一例鸭病毒性肝炎与圆环病毒混合感染的实验室诊断

正鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis,DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)引起的,以肝脏病变为主要特征的一种高度致死性传染病,主要侵害1月龄以内的雏鸭~([1])。DHV主要包括鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus, DHAV)、鸭星状病毒1型和2型,其中DHAV属于小RNA病毒科的禽肝炎病毒属~([2])。根据中和试验检测结果,DHAV可分为3个血清型:DHAV-1、DHAV-2和     

鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体的治疗效果分析

鸭病毒性肝炎（DVH）由鸭甲肝病毒（DHAV）和星状病毒（DAstV）引起的雏鸭的急性、高致死性疾病,严重危害养鸭业的健康发展。本病主要危害4周龄内的雏鸭,以1周龄左右的雏鸭最为多发。本病发病急、病程短、死亡率高,临床表现痉挛、角弓反张等特征性症状,     

黑龙江省鸭肝炎病毒HD—Ⅰ株的分离与鉴定

从黑龙江省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎(DVH)的发病雏鸭肝等组织中分离到1株病毒HD—Ⅰ株。经病理学检查、电镜观察、鸭胚中和试验、雏鸭保护试验、动物回归试验等鉴定为血清Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV)。证实引起该鸭场雏鸭发病和死亡的主要原因为DVH所致。用DHV标准R85952毒株多次强化免疫健康鸡，获得高效价的鸡抗鸭肝炎超免疫抗体。     

一例鸭病毒性肝炎与大肠杆菌混合感染病例的诊断

鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)是一种由鸭甲型肝炎病毒(DHAV)引起的致死率高达100%的急性传染病,常引起雏鸭患病[1]。主要侵害3周龄以下的雏鸭,是致死率高、传播快的传染性疾病,以肝出血、肿大和角弓反张为主要特征[2]。是严重危害我国鸭养殖业的的重要疾病之一。目前我国主要流行的鸭病毒性肝炎为DHAV-1型与DHAV-3型。     

一个黄酮成分复方对鸭病毒性肝炎的治疗作用

为了探究一个黄酮成分复方对鸭病毒性肝炎(duck virus hepatitis,DVH)的治疗作用。采用肌肉注射鸭肝炎病毒(duck hepatitis A virus,DHAV)制造DVH模型,雏鸭饮服黄酮成分复方予以治疗,通过对比空白对照组、病毒对照组和治疗组雏鸭存活率、肝损伤指标(肝脏眼观病理变化和肝损伤生化评价指标)、炎症因子(IL-6和IL-8)和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的动态变化,来研究该复方对DVH的治疗作用。结果显示,黄酮复方可以显著减轻染病雏鸭的肝损伤,显著提高炎症因子和HGF的分泌水平,显著地提高了染病雏鸭的存活率。     

中药对雏鸭病毒性肝炎的防治效果

鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭甲肝病毒(DHAV)引起的各种雏鸭的一种高致死率的急性、烈性传染病。其发病急,传播快,死亡率高,发病日龄范围大,混合感染严重。若诊断失误或治疗不及时,可造成雏鸭大批死亡,生产性能降低,可给养殖     

鸭甲型肝炎病毒JS2013株的鸭胚适应性与基因组分析

鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)是引起雏鸭病毒性肝炎的主要病原之一。本研究将2013~2015年分离的5株DHAV进行了鸭胚传代复苏,发现JS2013株的鸭胚适应性最好,可导致鸭胚在接毒后2~5d出现有规律的死亡。应用血凝试验和PCR方法进行了鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭瘟病毒(DPV)和鸭圆环病毒(Du CV)等的检测,结果均为阴性。将DHAV JS2013株继续在鸭胚传代并测定其病毒滴度,发现其在5至8代之间病毒滴度稳定提升,第8代病毒的ELD50为10-7.5/0.1m L,但8至20代没有出现有规律的病毒滴度提升。为了揭示DHAV JS2013株的基因组特征,应用RT-PCR方法分9段扩增了病毒基因片段,通过序列拼接获得了全基因组序列,Gen Bank登录号为KP721458。同源比对发现,与DHAV JS2013株基因同源性最高的毒株属于基因I型DHAV。将其编码多聚蛋白的序列与同源性最高的10株已登录序列的DHAV毒株进行比对,发现存在8处氨基酸位点变异。该研究探明了DHAV JS2013株在鸭胚的增殖特性及其基因特征,为研制新型鸭肝炎病毒灭活疫苗奠定基础。     

