灯盏乙素的药物动力学研究现状

综述灯盏乙素在药物动力学中研究对象、给药剂型与途径、研究方法（分为血药浓度法、尿药排泄数据法、药理效应法,其中血药浓度法最为常用）、吸收、分布、消除、生物转化和总体水平模型等方面的研究进展。     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中的灯盏乙素含量

目的:建立大鼠血浆中灯盏乙素的RP-HPLC测定法.方法:RP-HPLC法,采用迪马C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-乙腈-0.01 mol/L乙酸铵溶液(pH 3.5)(22:8:70)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长335 nm,柱温30 ℃.结果:线性范围为0.025～20.0 mg/L(r=0.999 9),最低定量浓度为25 ng/ml.结论:建立的大鼠血浆中灯盏乙素的反相液相色谱测定法灵敏、准确,可用于大鼠血浆中灯盏乙素浓度测定.     

灯盏花素制剂中灯盏乙素含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定灯盏花素片中灯盏乙素的含量.方法 ZORBAX-C18柱(4.6 x 250 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠水溶液(调pH为7.0)(30:70)为流动相;流速:1.2 ml/min;检测波长334 nm;柱温:室温.结果 灯盏乙素在0.327～3.270 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.13%,RSD为0.98%.结论 本法简便、快速、灵敏、准确,可作为灯盏花素片的质量控制标准.     

HPLC法测定灯盏花颗粒中灯盏乙素的含量

目的:建立 HPLC 法测定灯盏花颗粒中灯盏乙素含量的方法。方法:采用 C_(18)色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇一四氢呋喃-0.1%磷酸(15:15:70)为流动相,流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为335nm。结果:灯盏乙素进样量在0.125-0.875μg 线性范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9993,回收率为98.1%,RSD 为1.3%。结论:本方法为可靠、简便的灯盏花颗粒中灯盏乙素含量测定新方法,且样品前处理比原法简便。     

大孔吸附树脂联用硅胶柱层析法分离纯化冬凌草甲素

目的:建立大孔吸附树脂联用硅胶柱层析法分离纯化冬凌草甲素的工艺流程。方法:将冬凌草粉碎,用95%乙醇提取,浓缩成浸膏;以冬凌草甲素含量为指标,采用大孔吸附树脂联用硅胶柱层析法分离纯化冬凌草甲素,并用红外光谱、熔点测定和高效液相色谱(HPLC)法对重结晶产品的纯度和结构进行分析和表征。结果:优化的工艺为采用苯乙烯型大孔吸附树脂(HZ-841)先对浸膏进行粗分离,再选取乙酸乙酯-石油醚(6:4,V/V)为洗脱溶剂,石油醚-丙酮(2:3,V/V)为重结晶溶剂进行硅胶柱分离纯化,在此条件下,得到的冬凌草甲素含量为96.11%,提取率达到0.86‰。结论:所选工艺简单、可行,使用溶剂安全、无毒,提取效率高,可用于分离纯化冬凌草甲素。     

灯盏乙素衍生物代谢性质的快速体外评价

目的应用肝微粒体模型研究以灯盏乙素及其苷元为先导的系列化合物代谢特征,筛选代谢性质优于灯盏乙素的化合物。方法采用UPLC-MS/MS法测定大鼠肝微粒体温孵体系中不同时间点各候选化合物的含量,筛选T1/2和CLint较优的候选化合物,比较候选化合物与灯盏乙素的酶促动力学特征及其转化情况。结果与灯盏乙素及其苷元相比,候选化合物W11的半衰期较长、清除率较低;W11酶促动力学参数Vmax为(10.25±0.93)μmol·min-1·g-1,Km为(4.48±0.10)μmol·L-1,CLint为(2.29±0.23)L·min-1·g-1;灯盏乙素酶促动力学参数Vmax为(45.95±9.50)μmol·min-1·g-1,Km为(10.19±1.66)μmol·L-1,CLint为(4.48±0.20)L·min-1·g-1;W11可能代谢为M1(W11脱掉甲基后分子质量为577的化合物),并释放出灯盏乙素。结论候选化合物W11可能具有优于灯盏乙素的代谢性质并能释放活性代谢产物灯盏乙素。     

反相高效液相色谱法测定灯盏细辛中灯盏乙素含量

目的 建立测定灯盏乙素含量的高效液相色谱（HPLC）法.方法 色谱柱为Hypersil C18柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（50∶50,用磷酸调节pH至2.5）,流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为335 nm.结果 灯盏乙素质量浓度在0.25 ～ 8.00 μg/mL（r =0.999 9）范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为99.8％,RSD为1.1％（n=9）.不同地区的灯盏细辛含量差异大.结论 该方法便捷、灵敏、准确、重复性好,可为灯盏细辛质量评价提供依据.     

