罗格列酮对肾间质损伤的防护作用及其机制

目的探讨罗格列酮对肾间质纤维化的保护作用及其机制。方法以大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)为模型,在不同的时间点(3d、7d、14d)观察梗阻侧肾间质基质含量;各组肾皮质间质巨噬细胞浸润情况;致纤维化的转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况;肾皮质多种与肾脏纤维化相关的结缔组织生长因子(CTGF)、骨形态发生蛋白7(BMP7)、Smad6信号蛋白等的mRNA表达及BMP7、PAI1的蛋白表达。结果罗格列酮能改善UUO所致的肾间质纤维化程度(P<0.05);显著减少间质巨噬细胞浸润数量;下调肾脏组织TGF-β1的表达(P<0.05);减少TGF-β1下游致纤维化因子CTGF及PAI1的表达;同时上调TGF-β1信号传导中抑制性因子BMP7和Smad6的表达(P<0.05)。结论罗格列酮能保护UUO所致的肾间质炎症和纤维化损伤。其可能的作用机制包括抑制肾间质炎症细胞浸润;减少TGF-β1表达、阻止TGF-β信号传导、抑制TGF-β1下游效应因子CTGF和PAI1的表达,增加抗纤维化抗炎作用的BMP-7蛋白表达等,从而从多层面阻断TGF-β1的致纤维化作用。     

黄芪对培养心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的 :探讨中药黄芪 (Astragalus,AS)对培养的心肌细胞氧化性损伤的保护作用及其机制 .方法 :体外培养的新生大鼠心肌细胞 ,分为 3组 :①对照组 (Normal组 ) ;②H2 O2组 :H2 O2 (0 .2mmol/L)与心肌细胞共育 1h ;③黄芪 +H2 O2组 :黄芪处理心肌细胞 30min后 ,加入H2 O2 与心肌细胞共育1h .心肌细胞损伤以细胞线粒体活性和乳酸脱氢酶 (LDH)活性来表示 ,同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量 ,均以比色法检测 .结果 :H2 O2 处理细胞后可使细胞LDH活性显著增高 (2 7± 3) μkat/L ,细胞线粒体活性明显下降 0 .36± 0 .0 4 ,SOD活性较正常细胞显著下降(2 31± 2 2 ) μkat/L ,MDA含量显著增高 (1 6± 3) μmol/L .黄芪处理细胞后可显著提高心肌细胞线粒体活性 0 .5 0± 0 .0 5 ,降低LDH活性 (1 6 .4± 1 .8) μkat/L ;并提高细胞抗氧化能力 ,表现为较H2 O2 处理组 ,SOD活性增高 (331± 4 0 ) μkat/L ,MDA含量下降 (1 0 .7± 2 .4 ) μmol/L .结论 :黄芪可对抗H2 O2 对心肌细胞的损伤 ,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力有关     

内皮素-1促进去甲肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨内皮素（ET－1）在去甲肾上腺素（NE）诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 采用无血清培养新生大鼠心肌细胞模型，以免疫组化鉴定心肌细胞；以Hoechst33258与PI双重荧光染色观察ET－1与NE单独或联合作用时心肌细胞凋亡率的变化。结果 ①实验培养的新生大鼠心肌细胞的纯度达90％；②NE呈剂量依赖性诱导心肌细胞凋亡；ET－1对心肌细胞凋亡率无明显影响；ET-1NE联合作用可显著增加心肌细胞的凋亡率。结论 内皮素－1可能促进去甲肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡。     

罗格列酮对急性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的：探讨罗格列酮对急性胰腺炎肺损伤的保护作用,为临床治疗提供参考。方法：采用5%牛黄胆酸钠逆行胰胆管内注射建立SAP肺损伤模型,并用罗格列酮进行干预。观察肺组织的病理改变及iN-OS mRNA、PPARγmRNA的表达。分析罗格列酮在急性胰腺炎肺损伤治疗中的作用。结果：干预组肺组织病理改变及i NOS mRNA表达均低于模型组、PPARγ mRNA的表达高于模型组。结论：罗格列酮可减轻急性胰腺炎肺损伤程度。     

中药对内皮素及一氧化氮的调控作用研究进展

血管内皮细胞(vessel endothelial cell,VEC)衬于血管腔的表面,具有屏障及选择性通透作用,可通过分泌多种生物活性物质参与血管舒缩、抗血栓、免疫功能及细胞增殖的调节[1].     

