碳量子点掺杂的苯酚分子印迹聚合物的合成

结合表面分子印迹技术的优点和碳量子点的性质,利用硅烷的水解、交联反应,采用非共价法制备了碳量子点掺杂的苯酚分子印迹聚合物。应用此分子印迹聚合物做为识别物质,建立测定苯酚的分子印迹-荧光光谱分析方法。在最佳条件下,该分子印迹聚合物检测苯酚的相应浓度范围为5.0×10-11～1.0×10-7mol.L-1。     

根皮素的心血管保护作用研究

目的 研究根皮素对狗冠状动脉舒张特征的影响及其机制.方法 制备狗冠状动脉血管环,固定于盛有K-H液的恒温肌槽内,并观察等长时血管张力的变化.结果 10 μmol·L-1或30 μmol· L-1 L根皮素使KCl及无钙K-H液中CaCl2量效曲线明显右移,使血管环敏感性和最大收缩反应明显降低.30 μmol· L-1根皮素在50 mmol· L-1 KCl预收缩的离体冠脉血管环产生一个明显的急性舒张,加入Nω-L-硝基精氨酸1×10-4mol·L-1、普蔡洛尔1×10-5 mol· L-1、亚甲蓝1×10-5 mol·L-1、二硝酸异山梨醇酯(吲哚美辛)1×10-5 mol·L-1及去内皮细胞后,根皮素的急性舒张血管作用不受影响.结论 根皮素在离体冠脉血管环的舒张效应主要是通过抑制电压依赖性钙通道实现的.根皮素的这种舒张效应与NO、内皮、β肾上腺素受体和前列腺素类皆无关.     

鸡豆黄素A对狗体外冠状动脉血管的舒张作用及其机制

目的 以血管张力变化为指标,对鸡豆黄素A的心血管保护作用及相关机制进行探讨.方法 制备狗的冠状动脉血管环,固定于恒温浴槽内,待平衡后,加入各种药物观察血管张力的变化.结果 (1)5-羟色胺(5-HT)(10-7～10-5 mol· L-1)使冠状动脉血管环产生明显的剂量依赖性收缩,分别用40 nmol· L-1、1 μmol· L-1鸡豆黄素A温育预处理后,5-HT量效收缩明显被抑制,量效收缩曲线明显右移.(2)鸡豆黄素A可使60 mmol· L-1 KCl预收缩冠状动脉血管环产生明显剂量依赖的舒张作用,缺失内皮细胞或分别加入一氧化氮合酶抑制剂Nω-L-硝基精氨酸1×10-4 mol· L-1,吲哚美辛1×10-5 mol· L-1,甲烯蓝1×10-5mol·L-1温育预处理,鸡豆黄素A对60 mmol· L-1 KCl预收缩冠状动脉血管环产生的量效舒张作用无明显改变(P＞0.05).结论 (1)鸡豆黄素A使血管环对5-HT的敏感性和最大收缩明显降低.(2)鸡豆黄素A对冠状动脉血管的舒张作用与内皮细胞及其释放的一氧化氮无关,与前列腺素类物质亦无关.     

RP-HPLC法同时测定桂龙咳喘宁胶囊中甘草酸和环磷酸腺苷的含量

目的建立桂龙咳喘宁胶囊中两种成分甘草酸和环磷酸腺苷含量的测定方法。方法采用色谱柱:Agilent TC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇(A)-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱程序为0～12 min,体积分数为10%的A;12～30 min,体积分数为70%的A,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:250 nm,柱温:30℃。结果环磷酸腺苷和甘草酸质量浓度在2.0～200.0 mg.L-1内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为95.9%和92.7%,RSD分别为2.9%和3.1%(n=3)。结论该方法可作为桂龙咳喘宁胶囊的质量控制方法之一。     

