骨骼肌细胞膜去极化对葡萄糖转运子4转位的调节作用

目的：探讨高钾造成的骨骼肌细胞膜去极化对葡萄糖转运因子4（GLUT4）转位的调节作用。方法：用55mmol／L的葡萄糖酸钾孵育L6GLUT4myc肌管使细胞膜去极化。用偶联抗体的比色法检测细胞膜上GLUT4的数量。结果：膜去极化介导的GLUT4myc转位呈时间依赖性,2min和5min时细胞膜上GLUT4myc的含量显著高于基础组（P〈0．05）,并随时间的延长回复到基础状态：去极化作用同样急性增加钙,钙调蛋白依赖性蛋自激酶Ⅱ的磷酸化。结论：高钾诱导的细胞膜去极化可使膜表面GLUT4myc快速增加,钙,钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ可能参与高钾刺激的骨骼肌细胞GLUT4myc转位的机制。     

胰岛素促进犬缺血心肌GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的 :观察胰岛素能否刺激缺血心肌葡萄糖转运子 4(GL U T4)移位和葡萄糖摄取。方法 :利用自动分析仪测定血浆葡萄糖、乳酸和游离脂肪酸浓度 ,应用 Western印迹法分析并检测 GL U T4含量。 结果 :胰岛素使缺血心肌细胞质膜 GL U T4明显增加 ,从 (2 5± 4) %增至 (4 0± 6 ) % (P<0 .0 5 ) ;细胞器膜 GL U T4则相应减少。同时伴随葡萄糖摄取量明显增加 ,是单纯缺血心肌葡萄糖摄取量的 2倍。结论 :胰岛素刺激可引起 GL UT4移位 ,使缺血心肌葡萄糖摄取增加。提示心肌缺血时 ,应用胰岛素有助于增加心肌葡萄糖的摄取和利用     

电刺激促进大鼠骨骼肌细胞GLUT4转位并激活Akt信号通路

目的：利用L6细胞模型研究电脉冲刺激对骨骼肌细胞GLUT4转位及其信号通路的影响.方法：将稳定过表达GLUT4myc-AS160的L6-GLUT4myc-AS 160大鼠骨骼肌细胞体外培养于6孔培养板中,用含2％胎牛血清的细胞分化液诱导分化为肌管,将6孔板随机分成对照组、胰岛素组和电脉冲刺激（EPS）组,用终浓度为100 nmol/L的胰岛素或电刺激仪对细胞刺激,对照组不做任何处理.ELISA测定细胞膜上的GLUT4myc含量,免疫印记法测定蛋白激酶B（Akt）和Rab-GTPase激活蛋白AS160的磷酸化.结果：与对照组相比,1h电刺激显著增加细胞膜表面GLUT4myc水平并磷酸化Akt及Rab-GTPase激活蛋白AS160.结论：电刺激促进L6骨骼肌细胞GLUT4myc转位,激活Akt信号通路.     

心肌细胞缺氧通过激活AMPK促进GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的：探讨心肌缺氧时ＡＭＰ激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）激活对葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）移位和葡萄糖摄取的作用。方法：大鼠心室肌经５００μｍｏｌ／Ｌ腺嘌呤－９－β－Ｄ－阿糖呋喃腺苷（ａｒａＡ）处理后,分别与胰岛素、氰化钾、５－氨基咪唑－４－氨基甲酰－１－β－Ｄ核糖呋喃腺苷（ＡＩＣＡＲ）孵育,用放射性核素分析技术测定其葡萄糖摄取量和ＡＭＰＫ活力,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析心肌细胞ＧＬＵＴ４含量。结果：ＡＭＰＫ特异性激活剂ＡＩＣＡＲ和氰化钾可使心肌葡萄糖摄取增加（１倍和１．５倍）,但均受ａｒａＡ抑制。ＡＩＣＡＲ增加心肌ＡＭＰＫ活力和葡萄糖摄取,而ａｒａＡ则有抑制作用。心肌细胞质膜ＧＬＵＴ４分布明显增加而细胞器膜ＧＬＵＴ４分布相应减少。结论：氰化钾所致的心肌缺氧与ＡＩＣＡＲ一样可通过ＡＭＰＫ激活途径,促进ＧＬＵＴ４移     

葡萄糖转运蛋白4转位与胰岛素抵抗

葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转位障碍导致骨骼肌和脂肪细胞对葡萄糖摄取、利用减少是胰岛素抵抗的重要分子基础.胰岛素和运动是刺激骨骼肌内GLUT4转位的两个重要因素,胰岛素信号转导途径和蛋白激酶(AMPK)途径是葡萄糖的转运过程中主要的信号转导途径.对GLUT4转位的研究有助于阐明胰岛素抵抗的发生机制.     