雏鸭感染鸭病毒性肝炎的组织病理学观察

鸭病毒性肝炎是雏鸭的一种传播迅速的高致死性病毒病,本病可由5种不同类型的病毒引起,称为鸭甲肝病毒(duck hepatitis A virus,DHAV)的1、2、3型和鸭星状病毒的2个型.这5种独立的病原体,对患病雏鸭造成相似的病理变化,均以引起肝炎为其主要特征.DHAV-1呈世界性分布,在我国,1958～1962年发生了DHAV-1的初次流行,20世纪80年代初期起本病在我国再次流行,其后,各地疫情此起彼伏.     

鸭病毒性肝炎诊断与防控

<正>鸭病毒性肝炎(Duck Viral Hepatitis,DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis A virus, DHAV)引起雏鸭的一种致死性高和传播迅速的传染病。病鸭常呈"角弓反张"的特异姿势,俗称"背脖病",剖检主要见肝脏肿大、"刷"状出血或出血斑,该病主要侵害3周龄以内的雏鸭,是严重危害养鸭业重大疾病之一。     

雏鸭病毒性肝炎防治

雏鸭病毒性肝炎(Duck Viral Hepatitis,DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck Viral Hepatitis,DVH)引起雏鸭的一种高度致死性、传播迅速的病毒性疾病,以肝炎为其主要特征.鸭肝炎病毒有三个血清型,可分别引起Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型雏鸭病毒性肝炎,发病率和死亡率较高.     

鸿雁源鸭甲肝炎病毒Ⅰ型的分离与鉴定

为了对一起死亡率高达91．3％、急性死亡的鸿雁病例进行病原学分析,通过细菌分离排除法和病毒分离方法获得致鸭胚死亡病毒（暂命名为FJ-017株）。该病毒无血凝活性,用鹅细小病毒、番鸭细小病毒、鸭呼肠孤病毒、鸭甲肝炎病毒1型、鸭瘟病毒、鸭坦布苏病毒特异引物分别进行扩增,电泳结果显示,仅鸭甲肝炎病毒1型引物可扩增出条带。将扩增产物回收后克隆,序列分析表明FJ-017株与22株DHAV-1参考株的同源率为93．5％-99％,而与DHAV-2和DHAV-3参考株的同源性均为79．9％。遗传进化分析表明FJ-017株与DHAV-1关系密切,在进化树中共处一分支,表明FJ-017株为鸭甲肝炎病毒1型,此为国内外首次报道。     

一起鸭甲肝病毒1型和3型混合感染的研究报道

自山东省某疑似鸭肝炎发病鸭肝脏中分离到两株病毒,命名为TA1和TA2,分离毒分别回归3日龄雏鸭,可复制出鸭肝炎的典型症状和病理变化。利用鸭甲肝病毒1型（DHAV-1）和3型（DHAV-3）特异性引物进行RT-PCR 扩增,结果为阳性,经测序证实为DHAV-1和DHAV-3。分别扩增分离毒的VP1基因,经序列测定及遗传进化关系分析发现,分离毒TA1和DHAV-3毒株之间有较高的核苷酸序列相似性,与DHAV-3遗传距离最近,属于基因C型;分离毒TA2和DHAV-1毒株之间有较高的核苷酸序列相似性,与DHAV-1的遗传距离最近,属基因A型。     

