与乳腺癌关系的研究不断增多。有关文献报道了Gen在抑制乳腺癌的发生、发展、转移，促进癌细胞凋亡以及癌症的辅助治疗等各方面都起到了积极的作用，但其作用机制尚未完全阐明。     

大豆异黄酮抑制人乳腺癌细胞生长及作用机制研究

采用体外细胞培养的方法 ,探讨大豆异黄酮对体外培养的人乳腺癌MCF - 7细胞生长的作用及作用机制。结果表明 ,大豆异黄酮抑制MCF - 7细胞生长 ,诱导MCF - 7细胞凋亡。蛋白水平检测表明大豆异黄酮可使MCF - 7细胞iNOS表达升高。结果提示大豆异黄酮抑制MCF - 7细胞生长 ,诱导细胞凋亡 ,并主要是通过调节iNOS基因表达实现的     

三羟异黄酮对人乳腺癌细胞外调节激酶影响

目的探讨三羟异黄酮（genistein）对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞外调节激酶1/2（ERK1/2）MAPK信号转导通路的影响.方法采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）比色法分别检测三羟异黄酮以及与ERK1/2上游激酶MEK1/2抑制剂联合作用时对MDA-MB-231增殖的抑制作用;应用Western blot蛋白免疫印记法分别检测ERK1/2总蛋白、c-Jun、c-Fos蛋白的表达.结果 MTT结果显示,与对照组相比,三羟异黄酮作用48h后,细胞存活度随浓度增加而降低,合用MEK1/2抑制剂细胞存活度最低;Western blot分析提示,随三羟异黄酮剂量的增加,ERK1/2、c-Jun、c-Fos蛋白表达增加,但合用抑制剂后蛋白表达降低.结论三羟异黄酮可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,并激活了ERK1/2 MAPK信号转导通路;MEK1/2抑制剂可以抑制三羟异黄酮介导的ERK1/2活化,同时提高三羟异黄酮的肿瘤抑制作用.     

三羟异黄酮对成年大鼠生殖系统影响

植物雌激素对人类有很多益处,如预防乳腺癌^〔1〕、前列腺癌、结肠癌和子宫内膜癌^〔2〕,改善绝经期症状等。但研究证明^〔3-5〕,植物雌激素对动物生殖发育有不良作用,并且目前使用大豆异黄酮保健制品的人群也日趋增多。现已知此类保健品对更年期妇女能发挥雌激素样作用,但对正常成年人群是否有不良影响尚需进一步研究。本实验拟通过给予成年大鼠不同剂量的三羟异黄酮,观察大鼠生长发育的情况,评价膳食摄入三羟异黄酮对成年大鼠生长发育的影响。     

三羟异黄酮对断乳后大鼠生殖发育的影响

目的研究三羟异黄酮对断乳大鼠生殖发育的影响。方法将3周龄幼鼠48只按体重随机分为3组,雌雄各8只,口饲给予含不同剂量三羟异黄酮的基础饲料[对照组0mg/(kg.d),中剂量组20mg/(kg.d),高剂量组100mg/(kg.d)],待各组大鼠发育至9周龄时,测雌鼠血清雌二醇水平,雄鼠血清睾酮水平;待各组大鼠发育至13周龄时,分离雌鼠子宫、卵巢,雄鼠睾丸进行病理检查,用Western blotting方法测定雌激素受体(ER)的表达水平。结果与对照组相比,9周龄时雌鼠血清雌二醇水平降低,雄鼠血清睾酮水平升高;13周龄时,雌鼠体重和摄食量下降,阴道开放提前,生殖器与直肠间距(AGD)减小,卵巢称重减少。病理切片显示雌鼠子宫腔扩大,子宫扩张,血清雌二醇水平有所降低,子宫雌激素受体ER表达量降低;雄鼠摄食量10周龄左右有所升高,血清睾酮水平升高,但体重无明显升高,睾丸下降时间未见提前,睾丸称重无差别,病理切片未见异常。结论三羟异黄酮对断乳后大鼠的生殖指标影响较大,其中对雌性大鼠的影响大于雄性大鼠,但是对大鼠体重和摄食量的影响主要在其成年后,并且此种影响与其激素水平和受体表达有关。     

三羟异黄酮影响生殖发育的研究现况

三羟异黄酮是植物雌激素的一种,早期研究发现其具有抗肿瘤等有益于人体健康的作用.但近期动物实验和流行病学调查发现大量摄入三羟异黄酮对母体和子代的生殖发育有不良作用.     

