大肠癌与大肠血吸虫病的AgNOR及P_(21)~(ras)比较研究

<正> 对25例大肠癌、20例大肠血吸虫病及20例正常大肠粘膜进行AgNOR 计数及 P_(21)~表达观察。结果显示大肠癌组与大肠血吸虫病组及正常粘膜组比较差异具有高度显著性,而大肠血吸虫病组与正常组比较差异无显著性,说明大肠血吸虫病与大肠癌关系不甚密切,作为癌前病变的意义远非大肠腺瘤重要,慢性大肠血吸虫病不应视为癌前性疾病。     

外阴白斑和鳞癌细胞中p53蛋白的表达

目的　研究 p5 3蛋白对外阴白斑和鳞癌细胞中的表达 .方法　采用 ABC免疫组化法 ,对 10 2例外阴白斑和鳞癌患者进行 p5 3蛋白检测 .结果　各组与鳞癌组相比 ,经 χ2检验 ,有非常显著差别 (P<0 .0 1) .正常组 2 1例 χ2 =2 4.0 2 ,增生组 2 0例χ2 =9.2 3,硬化萎缩组 2 8例χ2 =5 3.2 3,混合组 2 3例 χ2 =138.39,不典型增生组 8例 χ2 =13.5 3.结论　 p5 3蛋白的表达与鳞癌有密切关系 ,为肿瘤的恶性标志 ,说明 p5 3蛋白检测可作为良恶性病变之间的鉴别手段     

一氧化氮诱导口腔鳞癌细胞凋亡和 P53蛋白表达的实验研究

目的：研究外源性一氧化氮（NO）对人舌鳞癌Tca8113细胞诱导凋亡的作用及可能机制。方法：硝普钠（SNP）作为NO的供体，用不同时间和不同浓度SNP处理细胞。采用MTT法检测N（）对细胞的生长抑制，丫啶橙染色、Wright—Giemsa染色、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡作用，蛋白电泳法分析细胞凋亡机制。结果：NO对Tca8113细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性。SNP处理细胞后，DNA、RNA合成减弱；细胞形态学出现凋亡的特征性改变；电泳可见典型的DNA Ladder形成；流式细胞仪上见随着SNP浓度增高，细胞凋亡随之增加，并出现G2／M期阻滞；Western blot显示随着SNP浓度增高，P53蛋白表达水平上调。结论：外源性NO对人舌鳞癌Tca8113细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用，P53蛋白介入了硝普钠引起的细胞凋亡调控作用。     

口腔鳞癌K-ras基因测序分析及p21~(ras)蛋白的表达

目的:探讨K-ras基因在口腔鳞癌中的序列改变和p21ras蛋白的表达。方法:采用聚合酶链反应直接测序检测口腔鳞癌K-ras基因外显子1、2突变,免疫组织化学法检测口腔鳞癌组织、癌旁正常组织p21蛋白的表达。结果:30例口腔鳞癌中4例(13.3%)存在K-ras基因突变,突变方式为C→T转换,突变位点在第6位和第79位密码子,口腔鳞癌组织p21ras蛋白阳性率为73.3%(22/30),高于癌旁正常组织20%(6/30)。结论:口腔鳞癌中K-ras基因的突变谱较广,K-ras基因突变和p21蛋白表达与口腔鳞癌发生发展有关。     

ras癌基因功能产物P_(21)在胃癌表达的研究

采用 P_(21)单抗 SCI-oncogemaI,用抗生物素-生物素-过氧化酶复合物技术(ABC 法),检测了141例胃癌、重度不典型增生、肠化生、萎缩性胃炎、浅表性胃炎及正常胃粘膜 ras 癌基因蛋白产物 P_(21)在单个细胞水平的表达。结果示53例胃癌 ras P_(21)表达多出现于早期胃癌。阳性率为87%,中晚期癌为阳性率胃74%,重度不典型增生为86%,萎缩性胃炎为74%,肠化生为73%,正常胃粘膜仅1例呈弱阳性.本研究提示癌前病变、早期胃癌时 ras 癌基因大量激活,其功能性蛋白产物 P_(21)过度表达,与胃癌的早期癌变可能有密切关系.     