Identification and molecular analysis of the highly pathogenic duck hepatitis virus type 1 in Hubei province of China

Duck hepatitis virus types 1 (DHV-1) JX strain was isolated from infected ducklings with clinical symptoms from Hubei province of China. These isolated strains showed high pathogenicity to both duck embryo and duckling in Duck embryo neutralization assay and animal infection experiment. The complete genome of JX strain was sequenced. Comparative genome analysis with other available strains in GenBank indicated that JX strain shared 94–99% similarity at the nucleotide level and 95–99% at amino acid level with other DHV-1 strains. Sequence results showed that mutations of nucleotide and amino acid were mainly distributed in VP1 genes. Our result implied that the VP1 probably was the major virulent determinant of DHV-1. In addition, 13 DHV-1 strains from different area were analyzed in phylogeny and they can be grouped into four distinct lineages. The new-identified JX strain was grouped into one lineage with A66 and C80 strains, which were also isolated from China.     

Identification and molecular analysis of the highly pathogenic duck hepatitis virus type 1 in Hubei province of China

Duck hepatitis virus types 1 (DHV-1) JX strain was isolated from infected ducklings with clinical symptoms from Hubei province of China. These isolated strains showed high pathogenicity to both duck embryo and duckling in Duck embryo neutralization assay and animal infection experiment. The complete genome of JX strain was sequenced. Comparative genome analysis with other available strains in GenBank indicated that JX strain shared 94-99% similarity at the nucleotide level and 95-99% at amino acid level with other DHV-1 strains. Sequence results showed that mutations of nucleotide and amino acid were mainly distributed in VP1 genes. Our result implied that the VP1 probably was the major virulent determinant of DHV-1. In addition, 13 DHV-1 strains from different area were analyzed in phylogeny and they can be grouped into four distinct lineages. The new-identified JX strain was grouped into one lineage with A66 and C80 strains, which were also isolated from China.     

交叉中和血清1型和血清3型鸭甲肝病毒单克隆抗体的制备与鉴定

鸭甲型肝炎（duck hepatitis A,DHA）是危害养鸭业的主要疾病之一,是一种雏鸭的急性、高度致死性传染病。本研究旨在研制一种对我国流行的鸭甲型肝炎血清1型（DHAV-1）和血清3型（DHAV-3）病毒具有交叉中和作用的单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）。人工合成12条DHAV-1和DHAV-3的VP1蛋白共有的抗原表位肽,分别与钥孔血蓝蛋白（keyhole limpet hemocyanin,KLH）载体偶联作为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠制备McAb。通过检测McAb与DHAV-1和DHAV-3的交叉反应性,测定McAb对病毒增殖的抑制效率、中和效价以及攻毒保护率等来筛选McAb。本研究共获得了12株稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,其中6株（C1、C4、C7、C12、C13、C16）分泌的McAb同时与DHAV-1和DHAV-3发生特异性交叉反应; C1、C4、C7、C16可以抑制DHAV-1和DHAV-3在鸭胚中的增殖,抑制率在75.34%～100.00%不等;对DHAV-1和DHAV-3的中和效价：C1（1：3&1：5）、C4（1：3&1：3）、C7（1：10&1：11）和C16（1：9&1：9）;C7和C16对DHAV-1和DHAV-3攻毒雏鸭的保护率较高,分别为“70%、80%”和“100%、60%”。本研究成功研制出对DHAV-1和DHAV-3具有交叉中和活性的McAb 4株,其中2株对病毒的感染具有良好的预防效果,为DHA的防控提供了新材料和新思路。     

