VEGF-C及VEGFR-3的表达在非小细胞肺癌中的临床意义

目的研究VEGF—C及VEGFR-3在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法应用半定量RT—PCR方法对78例病理分期为I-IIIA期非小细胞肺癌病人其术后组织标本中癌组织、癌旁组织及正常组织共计234份标本进行检测。结果VEGF—C mRNA的表达水平在癌组织及癌旁组织的相对含量明显高于正常组织（P〈0．05），VEGFR-3 mRNA的表达在癌组织中的相对含量明显高于正常组织（P〈0．05）。VEGF—C和VEGFR-3 mRNA的表达与临床病理特性相互之间的关系显示，在淋巴结转移组及病理分期组，VEGF-C或VEGFR-3 mRNA的表达水平差异无论是在癌组织中，还是在癌旁组织中均有明显统计学意义（P〈0．01）。结论VEGF-C和VEGFR-3 mRNA的表达与非小细胞肺癌的淋巴结密切相关，提示VEGF-C和YEGFR-3 mRNA表达的非小细胞肺癌预后不良。     

肺腺癌VEGF-C的表达与MVD、MLVD及淋巴转移的关系

目的 探讨肺腺癌血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达与微淋巴管密度(MLVD)、微血管密度(MVD)及淋巴转移之间的关系.方法 RT-PCR法检测36例肺腺癌组织中VEGF-C mRNA的表达,并以免疫组化法检测肺癌组织VEGF-C蛋白的表达、MLVD及MVD.结果 VEGF-C mRNA在肺腺癌组织中的表达比正常肺组织相对较高(P<0.01).VEGF-C蛋白表达在肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位(P=0.015);其表达与肿瘤分化程度无关,与肿瘤的TNM分期有关,Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ期(P=0.026).在VEGF-C蛋白阳性组,MVD高于阴性组(P=0.020),MLVD显著高于阴性组(P=0.008),淋巴结转移增多(P=0.039).结论 VEGF- C mRNA在肺腺癌组织中高表达,VEGF-C蛋白表达与肺腺癌血管生成及淋巴管生成和淋巴结转移关系密切.     

VEGF-C、VEGFR-3在老年肺鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)蛋白表达与老年肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)淋巴管生成以及淋巴结转移的相互关系及老年肺鳞癌淋巴结转移的分子机制.方法 应用免疫组化检测53例老年人肺鳞癌组织、26例癌旁肺组织、20例正常肺组织中VEGF-C蛋白表达情况和VEGFR-3阳性微淋巴管数.结果 VEGF-C蛋白在老年肺鳞癌组织细胞浆中高表达(表达率62.3%),其表达率比癌旁肺组织和正常肺组织高(P≤0.05);老年肺鳞癌组织VEGFR-3阳性微淋巴管数(11.08±4.39)个,比癌旁肺组织和正常肺组织高(P≤0.05);VEGF-C蛋白表达与老年肺鳞癌淋巴结转移情况(P≤0.05)及TNM分期(P≤0.05)密切相关;VEGFR-3阳性微淋巴管数与老年肺鳞癌淋巴结转移情况(P(0.05)及TNM分期(P≤0.05)密切相关;老年肺鳞癌组织中VEGF-C阳性表达与VEGFR-3阳性微淋巴管数呈明显正相关(P≤0.05.r=0.530).结论 VEGF-C和VEGFR-3在老年肺鳞癌的淋巴结转移过程中发挥重要作用;VEGF-C蛋白表达协同VEGFR-3阳性微淋巴管数可用于指导老年肺鳞癌的早发现、早诊断和早治疗.     