罗格列酮对重症急性胰腺炎的保护作用

目的:探讨罗格列酮对重症急性胰腺炎(SAP)的保护作用及其作用机制。方法:72只健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、SAP组及罗格列酮处理组。采用经十二指肠胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠SAP模型,于模型制作前30min腹腔内注射罗格列酮(10mg/kg)进行预处理,各组于术后3h、6h和12h分批处死动物,观察各组大鼠血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平的变化以及胰腺组织病理改变,并进行病理学评分。结果:SAP组血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO、胰腺组织病理学评分较SO组均明显升高(P<0.05),罗格列酮处理组各时间点血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO水平均较SAP组显著降低(P<0.05),6h、12h胰腺组织病理评分均显著低于SAP组(P<0.05),各时间点胰腺组织病理损伤较SAP组明显减轻。结论:罗格列酮可能通过减少TNF-α、IL-6的产生,减轻胰腺组织损伤,从而改善SAP病情。     

金钠多对体外缺氧致人大动脉内皮细胞分泌内皮素的影响

目的：探讨不同浓度金钠多对由缺氧所致培养的血管内皮细胞分泌内皮素功能的影响．方法：将培养的血管内皮细胞分为空白对照组、单纯缺氧组、缺氧加高浓度金钠多组、缺氧加中浓度金钠多组和缺氧加低浓度金钠多组．采用低压舱上升至5000m高度、停留30min,对培养的血管内皮细胞进行缺氧．用放射免疫法测定缺氧前和缺氧后0．5．6,24h各组细胞培养液中内皮素含量．结果：①急性缺氧可显著促进血管内皮细胞分泌内皮素,缺氧后0．5h内皮素含量即显著升高,于缺氧后6h分泌内皮素含量最高．②金钠多能明显抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,在缺氧后0．5h表现出高浓度金钠多强于中浓度和低浓度金钠多组,在缺氧后6和24h则中浓度金钠多的作用要强于高浓度和低浓度组．结论：金钠多能显著抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,且中浓度金钠多较高浓度和低浓度金钠多作用更明显．     

罗格列酮抑制NE和PMA诱发心肌肥大的研究

目的:研究罗格列酮(RSG)抑制去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌肥大与蛋白激酶C(PKC),C-fos之间的关系.方法:在培养新生大鼠心肌细胞中,采用RSG,PKC的激动剂佛波醇酯(PMA),NE和PKC的阻断剂白屈菜季氨碱(the)观察罗格列酮在NE和PMA诱导心肌肥大中对PKC活性和c-fos的影响.结果:PMA和NE均可促进心肌细胞蛋白质的合成和3H-亮氨酸的掺入,并可增强心肌细胞PKC活性,同时使PKC从胞质移位到细胞膜,RSG和ehe均有抑制蛋白质合成和3H-亮氨酸掺入的作用,还有抑制心肌细胞PKC活性的作用,RSG和che还可抑制NE增加c-fos蛋白的表达.结论:RSG抑制NE引起心肌肥大与PKC和c-fos有关.     

2型糖尿病患者血管内皮细胞功能变化及罗格列酮的干预作用

目的2型糖尿病存在内皮依赖性血管舒张功能（FMVD）障碍,罗格列酮治疗可显著改善FMVD。方法对22例早期2型糖尿病患者服用罗格列酮（RGZ）4mg/d,治疗4个月,治疗前后测定内皮依赖性血管舒张功能（FMVD）,并监测血糖、血脂、血红蛋白的改变。结果治疗后FMVD明显改善（P〈0．01）,FPG、2hPG、TG、HbA1C水平下降（P〈0．01）。结论短期RGZ治疗能使T2DM患者内皮细胞明显改善,其机制可能与缓解内皮细胞胰岛素抵抗和慢性炎症状态有关。     

