蜂胶提取物对诺如病毒的体外抑制作用研究

为研究蜂胶提取物对人源诺如病毒的体外抑制作用,采用小鼠诺如病毒和噬菌体MS2病毒为替代病毒,研究蜂胶水提物和醇提物随浓度及时间变化对小鼠诺如病毒和噬菌体MS2病毒的抑制作用及其机制。浓度相关性实验表明:随着蜂胶醇提物浓度增加,小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度呈显著下降趋势,当醇提物质量浓度达到500μg/mL时,小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度分别下降了6.93lgPFU/mL和3.75lgPFU/mL。时间相关性实验表明:将质量浓度为250μg/mL蜂胶醇提物与小鼠诺如病毒和MS2病毒培养60min,前40min小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度分别下降4.18lgPFU/mL和3.30lgPFU/mL,随后下降趋势减缓,在60min时,小鼠诺如病毒和MS2病毒的总滴度分别下降了4.48lgPFU/mL和3.67lgPFU/mL。机制研究表明:蜂胶醇提物可能与宿主细胞(受体)结合,或直接与病毒颗粒结合,使病毒衣壳蛋白变性,阻止病毒进入宿主细胞;透射电镜图像进一步证实了蜂胶醇提物直接作用病毒导致其膨胀破裂。最后,经蜂胶醇提物处理后,人为污染病毒的蔬菜汁和果汁中病毒的滴度显著降低。研究结果将有可能为果蔬在鲜榨过程中,挑选合适的添加剂提供更多的选择。     

ELISA法替代RIA法测定重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效价

分别用ELISA法和RIA法测定重组乙肝疫苗(CHO细胞)效价,将血清抗-HBs阳转率及ED50值(稀释度)进行统计学分析,对全部样本的阳转率进行X2检验,P0.05,按α=0.05水准分析,说明两种方法的阳转率差异不显著;对检测结果进行t检验,0.05P0.1,按α=0.05水准,说明两种方法检测结果差异不显著。因此,可用ELISA法替代RIA法测定乙肝疫苗效价。     

小鼠诺如病毒分子生物学研究进展

本文对小鼠诺如病毒的分子生物学及复制的研究进展做了比较系统的综述,为小鼠诺如病毒的病原学研究及感染的防控提供参考。     

情绪效价对注意范围的影响

本研究采用情绪Flanker范式探讨不同情绪效价的面孔对注意范围的影响。结果显示：（1）干扰和目标面孔相距0.06°视角时,高兴目标面孔的Flanker效应量A显著大于生气目标面孔的Flanker效应量B,表明负性情绪缩小了注意范围,而正性情绪下注意扩大到了周围的无关信息。（2）干扰和目标面孔相距0.06°视角时,干扰面孔对目标面孔的辨认影响最大,随着距离的增加,这种影响逐渐消失。这表明,情绪面孔虽可对注意范围产生调节,但这种调节存在边界,超过这个边界,情绪面孔就不再对注意发挥调节作用。     

兔抗鸡免疫血清的制备及效价测定

目的：制备高效价兔抗鸡免疫血清．方法：将抗原鸡血清经弗氏佐剂乳化,采用一定的免疫程序免疫家兔．末次加强免疫后7～9d取兔血清,应用双向免疫扩散法测定其效价;采用沉降与离心方法分离血清．结果：免疫家兔在全程免疫后都产生了高效价抗体,效价达到1：32．结论：用抗原鸡血清免疫家兔,可成功制备高效价的免疫血清,为今后的实验教学和实验研究奠定了基础．     

影响青霉素效价的因素及保持其效价的相应措施

青霉素是广泛应用于临床的一种抗菌素，青霉素稀释后易被水解而降低效价，这与溶媒的PH值、溶解方法不当、溶液保存条件等诸因素密切相关。因此，正确选用溶媒，严格掌握药物的配伍禁忌及稀释液的保存时间和温度等，是保持药效，达到预期目的的重要措施。     

