透明质酸刺激因子对三维培养的增生性瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响

目的：了解透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响．方法：将提纯的兔源性ＨＡＳＦ加入以人皮肤胶原为支架的人增生性瘢痕成纤维细胞三维培养系统（ＦＰＣＬ）,通过计算ＦＰＣＬ的收缩指数,用放免法测定其中ＨＡ的含量,就ＨＡＳＦ对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩性,快速收缩和ＨＡ合成的影响及其相关性进行初步研究．结果：三维培养系统中ＨＡＳＦ浓度≥１×１０－３ｇ／Ｌ时,ＨＡＳＦ与细胞介导的ＦＰＣＬ最大收缩指数有明显的剂量—效应关系,ＦＰＣＬ的收缩指数与对照组之间的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）;ＨＡＳＦ对ＦＰＣＬ的快速收缩无影响（Ｐ＜０．０５）;ＦＰＣＬ中ＨＡ含量随ＨＡＳＦ浓度升高呈剂量依赖性升高;ＦＰ－ＣＬ的最大收缩指数与其中ＨＡ含量呈正相关（ｒ＝０．９８７５,Ｐ＜０．０１）．结论：ＨＡＳＦ能促进三维培养的瘢痕成纤维细胞的收缩,这种作用可能是通过刺激其合成ＨＡ实现的．     

钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩的抑 …

观察钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩情况的影响，探讨进一步应用于临床治疗增生性瘢痕挛缩的可能性。方法：对人增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养，并构建含成纤维细胞的胶原网络支架，即三维培养系统。结果：通过对６例手术切除的增生性瘢痕进行细胞培养，发现钙通道阻滞剂维拉帕米对ＦＰＣＬ收缩的抑制呈剂量依赖性增高，但对快速收缩模型不影响，并且维拉帕米可使ＦＰＣＬ中的增生瘢痕细胞发生形态学改变。     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞生长增殖的影响

目的：了解兔源性透明质酸刺激因子（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＨＡＳＦ）对人增生性产痕成纤维细胞生长增殖的影响。方法：将ＨＡＳＦ作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,测定＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量、ＭＴＴ反应Ａ值及上清液中有质酸（ＨＡ）的含量。结果：１×１０＾－３～１×１０＾－２ｇ／Ｌ值降低,ＨＡ含量明显增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兔源性ＨＡＳＦ在体外能促进人增     

钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩的抑制作用

目的：观察钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩情况的影响,探讨进一步应用于临床治疗增生性瘢痕挛缩的可能性． 方法： 对人增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,并构建含成纤维细胞的胶原网络支架（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｐｏｐｕｌａｔｅｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｌａｔｔｉｃｅ, Ｆ Ｐ Ｃ Ｌ）,即三维培养系统． Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ： Ｗ Ａ Ｎ Ｇ Ｚｈｅｎｇ（ｍ ａｌｅ,ｗ ａｓ ｂｏｒｎ ｏｎ Ｊａｎ． １３, １９７４ ｉｎ Ｘｉ＇ａｎ Ｃｉｔｙ, Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ） ｉｓ ａ ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔ ｓｔｕｄｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｕｔｏｒ： Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｌ Ｕ Ｋａｉ Ｈｕａ, Ａｄｄｒｅｓｓ： Ｄｅｐａｒｔｍ ｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ, Ｘｉｊｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ, Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｅｌ：（０２９）３３７５３０５ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０１┐１５;　 Ｒｅｖｉｓｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０３┐２６ 结果：通过对６ 例手术切除的增生性瘢     

TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

透明质酸对胚胎成纤维细胞胶原网架收缩的影响

目的 探讨羊水中抑制胚胎伤口收缩的成分是否为透明质酸ＨＡ以ＨＡ对胚胎伤口收缩是否有直接的抑制作用。方法 使用一种体外胚胎伤口收缩模型－－含成纤维细胞的胶原网架ＦＰＣＬ），观察ＨＡ深度为１μｇ／ｍ１￣１０ｍｇ／ｍ１对ＦＰＣＬ收缩的影响。结果低深度组（１、５、２０、５０、１００、１０００μｇ／ｍ１）的ＨＡ对ＦＰＣＬ的收缩指数，差异有显著意义（Ｐ〈０．０５）；高深度级（３、６、１０ｍｇ／ｍ１）ｒ ＨＡ     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞胶原合成的影响

０引言在瘢痕机理的研究中，有学者发现一种相对分子质量（Ｍｒ）为１５０ｘ１０３的糖蛋白能刺激体外培养的成纤维细胞（ＦＢ）产生高浓度透明质酸（ＨＡ），称为透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）．ＨＡＳＦ参与创伤愈合过程，是导致胚胎早期伤口无瘢痕修复的重要因素之一［１］，而瘢痕的主要基质成分为胶原蛋白，ＨＡＳＦ对于ＦＢ胶原合成的作用尚未见文献报道，我们利用体外培养的正常人皮肤及瘢痕ＦＢ，观察了ＨＡＳＦ对细胞胶原合成的影响．１方法１．１实验仪器与试剂ＬＳ－６５００液问计数仪（Ｂｅｃｋｍａｎ），ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２…     