PKC-c-fos途径在罗格列酮抑制内皮素诱发心肌肥大中的作用

目的 研究罗格列酮(RSG)抑制内皮素(ET-1)引起心肌肥大的机制与蛋白激酶C(PKC)和c-fos的关系.方法 在培养新生大鼠心肌细胞中,采用RSG(PPAR-γ激动剂)、PKC的激动剂(佛波醇酯,PMA)、PKC的阻断剂白屈菜季氨碱(che)观察罗格列酮在ET-1和PMA诱导心肌肥大中对PKC活性和C-fos蛋白表达的影响.结果 培养2 d后,对照组(DMEM)蛋白质含量为(290±13)μg/ml,ET-1组和PMA组分别为(339±15)μg/ml和(329±14)μg/ml,较对照组升高15%和13%(P<0.01);ET-1 10-8 mol/L RSG组、ET-1 10-7mol/LRSG组、ET-1 che组、分别为(303±14)、(292±11)、(291±12)μg/ml;与ET-1组比较分别降低10%、12%、13%(P<0.05,P<0.05,P<0.01);PMA 10-7mol/LRSG组的蛋白含量较PMA组降低10%(P<0.01).PMA和ET-1促进心肌细胞蛋白质的合成,RSG和che分别抑制蛋白质合成.测定心肌细胞的3H-亮氨酸掺人,RSG同样可以抑制ET-1和PMA诱导的心肌细胞肥大,同时PMA和ET-1使PKC从胞浆移位到细胞膜.RSG和che均有抑制蛋白质合成和3H-亮氨酸掺人的作用,还有抑制PMA和ET-1引起心肌细胞PKC活性和c-fos蛋白表达增强的作用.结论 RSG抑制ET-1和PMA引起的心肌肥大,其制作用可能与抑PKC-c-fos途径有关.     

蒲公英甾醇对氧化损伤心肌细胞保护作用研究

目的 在缺血-再灌注所致氧化损伤模型中观察蒲公英甾醇对小鼠心肌细胞(CSC)的保护作用及机制.方法 使用小鼠CSC细胞作为研究对象,分为正常对照组,缺血-再灌注损伤(I/R)组,蒲公英甾醇治疗缺血-再灌注损伤组(治疗浓度分别为5、10、30 μmol/L)及阳性对照组.通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定细胞活力,RT-PCR测定天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bel-2)基因水平,生化法测定超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MAD)水平,Western blot测定细胞外信号调节的蛋白激酶1/2 (ERK1/2)水平.结果 MTT测定显示30 μmol/L蒲公英甾醇组I/R损伤的CSC细胞活力增加(P＜0.05).RT-PCR研究结果表明:10、30 μmol/L的蒲公英甾醇组Caspase-3 mRNA表达减少,与I/R组比较差异有统计学意义(P＜0.05);30μmol/L的蒲公英甾醇组Bcl-2 mRNA表达回升,与I/R组比较差异有统计学意义(P＜0.05).生化法测定表明:30 μmol/L的蒲公英甾醇诱导的SOD水平提高,MAD水平降低,与I/R组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot测定显示,30 μmol/L蒲公英甾醇使损伤的CSC细胞磷酸化ERK1/2与总ERK1/2比值增加(P＜0.05).结论 蒲公英甾醇可能是通过上调ERK1/2表达抑制I/R引起的SCS细胞氧化损伤.     

心脑舒通对缺氧/复氧损伤神经细胞的保护作用及其机制研究

[目的] 研究心脑舒通对缺氧/复氧损伤神经细胞的保护作用及其机制。[方法] 体外培养 Neuro-2a 细胞, 分为正常对照组、缺氧/复氧损伤模型组、心脑舒通(10、25、50 mg/L)给药组, 建立缺氧缺糖(OGD)4 h/复氧复糖(Rep)24 h损伤模型, 检测心脑舒通对各组细胞增殖活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(△Ψm)的影响。[结果] 与缺氧/复氧组比较, 心脑舒通可以明显增加Neuro-2a细胞活力, 减少LDH漏出, 降低ROS水平, 增强线粒体膜电位。[结论] 心脑舒通对缺氧/复氧损伤神经细胞具有明显保护作用, 其机制与其影响活性氧水平和线粒体膜电位有关。     