肺腺癌SPC-A-1细胞表皮生长因子受体表达水平对其增殖的影响

目的 探讨采用体外化学合成的针对表皮生长因子受体(EGFR)设计的双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)，是否能诱导肺非小细胞肺癌(NSCLC)细胞出现序列特异性基因沉默，及抑制EGFR基因表达后NSCLC细胞的生物学特征。方法 体外合成EGFR序列特异性dsRNA(dsRNA-EGFR)，结合脂质体2000转染肺腺癌SPC-A-1细胞，用荧光显微镜及流式细胞仪测定转染细胞的EGFR受体数量；适时定量聚合酶链反应检测其EGFR基因表达水平。采用集落形成试验检测SPC-A-1细胞的增殖和集落形成能力。建立裸鼠肿瘤模型，计算肿瘤抑制率。结果 dsRNA-EGFR可使EGFR在蛋白水平表达下降71．3％、基因水平表达下降50．0％，SPC-A-1细胞集落形成下降66．8％，并显著抑制在体肿瘤生长，肿瘤抑制率为75．0％。结论 dsRNA-EGFR可序列特异性下调NSCLC细胞EGFR在基因及蛋白水平的表达，有效抑制肿瘤生长。     

非小细胞肺癌VEGF-C的表达及LYVE-1标记的微血管密度与淋巴结转移的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)血管内皮生长因子(VEGF)-C的表达与内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)标记的微淋巴管密度(MLVD)与淋巴结转移的关系及意义。方法采用免疫组织化学染色法检测56例NSCLC、10例肺良性病变组织中VEGF-C的表达水平,采用淋巴管特异性标志物LYVE-1检测MLVD,并做相关统计学分析。结果 VEGF-C蛋白在NSCLC组织中的阳性率明显高于肺良性病变组织(P<0.05)。NSCLC组织中LYVE-1标记的MLVD明显高于肺良性病变组织(P<0.05)。VEGF-C表达阳性的组织中MLVD显著高于阴性组织(P<0.05)。VEGF-C蛋白的表达与NSCLC患者淋巴结转移、PTNM分期有关。结论淋巴管生成因子VEGF-C在NSCLC中表达明显升高,其促进了淋巴血管内皮细胞的大量增殖以及淋巴血管的生成,对肿瘤生长和转移起到了促进作用。     

鼻咽癌VEGF-C、VEGFR-3表达及淋巴管密度与淋巴结转移、复发及预后的关系

采用免疫组化法检测鼻咽癌(NPC)患者活检组织标本中的血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)表达及淋巴管密度(LVD),统计3a生存率,分析VEGF-C、VEGFR-3及LVD与淋巴结复发、转移及预后的关系.结果MPC有淋巴结转移者的VEGF-C、VEGFR-3阳性率及LVD均低于无淋巴结转移者(P均<0.01).单因素分析发现N分期及LVD与淋巴结复发有关,多因素分析发现仅N分期是影响NPc淋巴结复发的独立风险因素;高LVD及VEGF-C、VEGFR-3高表达者的3a生存率明显低于低表达者(P均<0.05).多因素分析表明,VEGF-C、LVD及临床分期是影响NPC患者生存率的独立因素.提示NPC高LVD患者可能增加淋巴结复发的风险;VEGF-C、VECFR-3高表达及高LVD患者预后较差.     

LY294002对人肺腺癌A549细胞p-Akt、VEGF表达的影响

目的 探讨PI3K抑制剂LY294002对肺腺癌A549细胞p-Akt及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 不同浓度LY294002(5μmol/L、10 μmol/L、20μmol/L、40 μnol/L)处理肺腺癌A549细胞24h后,分别用免疫细胞化学法和Western印迹法检测p-Akt、VEGF蛋白表达.结果 P13K抑制剂LY294002可抑制肺腺癌A549细胞株细胞中p-Akt蛋白的表达,而且其表达呈浓度依赖型降低(r=-0.913,P＜0.05).LY294002也可抑制该细胞株中VEGF蛋白的表达,其表达也呈浓度依赖型降低(r=-0.969,P＜0.01).结论 LY294002可抑制p-Akt活性及下调VEGF蛋白的表达,该作用可能是PI3K抑制剂LY294002发挥抗癌作用及抗血管生成的机制之一.     