新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖血脂的影响

目的：研究4个新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖血脂水平的影响。方法：用四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,研究不同结构的新型委陵菜黄酮衍生物A—D分别给予不同剂量灌胃给药（10、30mg·kg^-1）对糖尿病小鼠血糖、血脂的影响。结果：4个新型委陵菜黄酮衍生物均可显著降低糖尿病小鼠的血糖和血清甘油三酯水平。除衍生物B外,其它各给药组均能明显降低糖尿病小鼠的血清总胆固醇水平。结论：新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠均具有较好的降血糖和降血脂作用,衍生物D是更具有进一步研究价值的抗糖尿病候选化合物。     

脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响

目的观察脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞基础及胰岛素诱导的葡萄糖摄取的影响。方法1. 将L6细胞分为脂联素处理组（脂联素刺激30?min）、胰岛素处理组（10?nmol/L胰岛素刺激20?mi n）和对照组。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率。2. 将稳定表达葡萄糖转运子4（Gluosetransporter 4, GLUT4）的L6细胞(L6 GLUT4细胞)分为6组：① 对照组; ② 脂联素处理组：脂联素刺激30?min;③ 低浓度胰岛素处理组：0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ④ 高浓度胰岛素组：10?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑤ 脂联素预处理+低浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑥ 脂联素预处理+高浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,10?nmol/L胰岛素处理20?min。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率及GLUT4细胞膜含量。结果L6细胞：脂联素处理组葡萄糖摄取率与对照组差异无统计学意义(P＞0.05) 。L6 GLUT4细胞：① 脂联素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率与对照组差异均无统计学意义(P均＞0.05);②　低浓度胰岛素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于对照组（P均＜0.01）;脂联素预处理+低浓度胰岛素组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于脂联素处理组（P均＜0.01）以及低浓度胰岛素处理组（P均＜0.01）;③　高浓度胰岛素处理组葡萄糖摄取率、细胞膜GLUT4含量均显著高于低浓度胰岛素处理组（P＜0.05,P＜0.01）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组与脂联素预处理+低浓度胰岛素组比较,葡萄糖摄取率显著升高（P＜0.05）,而GLUT4细胞膜含量升高不显著（P＞0.05）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组葡萄糖摄取率显著高于单纯高浓度胰岛素组（P＜0.01）,而GLUT4细胞膜含量差异无统计学意义（P＞0.05）。结论① 脂联素对骨骼肌细胞的葡萄糖基础摄取无明显影响;② 脂联素本身不足以诱导骨骼肌细胞的GLUT4细胞膜转位及葡萄糖摄取;③ 脂联素可增加胰岛素诱导的骨骼肌细胞的葡萄糖摄取,其机制可能与加强胰岛素诱导的GLUT4细胞膜转位以及增加细胞膜GLUT4对葡萄糖的转运效率有关。     

附子多糖对胰岛素抵抗脂肪细胞模型GLUT4蛋白表达和转位的影响

目的研究附子多糖对胰岛素抵抗脂肪细胞模型葡萄糖转运4(GLUT4)蛋白表达和转位的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,用高糖和高胰岛素联合诱导培养脂肪细胞,造成胰岛素抵抗脂肪细胞模型,实验设对照(CON)组、模型(MOD)组、附子多糖(FPS)组、罗格列酮(ROS)组,干预培养24 h,收集细胞,提取全细胞蛋白及细胞外膜蛋白,SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳后,通过Western blot方法检测各组全细胞蛋白及细胞外膜蛋白中GLUT4的含量。结果各组对GLUT4表达差异无统计学意义(P0.05)。模型组转位显著降低,仅为正常脂肪细胞的30.4%,以模型组转位量为基值,各组分别与之相比计算GLUT4蛋白的相对定量,附子多糖组、罗格列酮组分别使GLUT4蛋白转位增加164%、301%,与模型组比较差异有统计学意义(P0.01),附子多糖组显著低于罗格列酮组(P0.01)。结论附子多糖对胰岛素抵抗脂肪细胞模型全细胞GLUT4蛋白表达无影响,但可促进其转位,其促进胰岛素抵抗脂肪细胞对葡萄糖的摄取可能与这一机理有关。     