绞股蓝多糖含药血清对四氯化碳肝细胞损伤的保护作用

目的 研究绞股蓝多糖(gynostemma pentaphyllum makino polysaccharide,PGP)含药血清对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝细胞损伤保护作用。方法 采用中药血清学方法收集PGP含药血清,用CCl4诱导肝HepG2细胞损伤,设正常对照组、CCl4损伤组和不同浓度PGP含药血清保护组;细胞形态学观察细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,生化法检测细胞培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT/GPT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST/GOT)活性及western blot凝胶电泳检测细胞色素P450 2E1的表达。结果 各PGP含药血清保护组肝细胞损伤程度明显减轻;细胞存活率显著升高(P<0.05);上清液中ALT、AST活性显著降低(P<0.05);CYP 2E1表达量显著增加。以4~8mg·kg-1·d-1保护组效果最佳。结论 PGP含药血清对CCl4诱导的HepG2细胞损伤有明显保护作用,以4~8mg·kg-1·d-1含药血清作用最显著。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其机制

目的：从内质网应激（ERS）的角度探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)配体罗格列酮(RSG)对2型糖尿病(T2DM)大鼠局灶性脑缺血损伤的作用,并阐明其机制。方法：72只雄性SD大鼠通过高脂高糖饮食4周、尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25.0 mg/kg制备T2DM大鼠模型,将制模成功的糖尿病大鼠随机分为假手术组、对照组、RSG组、RSG+GW9662组,每组18只。各组经给药预处理后,均通过线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。假手术组手术步骤同上,但不插入线栓。大鼠于脑缺血后24 h处死,对各组大鼠进行神经行为学评分,采用HE染色观察脑组织的病理形态,免疫组织化学法和Western blotting法测定葡萄糖调节蛋白78（GRP78)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)的表达,RT-PCR法检测GRP78 mRNA和CHOP mRNA的表达。结果：与对照组比较,RSG组大鼠脑缺血后的神经功能缺损明显改善,差异有统计学意义(P<0.01);而RSG+GW9662组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,RSG组GRP78表达明显增加(P<0.01);CHOP表达降低(P<0.01);RSG+GW9662组GRP78表达无明显降低(P>0.05);CHOP的表达略增高(P>0.05)。结论：PPAR-γ激动剂RSG对T2DM大鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用,其机制可能与上调GRP78的表达和拮抗CHOP的表达有关。     

查耳酮衍生物L2H24对H2O2诱导损伤的心肌细胞的保护作用

目的：探讨查耳酮衍生物L2H24 对H2O2 诱导氧化损伤的心肌细胞的抗氧化保护作用及其相关分子机制。方法：MTT法检测大鼠心肌细胞H9c2 活性;集落克隆实验检测细胞增殖能力;倒置显微镜下观察细胞焦亡形态学变化;硫代巴比妥酸显色反应检测细胞中脂质过氧化MDA水平;Western blot法检测HO-1、核/浆Nrf2、Caspase-1 p48、Caspase-1 p20、IL-1β的表达水平。结果：L2H24能上调H2O2氧化损伤的H9c2细胞的存活率（P ＜0.05）,促进其细胞集落形成,降低其MDA水平（P ＜0.05）,减少细胞中Caspase-1 p48、Caspase-1 p20、IL-1β的表达水平（P ＜0.05）,改善细胞焦亡现象;能促进细胞中Nrf2易位入核,并上调其下游抗氧化蛋白HO-1的表达水平（P ＜0.05）,对H2O2诱导氧化损伤的心肌细胞起到保护作用。结论：查耳酮衍生物L2H24具有抗氧化损伤作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

