消岩汤剂拆方配伍对A549肺腺癌细胞体外生长抑制作用研究

[目的] 探讨消岩汤及各拆方组对人肺腺癌 A549细胞的体外生长的作用机制,探究消岩汤剂中最有效的作用成分和浓度。[方法] 消岩汤全方和根据功效拆分的清热解毒组、活血化瘀组、益气扶正组,以CCK-8检测A549肺腺癌细胞的细胞增殖活性。[结果] 各组均有明显的抑制细胞活性作用,抑制强度依次为:全方组、清热解毒组、活血化瘀组、益气扶正组。[结论] 消岩汤及其拆方组在体外实验中均能抑制A549肺腺癌细胞细胞生长,消岩汤全方组当浓度达到50 g/L时达到最大抑制率为85.60%。清热解毒组药物在抗肿瘤作用方面,与全方接近,提示清热解毒组中药为体外实验中全方抗肿瘤作用最有效组分。     

岩大戟内酯B诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的实验研究

目的:探讨岩大戟内酯B对MCF-7乳腺癌细胞生长抑制作用及其机理。方法:通过MTT法观察各组细胞增殖能力;采用流式检测技术分析细胞周期;利用AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡情况;电镜观察细胞形态。结果:随着岩大戟内酯B浓度增加对MCF-7的抑瘤率增高;G2/M期细胞减少,S期细胞增多,出现S期阻滞;晚期凋亡和死亡的细胞增加;电镜显示加药后细胞出现核固缩,细胞器空泡变性,凋亡小体形成,甚至出现坏死。结论:岩大戟内酯B对乳腺癌MCF-7细胞生长明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,为临床开发新药提供理论依据。     

消岩汤不同时段联合化疗对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响

[目的]观察消岩汤对不同时段联合化疗对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响。[方法]60只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、荷瘤空白组、单纯顺铂组、提前7d运用消岩汤加顺铂组、化疗前3d运用消岩汤加顺铂组和消岩汤同时加顺铂组。消岩汤灌胃第12天后,处死小鼠,观察小鼠生长活动情况、体质量、抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数、血清干扰素(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)含量的变化。[结果]消岩汤提前介入化疗对Lewis肺癌小鼠有较好的抑瘤作用,生长活动状况也较好。化疗前运用消岩汤介入治疗Lewis肺癌小鼠胸腺指数、脾脏指数及IL-2、IFN-γ细胞因子分泌水平显著高于单纯化疗组。[结论]消岩汤能保护实验动物的细胞免疫器官,提高小鼠的免疫功能。     

消岩汤剂治疗晚期非小细胞肺癌临床研究

[目的]观察消岩汤剂治疗非小细胞肺癌的临床疗效。[方法]将中医辨证为正气内虚、瘀毒并存的101例肺癌患者随机分为消岩汤剂组(A组)、消岩汤剂加化疗组(B组)及单纯化疗组(C组)进行对比观察。[结果]A组(33例)治疗后完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、无变化(NC)0%、9%、70%,B组(37例)治疗后为27%、32.4%、56.0%,C组(31例)治疗后为0%、24%、33%。远端转移率为A组23%、B组为16%、C组为28%等。[结论]消岩汤剂在抑制肺癌生长、转移、提高患者生活质量及免疫功能,并且对化疗的减毒增效方面具有一定的作用。     

丹酚酸乙抑制乳腺癌MCF-7细胞生长凋亡的机制研究

目的：观察丹酚酸乙对抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外生长及凋亡作用。方法：采用MTT比色法观察丹酚酸乙对体外培养MCF-7细胞增殖抑制作用,并采用流式细胞仪检测丹酚酸乙作用于MCF-7细胞48h后细胞凋亡率和细胞周期变化。结果：丹酚酸乙能明显抑制MCF-7细胞的生长,呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测结果显示,不同浓度的丹酚酸乙处理MCF-7细胞48 h后,细胞凋亡率和S期细胞的比例逐渐升高。结论：丹酚酸乙对MCF-7细胞具有明显的生长抑制和促凋亡作用。     

消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的分子机制

目的观察消岩汤对WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平变化,探索消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7细胞增殖的分子机制。方法 WISP2/CCN5 shRNA慢病毒质粒转染MCF-7细胞,构建WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞系,采用高、中、低浓度的消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞24、36及48 h后,检测细胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平。结果 WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖抑制率低于空白组和空载组(P<0.05),消岩汤干预组细胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05);高浓度消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞48 h组细胞增殖抑制率高于相同浓度孵育24 h组(P<0.05)。WISP2/CCN5基因敲减组Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白组和空载组(P<0.05,P<0.05),而p27Kip1 mRNA...     