灯盏乙素衍生物的合成及其生物活性

目的为提高灯盏乙素的生物利用度,设计合成了一系列灯盏乙素衍生物,评价其抗脂质过氧化和抗肿瘤的生物活性。方法通过羟乙基化、羟丙基化、酯化反应合成了一系列灯盏乙素衍生物,采用生化法测试部分衍生物对小鼠脑脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的抑制作用,采用台盼蓝法测试体外抑制白血病细胞HL-60生长活性。结果合成了13个灯盏乙素衍生物,其中7个为未见文献报道的新化合物,其结构经1H-NMR和MS确证;化合物1、13对MDA的抑制作用显著,6-9具有中等强度的抗肿瘤活性。结论灯盏乙素结构中的酚羟基是其抑制脂质过氧化产物MDA的活性基团,葡萄糖醛酸的6-位游离羧基能够增强抗肿瘤活性。     

灯盏乙素衍生物的合成及其体外抗凝血活性研究

目的 对灯盏乙素葡萄糖醛酸羧基进行结构修饰,合成葡萄糖醛酸羧基酯类衍生物,并测定这些衍生物的体外抗凝血活性。方法 通过将灯盏乙素葡萄糖醛酸羧基先成盐后酯化的方法合成6个灯盏乙素酯类衍生物,其中灯盏乙素乙酯及苄酯为已知化合物,其余4个为新化合物,目标化合物的抗凝血活性采用家兔的贫血小板血浆（PPP）进行凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间（APTT）及纤维蛋白原（FIB）的测定,以80% EtOH作溶剂,以生理盐水作为阳性对照。结果与结论 合成了6个灯盏乙素酯类衍生物Ⅱa~Ⅱf。药理实验表明,该类衍生物的抗凝血活性没有灯盏乙素强,灯盏乙素羧酸基改造后对凝血活性影响不大。     

“一锅法”制备乙酰灯盏乙素苷元

目的探索制备乙酰灯盏乙素苷元的方法。方法以灯盏乙素为起始原料,与乙酸酐和吡啶共回流,经一步反应获得四乙酰灯盏乙素苷元和部分乙酰化产物6,7,4'-O-三乙酰基灯盏乙素苷元。结果与结论采用一锅法合成了乙酰灯盏乙素苷元,总收率在80%以上。乙酰灯盏乙素苷元和其乙酰化产物6,7,4'-O-三乙酰基灯盏乙素苷元均是灯盏乙素结构改造和修饰的重要中间体。与现有的两步合成法相比,本方法具有合成路线短、收率高、反应条件简单等特点,该法为同时获得2个重要中间体提供了有价值的参考。     

色谱法纯化抗体研究进展

近年来,越来越多的抗体被用于疾病的诊断与治疗,已占据生物药品市场的20%,对抗体的大量需求就要求我们对新的抗体纯化策略进行探索。在过去的几十年里,学术界和产业上的进步共同推动了抗体分离纯化技术的发展,色谱法已经成为抗体分离纯化的一个重要方法,并将继续在抗体纯化领域发挥重要作用。文章对当前的色谱法纯化抗体的技术及其应用进行了一个简要的综述。     

离子交换法分离纯化酶反应液中5-氟尿苷的研究

为开发从酶反应液中分离纯化5-氟尿苷的方法,研究了利用阴离子交换树脂以及硅胶柱色谱实现转化产物分离纯化的工艺;实验采用HPLC为检测方法,以5-氟尿苷含量为考察指标,从吸附量,洗脱率,回收率的角度考察了各种条件的影响。最终确定以D301树脂为吸附剂;最佳吸附条件为动态吸附,温度25℃,pH 8;动态洗脱,洗脱剂5%NaCl溶液,体积流量为3BV/h;再利用硅胶柱色谱,采用200～300目硅胶,以正己烷∶乙酸乙酯=12∶88作为洗脱剂,洗脱后结晶可得到5-氟尿苷纯品,色谱纯,最终收率72.4%。     