流动注射-化学发光检测利福平

目的:建立一种流动注射-化学发光测定利福平的快速、灵敏新方法。方法:碱性条件下,利福平对luminol-KIO4化学发光体系有抑制作用,结合流动注射技术,建立了流动注射-化学发光检测利福平的新方法。结果:在优化条件下,利福平的线性范围是7.0×10-9～6.0×10-7 mol.L-1,检出限达3.2×10-9 mol.L-1。对3.0×10-8 mol.L-1和2.0×10-7mol.L-1利福平分别进行11次测定,相对标准偏差分别为0.8%和1.6%。分析速度为128个样品/时。将提出的新方法成功应用于利福平滴眼液和利福平胶囊中利福平含量的测定。结论:本方法操作简单快速,适合于利福平的分析。     

芍药苷对肿瘤坏死因子-α诱导的人成纤维样滑膜细胞功能的影响

目的 观察芍药苷(抗炎类中药活性成分)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人成纤滑膜细胞(FLS)功能的影响.方法 体外培养人FLS,考察TNF-α浓度在0.02-20μg·L-1时对FLS的增殖反应和FLS分泌前列腺素E2、环磷腺苷和白介素-1β的影响;加入芍药苷(1×10-8～1×10-4mol·L-1)后,观察对其增殖反应和分泌功能的影响;用MTT法检测FLS的增殖反应,用放射免疫测定法检测白介素-1β,用酶联免疫吸附法检测前列腺素E2和环磷腺苷的水平.结果 TNF-α浓度在0.02～20.00μg·L-1时,均显著抑制FLS分泌环磷腺苷,显著促进前列腺素E2和白介素-1β的分泌;芍药苷能显著抑制TNF-α对FLS的促增殖反应,明显上调降低的环磷腺苷水平,明显下调升高的前列腺素E2和白介素-1β水平,且具有一定的浓度依赖性.结论 TNF-α可以促进FLS的增殖,降低环磷腺苷,升高前列腺素E2和白介素-1β;芍药苷则能明显逆转TNF-α对FLS的影响.     

六肽对犬血小板聚集功能的影响

目的研究六肽对犬血小板聚集功能的影响。方法采集犬股动脉血,以枸橼酸钠抗凝,用比浊法测犬血小板在不同诱导剂诱导时的聚集率。结果 1×10-6 mol·L-1六肽,抑制由二磷酸腺苷、花生四烯酸和凝血酶诱导的犬血小板聚集的抑制率分别为88.47%±1.15%,97.68%±0.72%和32.02%±3.78%;六肽1×10-8~1×10-5 mol·L-1组对由ADP诱导的血小板聚集率显著低于对照组(P<0.01或P<0.05),且各剂量对之间相应的血小板聚集率有显著差异(P<0.01或P<0.05)。六肽抑制犬由花生四烯酸、二磷酸腺苷和凝血酶诱导的血小板聚集的IC50分别为1.29×10-9,7.24×10-8和2.88×10-6 mol·L-1;对于依替巴肽,同等条件下测得其IC50分别为6.76×10-10,5.74×10-8和1.62×10-6 mol·L-1。结论六肽在体外可以抑制犬血小板聚集,其作用效果类似于依替巴肽。     

流动注射化学发光体系测定妥布霉素

本文利用妥布霉素对KMnO4-Na2SO3化学发光体系的发光有增敏的作用,结合流动注射技术,建立了流动注射化学发光法测定妥布霉素的新方法.在最佳条件下,妥布霉素溶液的浓度在5.0×10-7～1.0×10-5mol·L-1范围内与化学发光强度呈现良好的线性关系.该方法的检测限为1.0×100-7mol·L-1.对实际样品进行回收实验,结果令人满意,并对可能的发光机理进行了初步的探讨.     