喉癌组织中VEGF-C及其受体VEGFR-3和D2-40的表达及意义

目的 观察血管内皮生长因子C（VEGF-C）及其受体（VEGFR-3）和D2-40在喉癌组织中的表达情况,探讨其在喉癌淋巴道转移过程中的作用及可能机制.方法 选择喉癌患者的癌组织、癌旁正常组织标本各40份,同期选择正常喉组织标本19份作对照.采用免疫组织化学法检测各标本中VEGF-C、VEGFR-3和D240的表达.结果 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40在喉癌组织、癌旁组织及正常喉组织中均有表达,且其表达强度呈下降趋势（H分别为38.400、32.502,P均＜0.01）;在喉癌组织中,VEGF-C、VEGFR-3及D2-40的表达与淋巴转移、临床分期及临床分型有关（P均＜0.05）,与病理分级、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P均＞0.05）.喉癌组织中VEGF-C与VEGFRd的表达呈正相关（r=0.882,P＜0.01）.结论 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40在喉癌组织中的表达均明显高于癌旁组织及正常喉组织,其高表达可能与喉癌的发生、发展有关.     

土贝母苷甲对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨土贝母苷甲对人肺腺癌细胞(A549)增殖及凋亡的影响.方法 应用MTS法检测土贝母苷甲不同浓度、不同时间对A549细胞增殖的影响;使用1μg/mL土贝母苷甲处理A549细胞48 h作为处理组,对照组加入培养基培养48h;使用流式细胞仪分别检测两组细胞的周期分布及细胞凋亡率;并使用Western blot检测两...     

β榄香烯对肝星状细胞分泌ANGⅡ及表达AT1R mRNA的影响

目的 为肝纤维化的治疗提供新思路.方法 将肝星状细胞(HSC)-T6细胞株培养24 h,分别以质量浓度为10.0、5.0、2.5mg/L的β榄香烯(实验1、2、3组)作用4、12、24 h,收集细胞上清及细胞,并设空白对照组.放射免疫法检测培养上清中血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平,RT-PCR检测ANGⅡ的Ⅰ型受体(AT1R)mRNA表达.结果 作用12、24 h时各实验组ANGⅡ水平及均较空白对照组降低(P<0.05、0.01);三个时间点各实验组AT1R mRNA表达均显著低于空白对照组(P<0.01),并呈剂量依赖性.结论 β榄香烯可能延缓肝纤维化的发生、发展.     

β榄香烯对肝星状细胞分泌ANGⅡ及表达AT_1R mRNA的影响

目的为肝纤维化的治疗提供新思路。方法将肝星状细胞（HSC）-T6细胞株培养24h，分别以质量浓度为10．0、5．0、2．5mg／L的β榄香烯（实验1、2,3组）作用4、12、24h，收集细胞上清及细胞，并设空白对照组。放射免疫法检测培养上清中血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）水平，RT—PCR检测ANGⅡ的Ⅰ型受体（AT1R）mRNA表达。结果作用12、24h时各实验组ANGⅡ水平及均较空白对照组降低（P〈0．05、0．01）；三个时间点各实验组AT1RmRNA表达均显著低于空白对照组（P〈0．01），并呈剂量依赖性。结论β榄香烯可能延缓肝纤维化的发生、发展。     

PDTC对人肺腺癌A549细胞COX-2、VEGF表达的影响及意义

核因子-κB(NF—κB)广泛存在于真核细胞,是一多功能的核转录因子,被激活后参与调控多种细胞因子、黏附因子及酶的表达,在炎症、肿瘤等疾病的发生、发展中起重要作用。研究证实环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在多种恶性肿瘤中表达增高,与肿瘤血管生成、侵袭转移密切相关。有研究发现,NF-κB可能参与COX-2及VEGF表达的调控。     