染料木黄酮对MCF-7细胞肿瘤相关基因表达的影响

目的:用基因芯片技术观察染料木黄酮(genistein,GS)对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7肿瘤相关基因表达的影响。方法:75×10-6mol/LGS对MCF-7细胞处理72h,收集细胞并提取总mRNA,用Cy5和Cy3两种荧光染料通过逆转录反应将mRNA分别标记成两种探针,与载有一组靶基因的人肿瘤相关基因表达谱芯片杂交、经计算机扫描分析得出GS处理后的差异表达基因。结果:筛选出包括与细胞增殖、细胞凋亡、雌激素反应等相关的差异表达基因共22条(7.3%,22/300)。18个下调基因(占81.8%)主要是促进细胞增殖活力的原癌基因和与肿瘤细胞逃逸、扩散有关的肿瘤细胞表面抗原基因;4个上调基因均为雌激素反应性基因。结论:GS所影响的基因多与细胞增殖和肿瘤细胞免疫逃逸调节有关,调节此类基因的表达可能是GS发挥抗癌防癌作用的主要机制;GS上调的4个基因均属于雌激素上调基因,表明GS与雌激素受体结合后,除产生抗雌激素样效应外,还能激活雌激素反应元件而表现一定的雌激素效应。     

染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究

目的 :　探讨染料木黄酮对体外培养的人胃癌 SGC- 790 1细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法 :　用 MTT法、集落形成实验、透射电镜及流式细胞仪的方法 ,观察染料木黄酮处理 SGC- 790 1后细胞生长和细胞凋亡。结果 :　 (1 ) MTT法和集落形成实验证实染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞生长有抑制作用 ,抑制作用呈剂量 -效应关系 ;　 (2 )透射电镜可见 SGC- 790 1细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂等凋亡细胞的形态学改变 ;　 (3)流式细胞仪检测到凋亡峰。结论 :　染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞有抑制作用 ,而这一作用的机制之一是通过诱导人胃癌细胞发生凋亡 ,即诱导肿瘤细胞发生凋亡是染料木黄酮抑制肿瘤细胞生长的重要机制之一     

染料木黄酮对人成骨细胞凋亡的影响

目的: 观察染料木黄酮(Gen)对人成骨细胞凋亡的影响。方法: 将体外分离到的人骨膜成骨细胞在高糖DMEM(含10 %小牛血清)中进行纯化扩增至第三代,然后接种于无酚红高糖DMEM培养液中(含10 %经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清,CDT-FBS),4 d后用0.25 %的胰蛋白酶消化、收集细胞,用PBS洗涤2次后,用于各项实验。指标包括:流式细胞仪分析细胞凋亡比例,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带,免疫组化观察Gen对Bax、Bcl-2及caspase-3表达的影响。结果: 无雌激素(E2)血清培养可诱导成骨细胞发生凋亡(45.7 %),加入10-8 mol/L E2、10-6 mol/L 和10-5 mol/L Gen对细胞处理48 h,成骨细胞凋亡率分别降低到15.3 %、36.3 %及28.4 %(P<0.05)免疫组化结果表明,同E2类似,Gen可抑制Bax和capsase-3的表达,而促进Bcl-2蛋白的表达。结论: 染料木黄酮可能是通过影响雌激素受体途径而发挥其骨保护作用的。     

染料木黄酮抑制DU145细胞的作用及其机制研究

目的: 研究大豆异黄酮主要成分染料木黄酮 (GEN)对离体培养DU145前列腺癌细胞的生长抑制作用及其机制。方法: DU145前列腺癌细胞接受不同浓度的GEN处理,克隆形成试验用于测定DU145细胞的生存曲线及IC50;DNA ladder和DAPI(4-6-二氨基-2-苯基吲哚)染色法用于检测细胞凋亡;流式细胞仪和免疫印迹法分别用于观察细胞周期改变和相关蛋白表达。结果: 克隆形成试验显示: GEN能抑制离体培养DU145细胞的生长,其作用于DU145细胞的IC50约为30 mmol。GEN 处理24h后,早发细胞凋亡仅见于高浓度GEN处理组,72 h后凋亡亦见于较低浓度GEN组。流式细胞仪显示GEN可导致DU145细胞G2/M期阻滞;细胞周期相关蛋白分析显示随着GEN浓度的提高,p21cip1蛋白表达稳步上升,周期素B1呈双相改变,cdc-2则变化较小。结论: GEN可抑制离体培养DU145前列腺癌细胞的生长,其作用机制可能与GEN诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关,后者同时伴有细胞周期相关蛋白表达的改变。     