丹酚酸B对氧化应激损伤乳鼠心肌细胞的保护作用及其机制

目的：探讨丹酚酸B对氧化应激损伤乳鼠心肌细胞的保护作用,阐明其作用机制。方法：体外原代培养Wistar乳鼠心肌细胞,随机分为正常对照组、模型组及低和高剂量丹酚酸B组。除正常对照组外,其余各组培养基中加入终浓度为100 μmoL·L^-1的过氧化氢（H₂O₂）造成心肌细胞氧化损伤,其中低和高剂量丹酚酸B组分别加入终浓度为20和40 μmol·L^-1丹酚酸B。共同培养4 h后,光镜下观察心肌细胞形态表现,MTT法检测心肌细胞存活率;同时收集各组细胞及细胞培养液,分光光度法测定心肌细胞中还原型谷胱甘肽（GSH）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平,ELISA法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸磷酸激酶（CK）水平。结果：与正常对照组比较,模型组部分心肌细胞悬浮在培养液中,贴壁细胞数量减少,伪足回缩,体积变小,心肌细胞自律搏动明显缓慢。与模型组比较,20和40 μmol·L^-1丹酚酸B组心肌细胞数量明显增多,伪足回缩少,自律搏动增强。与正常对照组比较,模型组心肌细胞存活率降低（P<0.01）,心肌细胞中GSH水平降低（P<0.01）,MAD水平升高（P<0.01）,SOD活性降低（P<0.01）,细胞培养液中LDH和CK水平升高（P<0.01）。与模型组比较,20和40 μmol·L^-1丹酚酸B组心肌细胞存活率升高（P<0.05或P<0.01）,心肌细胞中GSH水平和SOD活性升高（P<0.05或P<0.01）,MDA水平降低（P<0.05或P<0.01）,细胞培养液中LDH和CK水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：丹酚酸B对心肌细胞氧化应激损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与抑制过氧化反应和提高心肌细胞抗氧化能力有关。     

雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞自噬的调控及对心肌细胞的保护作用

探讨雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用,从自噬调控角度阐明雷诺嗪保护缺血再灌注损伤心肌的作用机制。     

牛磺酸对阿霉素中毒心肌细胞的保护作用

目的 应用阿霉素（ADR）建立心肌细胞中毒模型,观察牛磺酸（Tau）对中毒心肌细胞的保护作用并探讨其机制。方法 将培养72h后的新生大鼠心肌细胞分为对照组、ADR组和ADR Tau组,继续培养24h后,MTT法测定心肌细胞存活力,并测定细胞内丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)。结果 Tau能够增强ADR中毒心肌细胞存活力,降低心肌细胞MDA含量及[Ca^2 ]i,同时升高细胞内SOD活性。结论 Tau能够对抗氧自由基引起的脂质过氧化和逆转细胞内钙超载,从而保护ADR中毒心肌细胞。     

鹿宝养生饮品对过度疲劳大鼠的保护作用及其机制

目的：研究鹿宝养生饮品（LHD）对过度游泳训练所致疲劳大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法：通过过度游泳训练 8 周建立大鼠疲劳模型,将雄性Wistar大鼠随机分成对照组、一般游泳训练组、过度负荷游泳模型组及LHD低、中、高剂量组,对照组、一般游泳训练组及过度负荷游泳模型组大鼠均灌胃蒸馏水10 mL.kg/d,LHD 3个剂量组大鼠分别灌胃不同浓度的LHD 10 mL/kg/d。给药 8 周后观察各组大鼠体质量变化,检测尿蛋白（UP）含量、血糖（BG）水平及血红蛋白（Hb）、血清睾酮（ST））和血浆皮质酮（PC）含量;以夹心ELISA法测定大鼠下丘脑多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NA）、5-羟色胺（5-HT）及γ-氨基丁酸（GABA）含量,并计算DA/5-HT、NA/5-HT及DA/NA比值。结果：与过度负荷游泳模型组比较,LHD中、高剂量组大鼠在游泳训练5~8周因过度游泳训练造成的体质量减轻得到改善,UP含量明显降低（P<0.05或P<0.01）,BG水平及Hb、ST、PC含量均无明显变化。LHD中、高剂量组大鼠下丘脑5-HT含量明显降低, DA含量和DA/5-HT、NA/5-HT及DA/NA比值明显增高（P<0.05或P<0.01）。结论：LHD对过度游泳训练所致的大鼠超负荷疲劳具有明显改善作用,其作用机制可能与降低下丘脑5-HT含量,提高DA、GABA含量以及DA/5-HT、NA/5-HT和DA/NA比值有关。
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