大规模酵母双杂交技术研究蛋白质相互作用的应用

简介了酵母双杂交技术原理, 总结了酵母双杂交技术大规模筛选蛋白质相互作用的基础、应用及存在的问题。因为大规模酵母双杂交技术结果有大量假阳性及假阴性问题, 因此, 有条件情况下有必要同时开展其他方法的大规模蛋白相互作用研究, 以构建规模更大可信度更高的蛋白质相互作用网络图。     

动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测与控制

动物细胞大规模培养技术是目前生物技术制药产业广泛采用的技术平台,凋亡是大规模培养过程中细胞的主要死亡方式。近些年来,细胞凋亡的形态学特征和分子机制已得到初步阐明,并由此开发出了一系列的细胞凋亡检测和控制方法,为提高大规模培养中的细胞活力发挥了重要作用。     

大规模蛋白质相互作用研究方法进展

随着2000年酵母大规模蛋白质相互作用网络图谱的成功描绘,蛋白质相互作用特别是大规模蛋白质相互作用研究成为生命科学领域的又一个研究热点。酵母、果蝇、线虫以及人类蛋白的大规模相互作用图谱的相继完成,不仅对系统研究细胞内各种生命活动有着重要意义,也标志着蛋白质相互作用研究方法的不断发展和完善。本文综述了当前大规模研究蛋白质相互作用的技术方法并进行了比较分析。每种技术都有其各自的优缺点,在实验中要根据不同的要求和目的选择适宜的方法。     

RNA干扰文库及其在功能基因组学研究中的应用

随着人类基因组大规模测序的完成,下一步的挑战是了解每一个基因的功能 . RNA 干扰文库为大规模基因功能筛选提供了可能 . 虽然用于线虫等模式生物的 RNAi 文库,已经证明是大规模基因功能筛选的有效方法,但这些文库不能用于高等动物的细胞 . 自 2003 年以来,用于人的细胞和哺乳动物细胞的 RNAi 文库取得了突破,相继出现构建已知基因 RNAi 文库和构建随机 RNAi 文库的报道,并成功地应用于大规模基因功能的筛选 . RNAi 文库作为一种简单、高效、大规模、高通量的功能基因组学研究的工具,将在基因功能研究、发现新的药物靶基因、发现疾病相关基因等方面有广阔的应用前景 .     

用多孔微载体大规模长期培养动物细胞的方法

长期大规模高密度动物细胞培养是生物制药产业中的关键技术,文中介绍了利用多孔微载体在中试规模生物反应器中长期大规模连续培养分泌尿激酶 原的DNA重组中国仓鼠卵巢细胞（rCHO)的方法。     

小菜蛾饲养技术与规范

小菜蛾Plutella xylostella(L.)是一种世界性危害的十字花科蔬菜重要害虫,其抗药性问题尤为突出。目前,小菜蛾已成为害虫抗药性等多个研究领域的重要研究对象,而小菜蛾室内大规模人工饲养是开展相关研究的基础。针对目前小菜蛾室内大规模人工饲养技术存在不规范、不科学、不标准等问题,本文重点介绍了本实验室成熟系统的小菜蛾室内大规模人工饲养方法——甘蓝萝卜苗法。该方法简单、易操作、实用性强,因此,可以作为一种小菜蛾室内大规模人工饲养的技术规范在全国范围内推广。     

小菜蛾饲养技术与规范

小菜蛾Plutella xylostella(L.)是一种世界性危害的十字花科蔬菜重要害虫,其抗药性问题尤为突出。目前,小菜蛾已成为害虫抗药性等多个研究领域的重要研究对象,而小菜蛾室内大规模人工饲养是开展相关研究的基础。针对目前小菜蛾室内大规模人工饲养技术存在不规范、不科学、不标准等问题,本文重点介绍了本实验室成熟系统的小菜蛾室内大规模人工饲养方法——甘蓝萝卜苗法。该方法简单、易操作、实用性强,因此,可以作为一种小菜蛾室内大规模人工饲养的技术规范在全国范围内推广。     

组织型纤溶酶原激活剂的纯化制备

简述了用于大规模生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的重组动物细胞及其培养工艺。从重组tPA的大规模、快速纯化的角度考虑,对tPA的纯化制备方法进行了简要评述。     

地鼠繁殖方式的改进与规模化生产

目的：探索SPF地鼠在屏障系统内的配种繁殖方式是否适合目前地鼠大规模生产,满足乙脑减毒活疫苗生产所需动物。方法：采取短期同居配种的繁殖方式进行试验和大规模生产。结果：短期同居配种的繁殖方式与人工刺激配种的繁殖方式相比具有仔鼠成活率高、受孕率高、单产高、利用率高的特点。结论：地鼠短期同居配种的繁殖方式适合在屏障系统内操作和大规模生产。     