染料木黄酮对小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的印制作用

目的:研究染料木黄酮(genistein,Gen)对腹水型小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的抑制作用及其机制。方法:MTT法检测Gen对HepA-H的增殖抑制作用。应用电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测Gen诱导的HepA-H细胞凋亡。同时,将HepA-H皮下接种于NIH小鼠的足垫,Gen混悬于2%的卵磷脂中,从细胞接种的D2起,每日以100或200mg/(kgbw.d)腹腔给药,D15取淋巴结观察,并计算转移率。TUNEL法检测淋巴结内凋亡的HepA-H细胞,并计算凋亡指数。结果:Gen在体外对HepA-H细胞具有良好的增殖抑制作用,呈量效、时效关系,并能诱导HepA-H细胞凋亡;在体内能减少荷瘤动物肿瘤体积和抑制肿瘤淋巴转移,给药组凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)。结论:Gen能明显抑制HepA-H肝癌细胞增殖和淋巴转移,其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

染料木黄酮对小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的抑制作用

目的:研究染料木黄酮(genistein,Gen)对腹水型小鼠肝癌高淋巴转移细胞株HepA-H的抑制作用及其机制。方法:MTT法检测Gen对HepA-H的增殖抑制作用。应用电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测Gen诱导的HepA-H细胞凋亡。同时,将HepA-H皮下接种于NIH小鼠的足垫,Gen混悬于2%的卵磷脂中,从细胞接种的D2起,每日以100或200mg/(kgbw.d)腹腔给药,D15取淋巴结观察,并计算转移率。TUNEL法检测淋巴结内凋亡的HepA-H细胞,并计算凋亡指数。结果:Gen在体外对HepA-H细胞具有良好的增殖抑制作用,呈量效、时效关系,并能诱导HepA-H细胞凋亡;在体内能减少荷瘤动物肿瘤体积和抑制肿瘤淋巴转移,给药组凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)。结论:Gen能明显抑制HepA-H肝癌细胞增殖和淋巴转移,其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

Rb基因在染料木黄酮抑制人乳腺癌细胞生长中的作用

目的:研究Rb基因在染料木黄酮(genistein,Gen)抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖中的作用。方法:采用MTT实验和集落形成实验观察Gen对人乳腺癌细胞增殖影响,Westernblotting检测Rb基因、细胞周期素cyclinE蛋白表达情况,RT-PCR检测Rb基因mRNA的表达。结果:Gen显著抑制MCF-7细胞生长,促进细胞Rb基因在蛋白及mRNA水平的表达,抑制cyclinE蛋白的表达。结论:Gen抑制人乳腺癌细胞增殖,其机制可能通过上调Rb基因表达,下调cyclinE蛋白表达。     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

染料木黄酮对MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF表达的影响

目的:观察染料木黄酮(genistein,Gen)对MDA-MB-453乳腺癌细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响,探讨Gen抗HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的分子机制。方法:5×10-5mol/LGen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,应用免疫组织化学、Westernblot及RT-PCR法检测MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF的表达变化。结果:Gen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,VEGF的mRNA和蛋白表达量随着处理时间的延长逐渐下降。结论:Gen能在转录和翻译水平下调HER-2/neu高表达乳腺癌细胞VEGF的表达,这可能是Gen抑制HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的机制之一。     

染料木黄酮的雌激素活性对辐照小鼠免疫功能的影响

目的研究染料木黄酮(genistein,Gen)的雌激素效应对辐射损伤的防护作用,为抗辐射功能食品的开发和对原有辐射防护剂的改进提供实验依据。方法观察应用他莫西芬(ERα阻断剂)和Faslodex(ERβ阻断剂)阻断受照小鼠雌激素受体(ER)活化情况下,Gen对接受4Gy全身照射小鼠血白细胞和淋巴细胞计数、血清溶血素及迟发型变态反应的影响。结果Gen可以降低辐照小鼠的血白细胞和淋巴细胞的减少幅度,增强免疫功能;他莫西芬与Gen合用对小鼠血白细胞和淋巴细胞计数及免疫功能无明显影响,表明他莫西芬不能阻断Gen对辐照的保护作用。Faslodex与Gen合用则仍降低受照小鼠血白细胞和淋巴细胞数量,也抑制免疫功能。表明Faslodex能阻断Gen的保护作用。结论Gen通过激活ERβ途径,增强辐射小鼠的免疫功能。