基于网络药理学的消岩汤治疗胃癌机制探讨

[目的]运用网络药理学探讨消岩汤治疗胃癌的作用机制。[方法]通过TCMSP、TCMID和BATMAN-TCM数据库筛选消岩汤的活性成分及作用靶点,后利用Uniprot获取蛋白靶点所对应的基因名称;通过DrugBank、GeneCards、OMIM数据库挖掘胃癌疾病靶点,并筛选出与消岩汤靶点基因的交集基因;运用Cytoscape3.7.2软件绘制药物-化合物-交集靶点网络图;运用String数据分析平台构建PPI网络,并运用MCODE插件对PPI网络进行Cluster模块分析;运用Metascape数据库进行KEGG富集分析及GO富集分析;运用Kaplan-Meier Plotter数据库探索关键基因靶点对胃癌患者OS的影响,绘制生存曲线。[结果]筛选得到消岩汤活性成分41种、靶点基因266个,胃癌靶基因1 163个,最终获得交集基因116个,剔除不含交集基因的活性成分后得到化合物35种。TP53、JUN、AKT1、MAPK3、RELA、MAPK1、ESR1、MAPK14、IL-6等为消岩汤治疗胃癌的关键靶点。GO富集分析结果显示与凋亡的信号通路、对无机物质的反应、对氧化应激的反应、对化...     

扁蒴藤素对人乳腺癌MCF-7细胞生长和凋亡的影响及机制研究

目的 研究扁蒴藤素对乳腺癌细胞MCF-7生长和凋亡的影响及其机制.方法 用MTT法检测扁蒴藤素对MCF-7细胞细胞生长的影响;用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染及TUNEL染色检测扁蒴藤素对MCF-7凋亡的诱导作用;用western blot分析扁蒴藤素作用后,凋亡相关因子Bcl-2和Bax蛋白的表达变化.结果 扁蒴藤素对MCF-7细胞的生长有显著的抑制作用,对其作用48 h的半数抑制浓度(IC5o)为0.59 μmol/L.1.0μmol/L扁蒴藤素作用后,Annexin Ⅴ-FITC/PI染色凋亡细胞比率(15.55 ±1.43)％,TUNEL阳性的MCF-7细胞比率为(35.59±4.43)％,较对照组(未经扁朔藤素作用)[(1.45±0.24)％和(0.85±0.34)％]明显升高,差异均有显著性意义,P ＜0.05.Western blot结果显示,扁蒴藤素能下调Bcl-2的表达,上调Bax的表达.结论 扁蒴藤素素通过调节细胞凋亡相关因子诱导MCF-7细胞凋亡的发生,从而高效抑制MCF-7乳腺癌细胞的生长.     

消岩汤对减轻气虚毒瘀型非小细胞肺癌化疗毒副反应时效关系的临床研究

[目的]观察消岩汤对减轻气虚毒瘀型非小细胞肺癌化疗毒副反应时效关系的临床疗效。[方法]60例非小细胞肺癌患者随机分为提前7 d应用消岩汤加化疗组、提前3 d应用消岩汤加化疗组、消岩汤加化疗组、单纯化疗组。比较4组患者骨髓抑制、肝肾功能、消化道等毒副反应及生活质量之间的差异。[结果]与单纯化疗比较,消岩汤配合化疗使用对改善白细胞毒性、消化道恶心呕吐症状、提高患者生活质量方面疗效显著,其中于化疗前7 d应用消岩汤效果最佳。而对于中性粒细胞(NE)、血红蛋白(HGB)及血小板计数(PLT)降低,口腔炎、腹泻及便秘症状,肝脏毒性,泌尿系统毒性方面无显著疗效[。结论]消岩汤在减轻气虚毒瘀型非小细胞肺癌化疗毒副反应方面具有良好效果。     

益气健脾、祛瘀通络治疗慢性萎缩性胃炎——陈福如教授治疗慢性萎缩性胃炎经验

目的:介绍陈福如教授治疗慢性萎缩性胃炎经验。方法:通过对慢性萎缩性胃炎的病因病机分析,提出消除病因,恢复脾胃的升清降浊功能,祛瘀通络的根本治则及益气健脾、祛瘀通络的治法,以及据法所拟之经验方——萎胃汤,并附以典型病案。结果和结论:益气健脾、祛瘀通络的治法符合慢性萎缩性胃炎的病因病机及发病过程,萎胃汤有助于对此病的控制和逆转,值得我们进一步推广应用。     