RP-HPLC法同时测定小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸含量。方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱(0～12 min,90%B;12～30 min,30%B),流速:1.0 mL.min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果:环磷酸腺苷和甘草酸在12.5～200μg.ml-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,环磷酸腺苷和甘草酸的线性方程分别为:Y=23190X-4.6083(R2=0.9998),Y=11364X+80.342(R2=0.9950),环磷酸腺苷和甘草酸的回收率分别为95.2%和97.5%;RSD分别为2.8%和1.8%。结论:本方法操作简便,经方法验证可用于中成药小建中颗粒中环磷酸腺苷和甘草酸的含量测定。     

15-羟廿碳四烯酸对缺氧性大鼠颈内动脉环的收缩作用及机制

目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用。方法16只W istar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(F iO2)为21%和缺氧组:置于F iO2为10%的缺氧箱中(n=8)。9 d后将大鼠处死,游离颈内动脉(ICA)制备血管环,KH液中分别加入不同浓度15-HETE以及2 mmol.L-14-AP、10-2mol.L-1TEA、10-6mol.L-1GLYB后平衡15 min后,再加入15-HETE,观察不同浓度15-HETE、不同K+通道阻断剂对颈内动脉环收缩反应程度的变化。结果15-HETE以浓度依赖方式(10-8mol.L-1~10-6mol.L-1)使游离颈内动脉环张力增加,对缺氧组大鼠颈内动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异有显著性(15-HETE浓度为10-8mol.L-1、10-7mol.L-1时,P<0.05,10-6mol.L-1时,P<0.01,n=8);2 mmol.L-14-AP使颈内动脉环血管张力增高(P<0.05,n=8),但预先应用2 mmol.L-14-AP后浴液中加入10-6mol.L-115-HETE,血管张力无进一步增加的趋势;10-2mol.L-1TEA、10-6mol.L-1GLYB,对血管环张力差异无显著性(P>0.05,n=8);但进一步应用15-HETE使血管环张力增加,变化幅度接近单纯应用15-HETE组。结论15-HETE收缩ICA,缺氧情况下尤为明显;Kv通道在15-HETE所致的ICA收缩中起作用。     

L-半胱氨酸包覆的ZnS:Mn~(2+)水溶性的量子点荧光探针测定氟尿嘧啶的含量

目的:以绿色环保材料为基础,在温和的条件下合成了水溶性的L-半胱氨酸包覆的锰离子掺杂的硫化锌量子点(L-Cys/ZnS:Mn2+QDs),并以此为荧光探针建立了测定抗癌药物氟尿嘧啶(FU)的新方法。方法:研究了FU对L-Cys/ZnS:Mn2+QDs荧光的淬灭作用并阐述了可能的作用机理。实验还考察了缓冲液体系、pH、反应时间、量子点浓度等多种因素对测定FU的影响。结果:在磷酸盐(pH6.5)缓冲溶液中,L-Cys/ZnS:Mn2+QDs浓度为1.6×10-4mol.L-1时,FU在1.0~85μg.mL-1的浓度范围内对量子点的荧光强度有较强的猝灭作用,且体系的荧光强度变化与溶液中氟尿嘧啶的浓度符合斯特恩方程,线性方程为:Y=0.01059C+0.9757(r=0.9988);猝灭常数为1.377×103L.mol-1;检出限为0.38μg.mL-1。将方法应用于实际样品FU注射液的分析,获得满意结果,FU的加样回收率为99.2%~100.0%。结论:该法简便、快速、灵敏度高,可望将其作为一种新型的荧光标记物用于体内药物的示踪和测定。     

脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠脑主动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度上升的影响

目的研究脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）胞内钙离子浓度上升的作用,并初步探讨其机制。方法采用细胞培养的方法获得大鼠胸主动脉VSMCs,经Fluo-4-AM染色后,采用激光共聚焦显微镜技术分别检测加入AngⅡ后,1×10^-7mol·L^-1和1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin对胞内钙荧光强度（FI）的影响,以及腺苷酸环化酶抑制剂Sq22536对Ghrelin作用的影响。结果①2×10^-8mol·L^-1的AngⅡ可以使得VSMCs胞内钙FI上升到静息状态的（165±76）％;②随后加入1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（117±34）％（P〈0．01vs①）;③加入1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（87±22）％（P〈0．01vs①,P〈0．05vs②）;④预先以1×10^-5mol·L^-1的Sq22536孵育,再加入2×10^-8mol·L^-1AngⅡ和1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin,胞内FI为原来的（143±24）％（P〈0．01vs②）。结论Ghrelin能够降低AngⅡ引起的大鼠胸主动脉VSMCs胞内钙离子升高作用,其机制可能与激活胞内cAMP／PKA信号通路有关。     