重构型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达载体诱导人肺腺癌细胞凋亡的意义

目的构建天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达载体,观察Caspase3表达载体对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法应用基因重组方法,建立重构型Caspase3基因的真核表达系统pcDNA3.1revCaspase3质粒和野生型pcDNA3.1Caspase3质粒。将实验细胞分为3组转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组,转染pcDNA3.1Caspase3质粒组,转染pcDNA3.1质粒空白对照组。前2组用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预。应用Caspase3酶活性分析、流式细胞仪及甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测A549细胞Caspase3酶活性变化及细胞凋亡和增殖情况。结果(1)pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组的A549细胞Caspase3酶活性分别是(11.87±0.92)%、(5.34±0.38)%(t=16.02,P<0.01);用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预后,pcDNA3.1revCaspase3质粒组酶活性为(7.04±0.48)%,仍明显高于野生型pcDNA3.1Caspase3质粒组的(4.51±0.20)%(t=11.86,P<0.01)。(2)流式细胞分析结果显示,pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞凋亡率分别是(20.1±3.5)%、(7.8±2.8)%、(1.4±0.3)%,3组差异有统计学意义(F=44.01,P<0.01)。(3)MTT比色检测显示pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞生存率分别是(35.7±1.1)%、(72.8±2.9)%、(85.4±4.8)%,转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组生存率明显低于其他两组(F=375.07,P<0.01)。结论pcDNA3.1revCaspase3在A549细胞内有较强的自身活化能力,对Caspase3抑制剂抵抗作用较强,可明显诱导A549细胞凋亡并抑制A549细胞生长。     

苦参碱对人肺腺癌A549细胞增殖及HIF-1α、VEGF表达的影响

目的探讨苦参碱对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及作用机制。方法将0、5、50、100、250、500μg/mL质量浓度的苦参碱分别作用于体外培养的处于对数生长期的A549细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,RT-PCR法检测细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达。结果苦参碱呈时间、剂量依赖性抑制A549细胞生长(P<0.05);呈时间、剂量依赖性降低HIF-1α、VEGF mRNA表达(P<0.05);HIF-1α和VEGF之间表达呈正相关(r=0.994,P<0.01)。结论苦参碱能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,其机制可能为降低HIF-1α和VEGF表达,从而抑制肺癌组织血管生成。     

9-顺维A酸对人肺腺癌细胞PG株的细胞周期影响和诱导凋亡作用

已证实维Ａ酸类化合物能调控细胞生长、分化、凋亡等生命活动[1,2 ] ,最近的研究表明维Ａ酸类化合物通过与核维Ａ酸受体 (ＲＡＲｓ)及核维Ａ酸类Ｘ受体 (ＲＸＲｓ)结合发挥其生物学效应 ,在已知的维Ａ酸类化合物中 ,9 顺维Ａ酸 (9 ｃｉｓＲＡ)唯一能与这两类核受体结合 ,因为其生物学活性强于其他维Ａ酸类化合物而倍受瞩目[1 3] 。本研究旨在观察 9 ｃｉｓＲＡ对肺癌细胞株ＰＧ细胞周期影响和诱导凋亡作用与全反式维Ａ酸 (ＡＴＲＡ)的比较 ,并初步探讨其作用机制 ,为 9 ｃｉｓＲＡ临床治疗肺癌提供实验依据。材料与方法　细胞培养 :以含 10 …     

非小细胞肺癌组织中EGFR、VEGFR-3、PDGFR的表达及临床病理学评价

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）、血管内皮生长因子受体-3（VEGFR-3）和血小板源性生长因子受体（PDGFR）的表达与非小细胞肺癌（NSCLC）生物学行为的关系及其内在联系。方法用免疫组化SP法对205例Ⅰ-Ⅲ期NSCLC根治手术后的标本进行EGFR、VEGFR-3、PDGFR表达检测。结果 EGFR、VEGFR-3、PDGFR的阳性表达率分别为36.1%、90.2%、61.5%。EGFR的表达与淋巴结转移个数有关;VEGFR-3表达与N分期、胸膜侵犯有关。PDGFR的表达评分与VEGFR-3的表达评分呈正相关,r=0.255,P=0.001。结论 EGFR、VEGFR-3是NSCLC淋巴转移与局部侵犯的相关因素,PDGFR与VEGFR-3可能存在某种内在联系,对多靶点靶向药物的研发及靶向治疗药物的联合应用具有提示意义。     