自拟柔肝消脂煎治疗非酒精性脂肪性肝炎的疗效评价

目的：观察自拟柔肝消脂煎治疗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的临床疗效。方法：选择NASH患者172例,按患者意愿分为西药组50例、中药组56例和中西药联合组66例。西药组口服护肝降酶和降血脂西药,中药组口服自拟柔肝消脂煎,中西药联合组联合服用西药组和中药组药物。3个月为1个疗程。观察患者肝功能及血脂各项指标变化。结果：中西药联合组66例,治愈50例,有效12例,无效4例,治愈率75.8%,总有效率93.9%;中药组56例,治愈38例,有效15例,无效3例,治愈率67.9%,总有效率94.6%;西药组50例,治愈26例,有效17例,无效7例,治愈率52.0%,总有效率86.0%。中药组、中西药联合组治愈率和总有效率均明显高于西药组(P<0.01);中西药联合组治愈率高于中药组(P<0.05);中西药联合组与中药组总有效率比较差异无统计学意义(P＞0.05)。3组患者血清ALT、AST、GGT水平治疗后低于治疗前(P<0.01);治疗后中药组、中西药联合组ALT、AST、GGT水平低于西药组（ P＜0.05或 P<0.01);治疗后中西药联合组与中药组ALT、AST、GGT水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)。3组患者血清TG、TC均低于治疗前(P<0.01),治疗后中药组、中西药联合组TG、TC水平低于西药组(P＜0.05或P<0.01),中西药联合组和中药组TC、TG水平差异无统计学意义(P＞0.05)。3组患者治疗后影像学检查变化比较,中药组、中西药联合组治愈率和有效率均高于西药组（P<0.01）。治疗过程中,西药组部分患者因服用降脂药短期内出现胃肠道不良反应,中药组和中西药联合组均无明显不良反应发生。结论：自拟柔肝消脂煎对非酒精性脂肪性肝炎有显著疗效,无明显不良反应;自拟柔肝消脂煎与西药联合运用治疗非酒精性脂肪性肝能提高临床治愈率,且能降低降脂西药胃肠道反应。     

pcDNA3.1-mTOR质粒体外转染对乳腺癌细胞生长的影响

目的研究信号转导通路mTOR体外对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用,及对抑癌基因PTEN的负反馈调节的影响。
方法用pcDNA3.1-mTOR真核表达质粒及空载质粒转染MCF-7;Western blot检测转染后mTOR蛋白的表达;流式细胞技术检
测细胞周期和细胞凋亡情况;检测转染后PTEN蛋白的表达。结果转染组细胞的生长速度明显增快,而未转染组和转染空载
体质粒组无明显变化。转染mTOR基因后,PTEN 蛋白的表达明显下降。结论mTOR可能通过PI3K/AKT/PTEN与mTOR信
号转导通路负反馈调节PTEN的表达。mTOR的增高可促进乳腺癌细胞的生长,为mTOR的特异性的抑制剂的运用提供了理
论证据。
     

基于以通为补应用血府逐瘀汤治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病

"以通为补"理论是具有中医特色的治则治法."通"是指祛邪、攻下等治法;"补"是指补益或恢复脏腑功能,使脏腑阴阳平衡."以通为补"即在治疗某类疾病时使用"通"法以达到恢复脏腑机能的效果.血府逐瘀汤具有活血化瘀、行气止痛之功,治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病有"祛瘀生新"的疗效."祛瘀"即"通";"生新"即"补".血府逐瘀汤通...     

甲地孕酮与三苯氧胺联合应用对乳腺癌MCF-7细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨小剂量甲地孕酮(MA)和三苯氧胺(TAM)联合应用对乳腺癌细胞MCF-7生长和凋亡的影响.方法:分别或联合应用TAM、MA作用于MCF-7细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长和抑制作用,应用流式细胞技术测定细胞周期和凋亡率.结果:TAM可抑制MCF-7细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,并可诱导细胞凋亡;小剂量的MA对MCF-7细胞生长与凋亡无明显影响,G0/G1.期细胞增多;两者联合应用时,细胞的生长抑制作用加强,凋亡率上升.结论:TAM对MCF-7细胞具有抑制生长和诱导凋亡作用.加用小剂量的MA后,其抑制生长和凋亡诱导作用加强,两者联合应用具有协同作用.     