连续硅胶柱色谱法快速纯化紫杉醇

采用连续中压硅胶柱色谱法纯化紫杉醇.优化的工艺条件为:以中压玻璃柱为色谱柱,120～160 μm层析硅胶为填料,1％紫杉醇负载量为2g/100g硅胶,样品二氯甲烷溶解上样,二氯甲烷:乙腈(7:3)洗脱,洗脱流速为60 mL/min.一次柱色谱过程即可得到纯度大于90％紫杉醇,回收率75％以上,甲醇:水3:1(v/v)重结晶后得纯度99％紫杉醇产品,低纯度组分作为层析原料再次纯化.使用后的层析柱用二氯甲烷:乙腈(1:1)再生,二氯甲烷平衡,平衡后的层析柱重复使用,使用5次柱分离效率仍不降低.与传统方法相比溶剂用量少、层析填料价格低、生产周期短、分离效果好,易于实现连续工业化清洁生产.     

中压柱层析法提取分离冬凌草甲素的新工艺

采用中压柱层析法提取分离冬凌草甲素,具有洗脱速度快,分离效率高,溶剂无毒无污染,安全、价廉、易得等优点。经重结晶后用薄层扫描法测定含量达99.28%,是一种简便易行的方法。     

离子交换层析法分离纯化玻璃酸的研究

选用四种离子交换剂对玻璃酸进行分离纯化研究。结果表明，采用D315大孔离子交换剂，以去离子水为淋洗液、0．6mol／LNaCl溶液为洗脱液，纯化效果较佳。纯化产品杂蛋白含量≤0．3％，粘均分子量＞96×104。     

Determination of Lansoprazole by Direct Injection of Plasma and High Performance Liquid Chromatography with Column Switching

建立了用柱切换测定血浆中兰索拉唑的方法。血样用蒸馏水简单稀释后注入填充ＬｉＣｈｒｏｍｐｒｅｐＲＰ２（２５～４０μｍ）的预柱上。用蒸馏水冲洗出血浆中蛋白质和其它极性成分。切换后，浓缩在预柱上的兰索拉唑被流动相甲醇０２ｍｏｌ·Ｌ１醋酸铵（６５：３５）反冲到分析柱ＳｈｉｍｐａｃｋＣＬＣＯＤＳ上进行分析。预柱用净化液进行消除和再生。本法有很好的精密度和回收率，检测限为０００５ｍｇ·Ｌ１，日内和日间测定相对标准差小于２５％和５３％。此分析方法已成功地用于测定自愿受试者的兰索拉唑药代动力学     

γ-亚麻酸以柱色谱和甲酯化纯化的正交试验

富集月见草油中γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,1)的方法主要有溶剂萃取法、银离子树脂色谱法、减压蒸馏法、低温结晶法、尿素包合法及超临界CO2萃取法等[1],国内主要采用尿素包合法[2].也可从月见草油中分离γ-亚麻酸甲酯[3].采用低温结晶法得到的1纯度仅30%～50%,减压蒸馏法可达50%～80%.国内合成前列腺E1是以二高γ-亚麻酸(dihomo-γ-linolenic acid,DGLA)为原料,而只有纯度大于90%的1才能合成得到较高纯度的二高γ-亚麻酸.采用银离子树脂色谱分离法可提高纯度,但也会引入银离子杂质,不利于药品质量控制.有报道用甲酯化工艺得到γ-亚麻酸甲酯的纯度为80%,收率50%[3].于世涛等[4]用酯交换法研究提高月见草油中1含量的工艺.但也未达到90%的纯度要求.为此本研究采用正交试验对纯度75%的1再次进行了柱色谱或甲酯化纯化.     

地龙提取物柱层析各部位的平喘活性研究

目的：研究地龙提取物柱层析各部位的平喘活性。方法：采用乙酰胆碱组胺混合液和卵白蛋白分别致豚鼠哮喘发作,观察哮喘潜伏期。结果：5％～15％甲醇的乙酸乙酯洗脱部位可明显延长哮喘发作潜伏期,其他部位均无显著性意义。结论：5％～15％甲醇的乙酸乙酯洗脱部位是中药地龙平喘的主要活性部位。