外源性干预VEGF-C表达对肺癌细胞生物学行为的影响及机制

目的 探讨外源性血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对肺癌细胞生物学行为的影响及机制。方法 将A549细胞分为BK组、VC组及SC组,BK组不转染,VC组及SC组均于EP管中加入200μL转染液和4μL脂质体,VC组及SC组分别加入5μg NC mimics、5μg miR-21 mimics。转染72 h后,采用免疫印迹法检测A549细胞中TCAB1蛋白表达;MTT法检测A549细胞生存率;Transwell小室检测A549细胞侵袭情况;流式细胞仪检测A549细胞凋亡率。结果 SC组A549细胞中VEGF-C mRNA表达低于BK组、VC组（P均<0.05）,转染成功。BK组、VC组中VEGF-C mRNA表达相似（P>0.05）。干预12、24、48、72 h时,BK组与VC组A549细胞生存率比较差异无统计学意义（P均>0.05）;SC组A549细胞生存率低于BK组、VC组,组间比较差异有统计学意义（P均<0.05）。BK组与VC组A549细胞侵袭细胞数目比较差异无统计学意义（P>0.05）,SC组A549细胞侵袭细胞数目低于BK组、VC组,三组比较...     

吉非替尼对老年晚期肺腺癌患者血清中血管内皮生长因子、神经元特异性烯醇化酶和细胞角蛋白19片段的调节作用

肺腺癌进展到晚期时,肿瘤细胞产生大量肿瘤相关蛋白,且在血清中表达增高,加速病变的进展,此机制可能与肿瘤中异常表达的基因和蛋白进入血清有关[1].吉非替尼是针对表皮生长因子受体(EGFR)阳性肺腺癌治疗的靶向药物,是选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂,可以对癌细胞增殖和分化有明显抑制[2].本研究在常规化疗基础上加用吉非替尼治疗老年晚期肺腺癌患者,观察其疗效及对血清中血管内皮生长因子受体(VEGF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的作用.     

重组人生长激素对荷人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及VEGF表达的影响

目的:探讨重组人生长激素frhGH)对荷人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤生长及VEGF表达的影响.方法:免疫细胞化学染色法鉴定SGC-7901细胞株GHR表达状态,30只接种皮下移植瘤的裸鼠随机分为:对照组(生理盐水0.2 mL/d).低剂量rhGH组[0.5 U/(kg·d)],高剂量rhGH组[2.5 U/(kg·d)],连续给药14 d,观察并记录裸鼠体质量和肿瘤体积,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量,免疫组织化学法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达,RT-PCR检测VEGFmRNA表达.结果:SGC-7901细胞株GHR呈强阳性表达.自rhGH给药第3天起,rhGH给药组与对照组肿瘤体积相差悬殊(P＜0.05),且高剂量rhGHVg低剂量rhGH促肿瘤生长效应更加明显(P＜0.05),3组间裸鼠体质量差别不明显(P＞0.05).裸鼠血清VEGF含量,与对照组和低剂量rhGH组相比,高剂量rhGH组血清中VEGF水平明显升高,差别具有统计学意义(252.94 ng/L±15.32ng/L VS 49.94 ng/L4±5.73 ng/L,167.60 ng/L±9.54 ng/L.均P＜0.05).肿瘤组织VEGF蛋白的表达,对照组VEGF表达呈中度阳性;低剂量rhGH组和高剂量rhGH组VEGF表达量高,呈强阳性.肿瘤组织VEGF mRNA表达水平,高剂量rhGH组VEGF相对表达量明显高于对照组和低剂量rhGH组,差别具有统计学意义(0.647±0.0447 vs 0.3234±.0258,0.412±0.035 1.均P＜0.05).结论:rhGH能促进GHR阳性表达的SGC-7901移植瘤生长,并促进VEGF表达.     

纳米雄黄干预肺癌A549细胞对血管内皮生长因子及缺氧诱导因子-1表达的影响

目的探讨纳米雄黄干预肺癌A549细胞对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF)-1表达的影响及其相关机制。方法培养肺癌A549细胞,采用RT-PCR技术与免疫组化法观察纳米雄黄对人肺癌A549细胞VEGF、HIF-1的表达的影响,进而探讨纳米雄黄抗肿瘤血管生成的作用机制。结果与对照组比较,纳米雄黄可明显降低VEGF、HIF-1表达(P0.05),并随药物浓度增高作用增强(P0.05),与顺铂联合应用有协同作用(P0.05)。结论纳米雄黄抑制肿瘤血管生成途径实现抗肿瘤作用的机制可能与下调VEGF、HIF-1的表达有关。