血小板源生长因子-AB对成纤维细胞周期及DNA合成的影响

目的：探讨血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）－ＡＢ在创面愈合及瘢痕增生过程中的作用机制;方法：取第３代～６代体外培养的人正常皮肤成纤维细胞（ＮｓＦｂ）及增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＴｓＦｂ）,经ＰＤＧＦ－ＡＢ作用后,用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定ＤＮＡ合成的变化,用汉式细胞术测定细胞周期的变化。结果：ＰＤＧＦ－ＡＢ作用后,两种细胞ＤＮＡ民均明显增加,Ｓ期细胞数百分比均明显增高,Ｇ１期细胞不断进入Ｓ期,但作用有划     

瘢痕成纤维细胞的MMP-3 mRNA表达及其基因转染

目的：探讨增生性瘢痕组织中细胞外间质（ＥＣＭ）的过度沉积机制，并探索其基因治疗途径。方法：体外培养瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦ），构建间质溶解素１（ＭＭＰ－３）逆转录病毒载体，利用基因转染技术将ＭＭＰ－３基因转入ＨＳＦ，核酸分子杂交检测ＭＭＰ－３的ｍＲＮＡ表达水平。ＤＮＰ－多肽降解法检测间质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性，辅以正常皮肤成纤维细胞作对照。结果：ＨＳＦ表达ＭＭＰ－３ｍＲＮＡ水平及降解ＤＮＰ－多肽     

肝星形细胞表达转化生长因子α与成纤维细胞生长因子

目的 研究肝星形细胞（ＨＳＣ）转化生长因子α（ＦＧＦα）与成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）的表达。方法 分别从正常与ＣＣＬ４肝纤维化大鼠肝脏分离ＨＳＣ,提取ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ测定ＴＧＦα和ａＦＧＦｍＲＮＡ。结果 正常ＨＳＣ表达ＴＧＦα和ａＦＧＦ,肝纤维化时ＴＧＦα与ａＦＧＦｍＲＮＡ水平均显著升高（Ｐ〈０．０５）。结论 ＨＳＣ自分泌ＴＧＦα和ａＦＧＦ,对肝纤维化具有重要促进作用。     

苯那普利治疗无症状性心力衰竭

目的：研究苯那普利（ｂｅｎａｚｅｐｒｉｌ）对无症状性心力衰竭（ＳＨＦ）患者心功能的影响。方法：给ＳＨＦ患者苯那普利５～１０ｍｇ每日口服,连续六个月。利用放射性核素心室造影,测定用药前,后心功能指标：射血分数（ＥＦ）,侧壁射血分数（ＬＡＴＥＦ）、心尖－下壁射血分数（ＩＮＦ－ＡＰＥＦ）、间隔部射血分数（ＳＥＰＴＡＬＥＦ）、峰射血率（ＰＥＲ）、峰充盈率（ＰＦＲ）、峰充盈时间（ＴＰＦＲ）结果：ＥＦ、ＬＡＴＥＦ、ＩＮＦ－ＡＰＥＦ、ＳＥＰＴＡＬＥＦ、ＰＥＲ和ＰＦＲ均增加、ＴＰＦＲ缩短。结论：苯那普利可使ＳＨＦ患者收缩功能增强,舒张功能改善,可用来治疗ＳＨＦ患者。     

PDGF-AB对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨ＰＤＧＦ－ＡＢ促进伤口愈合的作用机理及其在瘢痕增生中的作用。方法：取体外培养的人正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＴＳＦＢ）测定生长曲线,用ＭＴＴ法观察ＰＤＧＦ－ＡＢ对其增殖影响的差异。结果：两种细胞生长曲线存在差异,ＰＤＧＦ－ＡＢ对两种成纤维细胞增殖均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异。结论：ＰＤＧＦ－ＡＢ可能通过刺激成纤维细胞增殖促进伤口愈合,同时在瘢痕增生性疾病中起     

体外伤口收缩模型收缩机理的研究

目的 探讨体外伤口收缩模型－含成纤维细胞的胶原网架（ＦＰＣＬ）收缩的可能机理。方法 利用光镜及扫描电镜对ＦＰＣＬ的收缩进行动态观察。结果 ＦＰＣＬ的收缩是由成纤维细胞产生的一种牵拉力而引起。该力是一种复合式动力，由细胞突起的延伸运动与细胞浆内的收缩结构共同产生。结论 ＦＰＣＬ收缩的机理支持了有关伤口收缩机理的“牵拉”理论。     

透明质酸刺激因子局部外用对兔耳缺血创面愈合的影响

目的： 实有质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）对缺血创面愈合的促进作用，为临床应用提供理论及实验依据。方法：应用本科实验室提纯的ＨＡＳＦ，稀释成２５，５０，１００及２００ｍｇ／Ｌ４种不同浓度，并以生理盐水（ＮＳ）及有有质酸（ＨＡ）作，作用于兔耳缺血创面，进行大体观察及显微测量。结果：用药组创面愈合速度快于对照组，两者相比有显著差异（Ｐ〈０．０１）。结论：ＨＡＳＦ能够提高兔耳缺筹办面愈合速度，改善愈合质量。     