基于纳米金催化鲁米诺-氯化汞化学发光新体系测定木犀草素

目的:基于纳米金对鲁米诺-氯化汞化学发光体系有良好的催化作用,建立测定木犀草素含量的高灵敏流动注射-化学发光分析法。方法:采用流动注射技术,实验研究了影响化学发光的各种因素;根据体系的化学发光光谱和紫外-可见吸收光谱结果,探讨了可能的化学发光机理。结果:0.1 mol·L-1氢氧化钠、4.0×10-4 mol·L-1鲁米诺、6.08×10-5 mol·L-1纳米金与1.0×10-3 mol·L-1 HgCl2组成最优的化学发光体系。在优化的实验条件下,本方法测定木犀草素的线性范围为2.0×10-9～1.0×10-7 g·mL-1(r=0.9929),检出限为1.5×10-9 g·mL-1,RSD为2.1%(C=1.0×10-8 g·mL-1,n=11)。纳米金作为电子转移的媒介,在鲁米诺-氯化汞反应过程中起催化作用;木犀草素和鲁米诺竞争与氯化汞发生反应,抑制了鲁米诺氧化成鲁米诺自由基,导致发光强度的降低。结论:利用本法成功地测定了血清与合成样品中木犀草素的含量。     

山楂水提取物对猪离体冠状动脉环的舒张作用研究

目的:研究山楂水提取物对猪离体冠状动脉环的舒张作用。方法:观察0.1、0.3、0.5mg·mL-1山楂水提取物对KC(l30mmol·L-1)诱发的猪离体冠状动脉环收缩的舒张作用。以Na+/Ca2+交换体阻滞剂KB-R7943(1×10-6mol·L-1)、电压依赖性钾通道(KV)阻滞剂四胺基吡啶(4-AP,1×10-3mol·L-1)、K+-ATP通道阻滞剂格列苯脲(Gli,1×10-5mol·L-1)、K+/Ca2+通道阻滞剂乙胺(TEA,1×10-2mol·L-1)、内向整流钾通道(KiR)阻滞剂氯化钡(BaCl2,1×10-3mol·L-1)预处理血管环,观察其对山楂水提取物舒血管作用的影响。结果:山楂水提取物对KCl预收缩的猪离体冠状动脉环产生浓度依赖性的舒张作用。用KB-R7943、4-AP、Gli预处理的血管环对山楂水提取物的舒张反应与未经处理时比较无显著性差异(P>0.05)。TEA和BaCl2预处理的血管环对山楂水提取物的舒张反应与未经处理时比较有显著性差异(P<0.01)。结论:山楂水提取物对KCl预收缩的猪离体冠状动脉环具有浓度依赖性的舒张作用,其舒张反应可能与K+/Ca2+通道和KiR通道有关,与Na+/Ca2+交换体、KV通道和K+-ATP通道无关。     

丹酚酸B对MC3T3-E1细胞Dkk1 mRNA表达的影响

目的:观察丹酚酸B对MC3T3-E1细胞Dkk1mRNA表达的影响。方法:MC3T3-E1细胞分组:正常对照组、成骨诱导组、地塞米松1×10-6 mol·L-1组、地塞米松1×10-6 mol·L-1+丹酚酸B1×10-7 mol·L-1组、地塞米松1×10-6 mol·L-1+Dkk1抗体100μg·L-1组、丹酚酸B1×10-7 mol·L-1组、Dkk1抗体100μg·L-1组。加药7 d后用RT-PCR法检测细胞Dkk1mRNA表达水平。结果:与正常组相比,成骨诱导后Dkk1的表达增多,地塞米松组的Dkk1表达明显增多,丹酚酸B组Dkk1的表达减少,Dkk1抗体单用未见Dkk1的表达。与地塞米松组相比,丹酚酸B单用Dkk1的表达比地塞米松组少。丹酚酸B、Dkk1抗体可对抗地塞米松应用后引起的Dkk1表达增多。结论:丹酚酸B可以减少Dkk1的表达和对抗地塞米松使用后引起的Dkk1表达增多,这可能是其促骨形成的机制之一。     