两株小鼠诺如病毒的分离与鉴定

摘要: 目的了解江苏地区常用实验小鼠诺如病毒( murine norovirus,MNV) 的感染情况及进化特征。方法在江苏地区抽取三个实验动物中心的实验小鼠,采集直肠及内容物样本,应用ＲT-PCＲ 方法检测MNV OＲF2 特异性基因( 547bp,MNV nt5104-5650) 。阳性样本经ＲAW264. 7 细胞分离病毒,对MNV 分离株的VP1 基因进行扩增,将其连接在pEASY-Blunt 载体上,转化至大肠杆菌Trans1-T1 感受态细胞,通过Kanamycin 抗性筛选,挑取菌落进行PCＲ鉴定,鉴定为阳性的克隆送检测定其VP1 基因序列,构建系统发生进化树。结果共检测小鼠直肠内容物30 份,检出MNV 阳性样本4 份,包括ICＲ 小鼠( 2 /8) 、BALB/c 小鼠( 1 /12) 和C57BL/6J 小鼠( 1 /10) ,感染率为13. 3%;ＲAW264. 7 细胞接毒盲传三代,两只ICＲ 小鼠样品接种的细胞产生明显细胞病变( CPE) ,表现为细胞圆缩聚集,大部分脱落死亡,而C57BL/6J 和BALB/c 小鼠样本接种ＲAW264. 7 细胞无CPE; 应用VP1 特异引物经ＲT-PCＲ 检测,表现CPE 的细胞样本出现特异条带,测序结果显示分离到的2 株MNVVP1 核酸序列均为1626bp,与引物设计参考毒株S7-P2( GenBank 登录号: AB435514) VP1 基因大小相同,进化树图表显示检测到的2 株MNV 属同一独立小分支与参考株BJ10-2062、CＲ4 最为相近。结论此次抽检的实验小鼠MNV 感染率为13. 3% ( 4 /30) ,考虑可能在同一设施内传播。常用实验小鼠携带病毒的生物学意义有待进一步研究。     

采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的研究

目的研究采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的方法.方法本文采用抗生素V号为培养基,PH为7.0的磷酸盐缓冲液为稀释液.结果其抑菌圈清晰,直径大小符合《中国药典》要求.结论采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的方法可靠.     

诺瓦克病毒及实验动物感染

诺瓦克病毒(Norwalk virus,NV)和诺瓦克样病毒(Norwalk-like viruses,NLV)是一组世界范围内引起的急性无菌性胃肠炎的重要病原.NV是一组形态相似、核苷酸同源性较高、抗原性略有不同的病毒颗粒.     

改变庆大霉素发酵工艺对其组分及效价的影响

在20T罐组进行试验，通过改变某些庆大霉素发酵工艺，探讨发酵工艺的改变对发酵效价及组分的影响。结果表明，在发酵不同时期补加不同的氮源对发酵液的效价和组分都有很大的影响。采用稀配方工艺可使发酵液中的组分控制在一个比较理想比例内。     

乙肝疫苗预防接种的临床观察分析

本文对新入校大学生及全校部分教职工及子女共985例进行了计划免疫及预防接种，接种后抗体阳转者857例，阳性率为87％，结果表明：此方法为预防乙型肝炎的最理想方法。     

乙肝免疫球蛋白联合乙肝疫苗阻断母婴传播136例疗效分析

孕妇乙型肝炎或表面抗原阳性者对胎儿的影响已得到公认,本文通过对乙型肝炎病毒表面抗原阳性的孕妇在妊娠期间应用乙肝免疫球蛋白(HBIG)进行母婴传播的阻断疗效观察,显示HBIG联合乙肝疫苗对治疗组的阻断成功率为97.1%,疫苗接种成功率为82.4%,而未接种母婴阻断的乙肝病毒感染为15.96%,疫苗接种成功率为57.1%,明显低于治疗组.     

厦门市成年人乙型肝炎疫苗免疫效果调查

对７９７名ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ均为阴性及ＡＬＴ正常的成年人，按０、１、６程序进行了乙肝疫苗接种，于初免后两年观察免疫效果．结果显示：抗－ＨＢｓ阳转率为５５．２１％，其中男性为５７．６７％，女性为５１．３０％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）．在５０岁以下各年龄组间，抗－ＨＢｓ阳转率差异显著（Ｐ＜０．０５～０．０２）．从事有色金属生产人员与非生产人员，抗－ＨＢｓ阳转率无明显差异（Ｐ＞０．０５）．抗－ＨＢｓ阳转高峰在２０～３０岁组，３１岁以上随年龄增长而降低．在抗－ＨＢｓ阳性者中，抗－ＨＢｓ正常应答为９１．５９％，低应答为８．４１％．各年龄组间抗体应答水平无明显差异（Ｐ＞０．０５）．ＨＢＶ新感染率为１．２５％．保护率为９８．７５％．     