膀胱癌细胞癌基因ras产物P_(21)的表达及其临床意义

本文用癌基因ras产物P_(21)的单克隆抗体SCI-oncogema 1及ABC免疫酶标染色法对53例膀胱癌和7例泌尿系非肿瘤病人的膀胱粘膜石蜡切片进行染色,结合肿瘤的病理学分级和分期以及病人随访结果进行分析,表明弱例膀胱癌中P_(21)阳性者达32例(60.4％),而7例泌尿系非肿瘤病人的膀胱粘膜标本其P_(21)均为阴性。还发现在膀胱癌P_(21)的阳性率随着病理分级和分期的上升而明显下降,P_(21)阳性膀胱癌其复发率为17.6％,而P_(21)阴性膀胱癌的复发率则高达82.4％。经分析还发现P_(21)表达与膀胱癌预后有密切的相关性,32例P_(21)阳性膀胱癌患者中死于肿瘤者仅3例(9.4％),而21例P_(21)阴性膀胱癌患者中死于肿瘤者多达17例(81％)。提示P_(21)阳性可考虑作为膀胱癌预后较好的客观依据之一。     

转人B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测

目的探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测。方法采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中（Tca8113/B7-H3）,RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达,Western blot检测其蛋白的表达。经G418筛选后,用有限稀释法建立稳定高表达的带有B7-H3基因的Tca8113鳞癌细胞株。结果RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215bp大小的cDNA扩增产物;DAB显色,裂解的Tca8113/B7-H3基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约65～86ku大小的特异性条带。转染B7-H3的Tca8113细胞,经过细胞传代培养后仍然能够检测到高表达的B7-H3基因,经过有限稀释法建立了Tca8113/B7-H3细胞株。结论成功建立了Tca8113/B7-H3细胞株,为以后的体内外试验提供了很好的平台,为近一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础。     

胃癌组织中癌基因激活和抑癌基因失活的研究

近年来分子生物学的发展使人们认识到癌发生的分子基础——癌基因激活与抑癌基因失活。目前已在人类多种肿瘤中发现有癌基因的激活和抑癌基因的失活。一些癌基因的激活在某些肿瘤中是特异的,所以通过对癌基因激活的检测可协助临床进行肿瘤的诊断;某些癌基因激活发生在肿瘤的早期或癌前阶段,某些癌基因激活发生在肿瘤的晚期,这为我们提供了一个用癌基因激活作为分子探针,监测某些肿瘤发生和协助临床判断预后的可能性。     

Fas基因转染联合应用顺铂对舌鳞癌细胞的杀伤作用

目的 探讨Fas基因转染联合应用顺铂对舌鳞癌Tca8113细胞的杀伤作用.方法 实验细胞分为未转染Fas基因组和转染Fas基因组,各加入100 μl顺铂,使其终浓度分别为1、5、10、20、40 μg/ml,观察顺铂作用下转染前、后Tca8113细胞的形态学变化,绘制细胞生长曲线,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测顺铂对转...     

转人B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测

目的探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测。方法采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中(Tca8113/B7-H3),RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达,Western blot检测其蛋白的表达。经G418筛选后,用有限稀释法建立稳定高表达的带有B7-H3基因的Tca8113鳞癌细胞株。结果RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215bp大小的cDNA扩增产物;DAB显色,裂解的Tca8113/B7-H3基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约65～86ku大小的特异性条带。转染B7-H3的Tca8113细胞,经过细胞传代培养后仍然能够检测到高表达的B7-H3基因,经过有限稀释法建立了Tca8113/B7-H3细胞株。结论成功建立了Tca8113/B7-H3细胞株,为以后的体内外试验提供了很好的平台,为近一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础。     

食管癌组织中HPV16,18E6蛋白和P^21,P^53癌基因产物的免疫组化研究

采用ＳＰ免疫组化法对柳州地区４５例食管鳞状细胞癌和２５例食管粘膜慢性炎对照组材料进行ＨＰＶ１６,１８Ｅ６蛋白和Ｐ６２１ｒａｓ,Ｐ＾５３癌基因蛋白产物的检测。结果显示,癌组织中Ｅ６,Ｐ６２１ｒｑｓ和Ｐ＾５３阳性率分别为６６．４４％,８８．８９％和６２．２２％,与对照组相比差异十分显著。     

具有不同转移潜能的大鼠舌鳞癌细胞系分离鉴定

目的获得高转移舌鳞状细胞癌细胞,为建立高转移舌癌动物模型奠定基础。方法采用改良侵袭实验筛选出高低不同的转移潜能细胞。采用MTT实验和平板克隆实验检测两种细胞的克隆差异;采用侵袭实验和迁移实验检测两种细胞侵袭和迁移差异;采用流式细胞仪检测两种细胞生长周期的差异;采用Western Blot和Real-time PCR方法检测两种细胞Zeste基因增强子同源物2（EZH2）蛋白和mRNA表达差异。结果分离出两种不同转移潜能细胞。两种细胞的克隆形成、侵袭和迁移、细胞周期、EZH2蛋白和mRNA表达差异均有显著性（t=3．423～59．300,P〈0．05、0．01）。结论从舌鳞癌细胞系中分离得到了两种不同转移潜能的细胞亚群,且两种细胞具有不同的生物学特性。     