应用RT—PCR方法检测鸭病毒性肝炎新型和I型病毒

鸭病毒性肝炎病毒是危害养鸭业的重要病毒性传染病,主要感染低日龄雏鸭,临床上分离到的病原主要为鸭病毒性肝炎I型病毒和鸭病毒性肝炎新型病毒,为了加快本病的检测速度,尽快确诊病原,根据GeneBank上两种毒株的基因组序列,选择两种毒株的差异基因序列分别设计了一对特异性的检测引物,将两对引物放在一个PCR反应体系中,两种毒株分别进行特异性扩增,根据扩增片段的大小进行鉴别,建立了可以同时检测鸭病毒性肝炎病毒I型和新型毒株的复合RT—PCR方法,该检测方法快速,特异性强,灵敏性高,可以用于鸭病毒性肝炎病毒的分型鉴别检测。     

Goose haemorrhagic hepatitis caused by a new subtype duck hepatitis type 1 virus

Duck hepatitis type 1 virus (DHV-1) causes a fatal disease in ducklings but there is no report of DHV-1 isolation from goose. Recently, cases of a new disease in overfeeding geese were reported from China. The cases were characterized by haemorrhagic hepatitis lesions on liver after post mortem examinations. The flocks showed about 20-40% morbidity and less than 5% mortality. The histopathological lesions showed destroyed structure of hepatocytic tissue, severe vacuolation and necrosis of hepatocytes. Viral antigen could be detected by monoclonal antibody against duck hepatitis type 1 virus (DHV-1) in the cytoplasm of positive hepatocytes. PCR amplified viral sequences with primers specific for recent Korean-like duck hepatitis type 1 virus (DHV-1C). Alignment of the complete sequence demonstrated that the isolated JT strain from goose exhibiting 95.9% identity to DHV-1C AP-03337 strain, and only 75.3% to classical DHV-1 virus. 80% goslings developed haemorrhagic hepatitis after infection with JT strain. This is the first report on the involvement of a DHV-1 virus in goose.     

商品肉鸭鸭瘟病毒的分离与鉴定

采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒（DEV），分别命名为SD和BJ。以单抗介导的间接免疫荧光（IFA）检测方法，对两个分离株感染细胞滴片进行间接IFA检测，可见感染细胞内有明显的蓝绿色荧光。试验感染7日龄北京鸭可引起鸭瘟的典型临床症状．死亡率为100％（3／3），取试验感染死亡鸭肝脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片，利用单抗进行免疫组化检验，除脑组织外均检测到病毒抗原。根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物，采用聚合酶链式反应（PCR）对野毒sD株人工感染鸭肝脏和BJ珠自然发病鸭肝脏病科提取核酸为模板进行扩增，得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段，对长片段进行测序，与发表序列进行比较，毒株间的碱基序列同源性达到99．73％。     

10日龄肉鸭混合感染新型鸭肝炎病毒和多杀性巴氏杆菌的病原学研究

对1例疑似鸭肝炎病毒和多杀性巴氏杆菌混合感染的10日龄肉鸭采用常规的病毒、细菌鉴定方法和RT-PCR、PCR方法分别进行病毒、细菌的分离与鉴定。病毒鉴定为新型鸭肝炎病毒,细菌鉴定为荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌多杀亚种。细菌对SPF鸡的毒力试验结果显示,分离的巴氏杆菌与强毒标准株C48-1毒力相近,为强毒株。细菌对10日龄肉鸭的致病性回归试验结果表明,一定数量的该株巴氏杆菌可导致10日龄雏鸭的感染死亡。结果表明,该批肉鸭为新型鸭肝炎病毒和A型多杀性巴氏杆菌混合感染。这是国内首例从感染鸭肝炎病毒10日龄雏鸭肝脏中分离到多杀性巴氏杆菌。     

新型鸭肝炎病毒的分离鉴定

为调查发病鸭场的病原,本试验从发病鸭场中分离到1株鸭肝炎病毒,Reed-Muench法测定该病毒对鸭胚ELD₅₀为10^-5.53/0.2 mL,动物回归试验显示攻毒雏鸭复制出原发病鸭场鸭的临床症状和病理变化,鸭病毒性肝炎病毒(DHV)Ⅰ型阳性血清对分离株病毒无中和作用,RT-PCR鉴定分离株病毒为新型鸭肝炎病毒。