肺纤维化肺成纤维细胞产生透明质酸的实验动态研究

目的：阐明肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生透明质酸（ＨＡ）的动态变化及作用。方法：检测和对比博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化不同时期支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平。结果：（１）ＢＬＭ组ＬＦ培养上清中ＨＡ水平于第１天明显升高，第３天达高峰，第１４～２８天时降至正常。（２）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ中ＨＡ水平于第３天明显升高，第７天达高峰，随后下降，但至第１４天时仍高于正常水平，第２８天降至正常。（３）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＨＡ水平与ＢＡＬＦ细胞成分之间均具有明显的正相关；ＢＡＬＦ和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平之间也有明显的相关性。结论：ＬＦ在肺纤维化的早期肺泡炎阶段就处于活化状态，产生ＨＡ增多，导致肺内ＨＡ的过多聚积；ＬＦ产生ＨＡ增多和ＢＡＬＦ中ＨＡ水平的增高可反映肺泡炎的强度和疾病的活动性     

低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响

目的：观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＳＣ）生长及转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和纤维连接蛋白（ＦＮ）基因表达的影响。方法：体外培养的ＭＳＣ培养液中加入ＬＤＬ共同孵育,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法检测ＭＳＣ增殖情况,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＧＦ－β ｍＲＮＡ、ＦＮ ｍＲＮＡ的表达,应用斑点杂交法检测抗ＴＧＦ－抗体对ＦＮ ｍＲＮＡ表达的影响。结果（１）ＬＤＬ刺激ＭＳ     

左室收缩性与舒张性心力衰竭的超声左心形态,功能的对比研究

对８５例左室舒张性心力衰竭病例进行Ｍ型、二维、多普勒超声心动图检测，２０例正常人作对照（ＣＧ），观察其收缩性，舒张性心力衰竭左心形态和功能的特点。结果表明：左室舒张性心力衰竭组（ＬＶＤＨＦ）与左室收缩性心力衰竭组（ＬＶＳＨＦ）比较，左房内径（ＬＡＤ），左室内径（ＬＤＶ）、左室重量指数（ＬＶＭＩ）显著减低，室间隔厚度（ＩＶＳＴ）、左室后壁厚度（ＰＷＴ）明显增加；与ＣＧ组比较，ＬＶＤＨＦ组ＬＡＤ，ＩＶ     

人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析

目的：通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌ＤＨ５ａ中的表达,为ｂＦＧＦ进一步研究提供材料来源,方法：用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及ＤＮＡ重组技术将ＰＣＲ产物克隆到ｐＧＥＭ－５Ｚ载体并测序,然后克隆到表达载体ｐＸＨ上。结果：转化重组质粒ｐＬＸ１的大肠杆菌经４２℃温控诱导４￣５ｈ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示融合蛋白的分子量约３５０００,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体     

无机纳米粒子对人肺癌细胞A549和小鼠成纤维细胞L929生物 …

目的：探讨无机纳米粒子对人肺癌细胞Ａ５４９和小鼠成纤维细胞Ｌ９２９生长增殖的影响。方法：用羟基磷灰石（ＨＡＰ）及碳酸钙（ＣａＣＯ３）对Ａ５４９人肺癌细胞和Ｌ９２９小鼠成纤维细胞进行体外培养研究,分对照组ＣａＣＯ３组和ＨＡＰ组。绘制细胞生长曲线,ＭＴＴ法测细胞存活率,并测集落形成率。结果：①经ＣａＣＯ３纳米粒子处理过的Ａ５４９人肺癌细胞生长曲线明显下降,ＨＡＰ及ＣａＣＯ３纳米粒子对Ｌ９２９细胞生长内     

反义寡脱氧核苷酸对脯氨酰4-羟化酶mRNA表达的抑制作用

目的：观察反义寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）对脯氨酰４－羟化酶（Ｐ４Ｈ）两种亚基ｍ ＲＮＡ 表达的影响。方法：采用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测培养的人皮肤成纤维细胞中Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ的相对含量。结果：不同浓度（０．１,０．２,０．５,１．０ μｍ ｏｌ／Ｌ）反义ＯＤＮ处理组,人皮肤成纤维细胞中Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ表达水平均显著低于对照组及错配ＯＤＮ 处理组;其中０．１,０．２ μｍ ｏｌ／Ｌ反义ＯＤＮ作用２０ ｈ 时,抑制效应达到最大,５０～７０ ｈ 后,逐渐恢复到对照组水平。正义ＯＤＮ与错配ＯＤＮ对Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ表达则无明显抑制作用。结论：反义ＯＤＮ 对Ｐ４Ｈ 两种亚基的ｍ ＲＮＡ表达均有显著和特异的抑制作用。