抗凋亡策略在细胞大规模培养中的应用

随着阐明凋亡发生的分子机制,现在可运用多种方法阻止细胞凋亡的发生。在大规模细胞培养过程中应用这些方法可促进细胞的存活,实现细胞大规模高密度培养,从而提高细胞生产有价值生物技术产品的能力。     

《大规模哺乳动物细胞培养技术》

本书着重介绍了如何利用细胞生物学、生物化学、发酵、病毒学、微生物学及蛋白化学等方面的技术和方法进行大规模的细胞培养和蛋白质药物的生产。 内容包括:1.大规模哺乳动物细胞培养;2.重组DNA技术在哺乳动物细胞工程及     

Nature系列期刊导读

<正>探讨大规模基因组研究随着新一代基因组测序技术的发展,近十年来大规模基因组测序研究越来越多,由此积累出了庞大的数据群。该文从以下三方面探讨了大规模基因组研究中的大数据问题:全基因组关联研究以及外显子组测序研究中的显著性检验,以及如何使研究更具有统计学意义;外显子组突变研究对于理解和预测当前和未来人类疾病和进化的模式具有重要意义;基于基因的稀有突变研究,及其与已知疾病的     

人Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展

人Pescadillo基因编码的蛋白分子中含有一个BRCT结构域,Pescadillo在DNA合成、细胞增殖和转化中发挥重要作用.考虑到BRCT结构域能够诱导大规模染色质伸展,对Pescadillo在大规模染色质伸展中的作用进行了研究.首先从人乳腺MCF10A细胞中得到了Pescadillo编码区的cDNA,其序列在第580～582位氨基酸发生缺失,将该cDNA片段与lac阻遏物在AO3-1细胞中融合表达,通过lac阻遏物结合细胞基因组中含有lac操纵基因的区域将Pescadillo靶向至染色质周围,发现Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展,并将诱导大规模染色质伸展活性的结构域定位至其BRCT结构域,这为深入理解Pescadillo的重要作用提供了新的线索.     

人Pescadillo诱导大规模染色质伸展

人Pescadillo基因编码的蛋白分子中含有一个BRCT结构域, Pescadillo在DNA合成、细胞增殖和转化中发挥重要作用. 考虑到BRCT结构域能够诱导大规模染色质伸展, 对Pescadillo在大规模染色质伸展中的作用进行了研究. 首先从人乳腺MCF10A细胞中得到了Pescadillo编码区的cDNA, 其序列在第580~582位氨基酸发生缺失, 将该cDNA 片段与lac阻遏物在AO3-1细胞中融合表达, 通过lac阻遏物结合细胞基因组中含有lac操纵基因的区域将Pescadillo靶向至染色质周围, 发现Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展, 并将诱导大规模染色质伸展活性的结构域定位至其BRCT结构域, 这为深入理解Pescadillo的重要作用提供了新的线索.     

大规模动物细胞培养的问题及对策

大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。本文综述了大规模动物细胞培养过程中出现的问题及其解决办法,包括细胞培养环境、基因工程途径改建细胞系及过程监控等。对于这些进展的充分了解对优化细胞培养工艺、提高产品质量具有重要意义     

大规模动物细胞培养的问题及对策

大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。本文综述了大规模动物细胞培养过程中出现的问题及其解决办法 ,包括细胞培养环境、基因工程途径改建细胞系及过程监控等。对于这些进展的充分了解对优化细胞培养工艺、提高产品质量具有重要意义     

产业环境巨变欧洲大型制药企业进行大规模重红

欧洲大型制药企业相继宣布了大规模的重组计划。     

大规模生产制备质粒DNA技术进展

质粒DNA疫苗或基因治疗剂是生物制品的新品种。鉴于质粒DNA表达效率低、持续时间短,需建立一套大规模生产制备质粒DNA的工艺,即发酵、碱性裂解、分离纯化及质量控制。目前质粒DNA大规模生产已经达到千克级水平,一些产品正在进行临床实验。     

葡萄的快束工厂化育苗

葡萄是广受欢迎的水果之一,但传统的育苗方法周期长、退化快、效率低,严重影响了大规模种植的发展和经济效益.若采用冷冻休眠技术,在温室条件下,使用动植物生长调节剂和电加温促进根系生长,可使葡萄当年育苗,当年定植,实现大规模的工厂育苗.     

基因组后研究策略

由于基因组计划的进展,数据库中积累了越来越多不知道功能的基因序列,分析这些基因的功能将成为基因组计划完成后的主要任务.文章介绍了几种大规模分析基因功能的策略及程序：基因插断、基因表达的系统分析、高密度cDNA杂交、蛋白组分析,并讨论了大规模基因功能分析的前景.