益气化瘀法对置铜宫内避孕器家兔子宫内膜血管内皮细胞及平滑肌细胞超微结构的影响

目的:探讨益气化瘀法治疗置铜宫内避孕器(intrauterine device,IUD)所致家兔子宫不规则出血的作用机制。方法:56只家兔,随机分为宫环止血灵大、中、小剂量组,吲哚美辛对照组,模型组,假手术组(手术后不放置宫内避孕器)和空白对照组(不造模),每组8只。前5组建立家兔置铜宫内避孕器模型。宫环止血灵大、中、小剂量组及吲哚美辛对照组分别予以宫环止血灵大、中、小剂量及吲哚美辛灌胃。模型组、假手术组及空白对照组则予以蒸馏水灌胃。透射电镜观察家兔子宫内膜血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)及血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)超微结构的变化。结果:模型组子宫螺旋动脉VSMCs胞浆内水肿,细胞器部分崩解、数量减少,或细胞萎缩,线粒体空泡样变性,其外周胶原纤维增多,血管内皮下间质局部水肿。VECs内线粒体空泡样变性。益气化瘀法治疗组,子宫内膜螺旋动脉VECs及VSMCs的线粒体、肌丝、高尔基体、间质等超微结构损伤较模型组均有明显减轻,与吲哚美辛对照组相似。结论:益气化瘀法对置铜IUD家兔子宫内膜的血管内皮有一定的保护作用,可较好地防治因置铜IUD引起的子宫不规则出血。     

重组人p53腺病毒联合氟维司群对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响

目的 探讨重组人p53腺病毒(Ad-p53)联合氟维司群对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响.方法 采用雌激素受体(ER)阳性MCF-7乳腺癌细胞为研究对象,设对照组(空载病毒组)、氟维司群组、Ad-p53组、Ad-p53+氟维司群组作用于MCF-7细胞,处理72 h后,倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞p53蛋白、ER蛋白的表达水平;流式细胞术法观察细胞的凋亡情况;MTS法观察MCF-7各组细胞增殖抑制的情况.结果 Ad-p53与氟维司群联合作用于MCF-7细胞后,细胞生长受到显著抑制,几乎无增长;流式细胞术观察到单用Ad-p53和氟维司群细胞凋亡率分别是(14.5±2.9)％、(13.3±1.2)％,联合用药组细胞凋亡率为(38.1±5.9)％,显著高于单用药组(P =0.001);MTS法得到Ad-p53和氟维司群分别处理MCF-7细胞24、48、72、96 h后增殖抑制率分别为(8.21±0.54)％、(28.50±1.42)％、(50.14±0.78)％、(58.25±2.92)％和(9.73±1.68)％、(25.26±0.82)％、(35.25±3.94)％、(46.37±2.56)％,联合用药处理24、48、72、96 h后,细胞的增殖抑制率分别为(12.42±1.76)％、(35.20±0.58)％、(62.08±2.56)％及(75.43±3.56)％,联合用药组细胞增殖抑制率在各个时间段均高于单用Ad-p53或氟维司群组(P＜0.05);蛋白质印迹检测表明对照组和氟维司群组p53蛋白低表达,Ad-p53组和联合用药组p53蛋白高表达,但是组间差异无统计学意义;Ad-p53组ER蛋白表达高于对照组,联合用药组ER蛋白表达明显低于单用Ad-p53组(P＜0.05).结论 氟维司群联合重组人p53腺病毒可显著促进乳腺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,二者可能具有协同作用.     

Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响

目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50μg/ml Evn-50处理细胞。然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制。结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P<0.01)。Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例最为明显(P<0.01)。TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT(Ser473)和p-MAPK44/42(Thr202/Tyr204)蛋白水平。结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显。其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实。     

Noggin蛋白对MCF-7细胞增殖、侵袭能力的影响

目的观察Noggin蛋白对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭能力的影响。方法以Noggin重组腺病毒感染乳腺癌细胞株MCF-7,MTT法检测Noggin对MCF-7细胞增殖能力的影响,划痕修复实验及Transwell细胞侵袭实验检测其运动和侵袭能力的改变,Real-time PCR和Western blot检测CXCR4和MMP1基因的表达改变。结果过表达Noggin蛋白的MCF-7细胞增殖能力增强(P<0.05);划痕修复实验提示过表达Noggin蛋白的MCF-7细胞划痕愈合延迟;Transwell细胞侵袭实验提示与空病毒组相比,Noggin组穿膜细胞数显著降低(55±4 vs 25±3,P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果:过表达Noggin后,MCF-7细胞中CXCR4和MMP1基因表达下调。结论 Noggin蛋白可抑制乳腺癌细胞MCF-7的运动和迁移,可能与下调CXCR4和MMP1基因的表达相关。