米非司酮对胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制

目的：考察米非司酮对单用或合并使用胰岛素和地塞米松诱导的胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法：1）将常规培养的人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,胰岛素（5×10^-6、5×10^-1和5×10^-8mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5和3×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6和1．5×10^-7mol·L^1）组。培养24或48h后,测定各组细胞葡萄糖消耗量,以考察人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的形成情况,并通过胰岛素刺激和模型持续时间研究进一步验证造模效果。2）将人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6、1×10～×10^-7mol·L^1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-5mol·L^1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组。分别加入不同浓度的药物培养24或48h,然后对各组细胞葡萄糖消耗量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位进行测定,以考察细胞功能状态变化。结果：1）胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）作用24h可诱导人脐静脉内皮细胞发生胰岛素抵抗并可维持24h,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）作用48h可诱导细胞的胰岛索抵抗并可维持36h,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6molL^-1）共同作用48h可诱导细胞的胰岛素抵抗并可维持24h。2）地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组,以及胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组人脐静脉内皮细胞的葡萄糖摄取量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位分别显著高于地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组和胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）组;胰岛素（5×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^-1）组细胞的上述指标则与胰岛素（5××10^-7mol·L^-1）组无显著性差异。结论：胰岛素、地塞米松单独使用及合用均可诱导人脐静脉内皮细胞出现胰岛素抵抗并持续一定时间;米非司酮可改善地塞米松及地塞米松＋胰岛素诱导的胰岛素抵抗内皮细胞的功能紊乱,而对胰岛素诱导的胰岛素抵抗无改善作用。     

苏丹红Ⅰ在NiFe2O4@Au/GC修饰电极上的电化学行为及测定

目的:研究苏丹红Ⅰ在核壳结构纳米复合粒子修饰玻碳电极(NiFe2O4@Au/GC)上的电化学行为,建立测定苏丹红Ⅰ含量的电化学分析新方法。方法:电化学阻抗法(EIS)、线性扫描伏安法(LSV)、差分脉冲伏安法(DPV)。结果:在6×10-7～1.5×10-5mol.L-1范围内,苏丹红Ⅰ的差分脉冲伏安响应电流与其浓度呈现良好的线性关系(r=0.9941),检出限为2×10-7mol.L-1。结论:本方法简便、快捷,灵敏度高,可用于辣椒粉、辣椒酱中苏丹红Ⅰ的检测。     

黄芩苷在多壁碳纳米管修饰玻碳电极上的电化学行为及其测定

目的建立了检测黄芩苷含量的电化学分析新方法。方法采用循环伏安法研究黄芩苷在多壁碳纳米管修饰玻碳电极上的电化学行为及其电极反应机理,以差示脉冲伏安法建立了检测黄芩苷含量的电化学分析新方法。结果在优化的条件下,电化学信号强度电流值I与黄芩苷浓度在1×10-9~5×10-7mol.L-1和6×10-7~5×10-6mol.L-1范围呈线性关系,相关系数为0.9956和0.9934。该方法的黄芩苷浓度检出限为1×10-10mol.L-1,平行测定6次得RSD为1.04%,回收率为98.0~102.0%。结论利用多壁碳纳米管修饰的玻碳电极分析法,建立了测定黄酮类药物黄芩苷的含量新方法,并应用于清开灵注射液中黄芩提取物（黄芩苷计）的含量测定,结果令人满意。