乙肝病毒核酸疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的研究

研究利用核酸疫苗诱生乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (S)细胞免疫应答的作用 .免疫前于BALB/C小鼠股四头肌注射 75 %盐酸布比卡因 ,三天后同样部位注射包含HBsAg基因片段的重组质粒pcDNAHBs .采用3H -TdR掺入法测定免疫小鼠脾细胞增殖能力 ;XTT法测定其脾细胞分泌IL 2活性 .结果表明注射乙肝核酸疫苗可以使小鼠脾细胞增殖 ,小鼠脾细胞分泌上清中可检测到IL - 2活性     

树对人乙型肝炎病毒易感性的验证

为验证树对人乙型肝炎病毒 (HBV)的易感性 ,用含 HBV的人血清接种给 10只成年树 (雌雄各半 )。然后每周抽血 1次 ,每只动物共抽血 11次。用不同公司生产的 EL ISA试剂检测接种后的动物血清感染指标。实验观察至 13周 ,结果分别有 9只和 7只动物出现 HBs Ag阳性 ,持续最短 1周 ,最长 7周。用 PCR检测 ,结果有 1只动物连续 4周在血清中检测出 HBV DNA。表明树能感染人 HBV,但实验有待改进以延长感染持续时间     

树鼩对人乙型肝炎病毒易感性的验证

为验证树Ｑｕ对人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的易感性,用含ＨＢＶ的人血清接种给１０只成年树Ｑｕ（雌雄各半）。然后每周抽血１次,每只动物共抽血１１次。用不同公司生产的ＥＬＩＳＡ试剂检测接种后的动物血清感染指标。实验观察至１３周,结果分别有９只和８只动物出现ＨＢｓＡｇ阳性,持续最短１周,最长７周。用ＰＣＲ检测,结果有１只动物连续４周在血清中检测出ＨＢＶ ＤＮＡ。表明树Ｑｕ能感染人ＨＢＶ,但实验有待改进以延长感染持续时间。     

基因型乙肝疫苗的免疫效果的性别差异研究

探讨基因型乙型肝疫苗（YDV）接种成年男女后的抗－HBs滴度及抗－HBs阳转率变化的性别差异，从而进一步了解其免疫效果。     

冻干甲型肝炎灭活疫苗免疫原性与安全性研究

研究冻干甲型肝炎灭活疫苗免疫原性、安全性及热稳性 .分别将冻干及液体甲型肝炎灭活疫苗注射小白鼠和恒河猴 ,确定小白鼠 7d存活情况及恒河猴的谷丙转胺酶 (ALT)水平、肝脏病理、抗 -HAVIgG水平 .用同等剂量 (12 80EL·UmL-1)的冻干灭活疫苗与液体灭活疫苗初次及加强免疫后 1周 ,2组猴在食欲、活动性、大便频率及持续时间方面均无异常 ;5 2周观察期内未出现肝脏病理改变及ALT水平异常升高 .冻干灭活疫苗与液体灭活疫苗诱发的抗 -HAV水平无显著差异 ,2组IgG水平均在免疫后第 12周达到初次免疫后的最高水平 ,冻干疫苗组为 12 0 47mIUmL-1,液体疫苗组为 11875mIUmL-1.两组无显著差异 (P >0 .0 5 ) .第 2 4周分别加强免疫同等剂量疫苗后 ,第 2 8周抗 -HAVIgG水平显著提高 ,达到最高水平 ,冻干疫苗组为 412 15mIUmL-1,液体疫苗组为 40 874mIUmL-1.冻干剂型的甲型肝炎灭活疫苗具有液体剂型同样良好的安全性和免疫原性 .     

治疗性乙型肝炎疫苗研究反思

 “治疗性乙肝疫苗”是以乙肝病毒(HBV)的表面抗原(s抗原)为基础的生物制剂,目的是激发抗s抗原免疫反应,终止HBV慢性感染.HBV的e抗原与s抗原无抗原性关联,对e抗原的反应也与病毒及感染细胞的清除无关,因此以II期临床试验者血清有关病毒e抗原的数据结果,尚不能判断“治疗性乙肝疫苗”是否有效.疫苗的应用是抵御病毒入侵,而治疗性乙肝疫苗是在病毒已经进入人体后应用,在患者肝细胞可能广泛受累的情况下,疫苗一旦打破耐受激发抗s抗原免疫反应,除能清除血清中游离的病毒和s抗原颗粒外,将直接攻击被感染的肝细胞.由于无法估计慢性HBV感染者肝细胞感染程度,所以无法推测免疫反应发生后,免疫病理所致的肝损程度以及相应的风险.在应用上隐含如此风险,是“治疗性乙肝疫苗”走不出实验室的重要因素之一.