姜黄素衍生物L6H4对糖脂代谢异常大鼠的治疗作用及其机制

目的:观察姜黄素衍生物L6H4对糖脂代谢异常大鼠代谢指标的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:24只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常空白对照组(NC组,n=8),高脂组(HF组,n=8)和高脂治疗组(FT组,n=8),后2组高糖高脂饲料喂养12周。第5周时开始给予药物治疗8周,12周末检测各组大鼠血清生化指标、肝脏和骨骼肌的甘油三酯(TG),以及与糖脂代谢相关的多项指标,并观察光镜下肝脏与骨骼肌的病理学变化。结果:1HF组与NC组比较,体质量增加(P<0.05),肝湿质量、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOME-IR)、血清TG、肝脏TG、骨骼肌TG、血清ALT、血清游离脂肪酸(FFA)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和白介素6(IL-6)水平均升高(均P<0.01),脂联素(ADP)、瘦素(LEP)下降(分别P<0.01,P<0.05),成纤维细胞生长因子21(FGF-21)差异无统计学意义(P>0.05);2FT组与HF组比较,FINS、肝湿质量与肝指数差异均无统计学意义(P>0.05),体质量、肝脏TG、血TG、ALT、FBG、HOMEIR、FFA、hs-CRP水平降低(P<0.01),骨骼肌TG、IL-6水平下降(P<0.05),FGF-21、ADP升高(P<0.01);3HF组肝脏可见明显脂肪变及炎症细胞浸润,骨骼肌细胞间质可见脂肪浸润,治疗后肝脏脂肪变以及骨骼肌脂肪浸润明显改善。结论:姜黄素衍生物L6H4对高脂高糖喂养大鼠具有控制体质量、保护肝功能、改善胰岛素抵抗的作用,可能与其调脂、抑制炎症、降低异位脂肪存积相关。     

肥胖Wistar大鼠骨骼肌细胞GLUT-4转位变化的研究

目的:探讨肥胖大鼠骨骼肌细胞的葡萄糖转运因子4(GLUT-4)转位变化.方法:10周龄雄性Wistar大鼠46只,随机平均分成对照组和肥胖组.6周肥胖模型建立后,用超速蔗糖梯度离心方法分离骨骼肌细胞内膜和外膜的匀浆,用Westem blot方法检测两组大鼠骨骼肌细胞内、外膜GLUT-4的蛋白水平.同时分别检测其空腹血糖、空腹胰岛素和血脂浓度.结果:肥胖组大鼠的胰岛素敏感指数明显下降(P＜0.01),肥胖组的内、外膜GLUT-4蛋白含量均较对照组下降,而且外膜GLUT-4下降比内膜更明显(分别为57.0%、12.2%,P＜0.01).结论:肥胖下调骨骼肌细胞GLUT-4总量,抑制细胞内膜GLUT-4向细胞外膜的转位,提示肥胖大鼠的骨骼肌存在由于GLUT-4下降调节所致的胰岛素抵抗.     

氧化石墨烯衍生物对L6细胞活性的影响

目的：研究氧化石墨烯(GO)衍生物对L6细胞活性的影响。方法原代的L6细胞经过1 d或3 d培养,倒置荧光显微镜观察细胞形态并采取电子图片保存;收集对数期成熟的L6细胞,MTT法测定细胞增殖活性;对数期成熟的L6细胞,经GO衍生物3 d的刺激培养,收集细胞培养上清液,采用ELISA方法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)。结果原代L6经过3 d培养,80%以上细胞分化为成熟的L6细胞;0.3μg/mL GO衍生物(GO-L和GO-D)经过3 d刺激,GO-L刺激细胞增殖的OD值为(0.52±0.28),GO-D刺激细胞增殖的OD值为(0.81±0.34),两者与对照细胞OD值(0.18±0.06)比较差异有显著统计学意义(F=6.05,P<0.01);其中D型衍生物对L6细胞增殖活性强于L型衍生物,两者之间比较差异有统计学意义(F=4.54,P<0.05);L型衍生物和D型衍生物均能诱导L6细胞分泌TNF-α[(18.6±5.36) vs (24.9±8.86)]和少量IFN-γ[(14.3±3.78) vs (13.8±2.62)]。但IFN-γ分泌两者差异无统计学意义(F=0.82,P>0.05)。结论 GO衍生物能诱导L6细胞活化和分泌TNF-α,可能会影响L6细胞中糖的代谢与调节。     

钒酸钠对STZ-糖尿病大鼠心肌细胞膜GLUT4易位的影响

目的探讨钒酸钠类胰岛素作用及对实验性糖尿病大鼠心肌组织葡萄糖转运蛋白4 (glucose transpoter type 4, GLUT4)与胰岛素刺激GLUT4易位的影响.方法 40只Wistar大鼠随机分为2组,1组应用链脲佐菌素(55 mg/kg)腹腔内注射,5 d后血糖大于13.5 mmol/L定为实验性糖尿病大鼠(STZ-D大鼠),然后将STZ-D大鼠组及正常组再分为2组,加钒组隔日管饲0.4% 钒酸钠稀释液,持续4周后在麻醉情况下每组各一半大鼠在尾静脉注射5U /kg诺和正规胰岛素治疗,5 min后心脏抽取血液标本并提取心脏,应用Western blot 技术测定GLUT4蛋白表达.结果钒酸钠治疗使STZ-D大鼠血糖、甘油三酯、胰岛素降低,STZ-D大鼠心肌细胞膜GLUT4蛋白含量与正常对照组比较明显降低(53%),而钒酸钠与胰岛素合用治疗STZ-D大鼠可使心肌细胞膜GLUT4增加2.7倍.结论钒酸钠治疗STZ-糖尿病大鼠在不增加胰岛素释放的情况下具有明显改善糖脂代谢的效果,糖尿病大鼠心肌细胞膜GLUT4含量减少可能是引起心肌葡萄糖转运障碍及心功能下降的因素,钒酸钠治疗使胰岛素调节GLUT4转运易位增加致心肌组织对葡萄糖摄取利用加强可能是某些降低血糖的机制以及改善心功能原因.     

氯氮平和利培酮对大鼠脂肪细胞GLUT4的影响

目的：比较氯氮平和利培酮对大鼠血糖（FPG）、血浆胰岛素（FINS）、胰岛素敏感指数（ISI）以及脂肪细胞上葡萄糖转运蛋白（GLUT）4表达的影响。探寻非典型性抗精神病药物影响糖代谢的机制。方法：18只雄性sD大鼠随机均分成氯氮平组（20mg·kg^-1·d^-1）、利培酮组（2mg·kg^-1·d^-1）和空白对照组,每组6只在第1、14、28天分别检测FPG、FINS,计算IsI,在第28天处死大鼠分离获得脂肪细胞内外膜,用Western—blot法测量大鼠脂肪细胞内外膜上GLUT4的含量。结果：基线时各组大鼠的FPG、FINS、ISI水平无明显差异（P〉0.05）。14天后,氯氮平组大鼠的FPG水平高于空白对照组（P〈0．05）;氯氮平组大鼠的IsI水平低于空白对照组,差异有显著性（P〈0．05）。28天时,氯氮平组的FPG、FINS均高于空白对照组,差异有显著性（P〈0．05）;ISI水平低于对照组且差异有显著性（P〈0．05）;利培酮d组与空白对照组相比差异无显著性。各组大鼠脂肪细胞内外膜上的葡萄糖转运蛋白的量均较空白对照组下降,但差异无显著性。结论：氯氮平影响外周组织细胞对葡萄糖的吸收和利用,降低外周组织GLUT4的表达。利培酮对糖代谢的影响没有氯氮平明显,两者机制可能不同。     

吡格列酮对3T3-L1细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将3T3-L1细胞随机分为3组对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1mmol/L)。提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUT4mRNA和蛋白的表达情况。结果与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4mRNA和蛋白表达。     

高葡萄糖和高胰岛素对葡萄糖转运子4影响的研究

胰岛素刺激引起的葡萄糖转运主要由葡萄糖转运子(GLUT)4介导。GLUT4的亚细胞分布、基因表达量以及功能活性,都将直接降影响胰岛素作用下葡萄糖的跨膜转运。高葡萄糖和高胰岛素可加强己糖胺途径来抑制GLUT4转位过程、下调胰胰岛素受体底物的蛋白水平和酪氨酸磷酸化、从转录和转录后水平抑制GLUT4的基因表达、直接降低GLUT4内在活性,继而使胰岛素通过GLUT4介导的糖转运下降,引起胰岛素抵抗。