PTEN对鳞癌细胞的抑制作用及其在口腔白斑和鳞癌中的表达

目的：观察转染PTEN的鳞癌细胞的增殖情况及PTEN在口腔白斑及鳞癌中的表达,探讨PTEN基因在口腔鳞癌发展过程中的作用。方法：采用RT-PCR法从正常组织中扩增PTEN基因,构建真核表达载体pcDNA-PTEN,采用脂质体将pcDNA-PTEN转染人舌鳞癌（Tca8113）细胞系,MTT法观察转染前后细胞的增殖情况,流式细胞术检测PTEN基因转染后细胞各周期细胞所占比例。免疫组织化学技术检测口腔白斑（25例）和口腔鳞癌组织（32例）中PT
EN蛋白表达率。结果：成功构建pcDNA-PTEN载体,并获得阳性转染细胞。与空载体组相比,转染pcDNA-PTEN组的舌癌细胞系Tca8113细胞的生长抑制率具有显著性差异(P<0.01);与空载体组比较,转染PTEN基因的Tca8113细胞G0-G1期细胞数增多（P<0.01）, S期细胞减少（P<0.01）;PTEN在口腔鳞癌中表达减少或缺失,且与组织分化程度明显相关（P<0.05）。结论：PTEN的表达可抑制舌鳞癌细胞的生长;PETN在舌鳞癌发展过程中发挥抑癌作用。     

鼻腔鳞状细胞癌的增生活性与Ag-NOR有关

对38例鼻腔鳞状细胞癌,用银染色技术显示核仁组成区相关的嗜银蛋白(Ag-NOR),并在油镜下进行定量分析。结果显示Ⅲ、Ⅱ级鳞状细胞癌Ag-NOR 颗粒计数最高,Ⅰ级最低,提示Ag-NOR 颗粒多少与肿瘤恶性程度成正比。     

非小细胞肺癌组织中p33~(ING1)蛋白的表达及临床意义

目的:研究p33ING1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理特征的关系;探讨p33ING1在NSCLC发生、发展中的可能作用机制。方法:用免疫组化SP法检测p33ING1在40例NSCLC和10例正常肺组织中的表达。结果:p33ING1在NSCLC组织中阳性率(57.5%,23/40)低于正常肺组织(100.0%,10/10),两组有显著性差异(P<0.05)。p33ING1低表达与肺癌的分化程度、TNM分期及淋巴结转移均有关:p33ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组癌组织中的阳性表达率分别为76.2%(16/21)、36.8%(7/19),两组有显著性差异(P<0.05);在UICC的TNM分期~期、~期组病例中分别为69.0%(20/29)、27.3%(3/11)(P<0.05);在高、中、低分化组病例中分别为87.5%(7/8)、66.7%(12/18)和14.3%(2/14),其中高、低分化组间及中、低分化组间的阳性表达率均具有极显著差异(P<0.01)。p33ING1的表达与其他临床病理参数(患者性别、年龄、病理组织学类型等)不相关(P>0.05)。结论:p33ING1在NSCLC中低表达,它的低表达对判断NSCLC恶性程度、浸润甚至转移有重要价值。p33ING1蛋白的低表达在NSCLC的发生发展中可能起重要作用。     

FHIT蛋白和p21蛋白在外阴癌和外阴尖锐湿疣中表达的研究

目的：探讨脆性组氨酸三联体基因（FHIT）和p21蛋白在外阴癌、外阴尖锐湿疣及正常外阴组织中的表达及其意义。方法：采用免疫组化（SP）法检测49例外阴鳞癌,51例外阴尖锐湿疣及20例正常外阴组织中的FHIT、p21的表达。结果：FHIT蛋白、p21蛋白在外阴鳞癌组织和外阴尖锐湿疣组织中表达的阳性率明显低于正常组织（P〈0．0167）;FHIT蛋白、p21蛋白在外阴鳞癌组织和外阴尖锐湿疣组织中表达的阳性率差异无统计学意义（P〉0．0167）。外阴鳞癌中FHIT和p21蛋白的异常表达与外阴鳞癌的组织分化及有无淋巴结转移均无关（P〉0．05）。FHIT蛋白与p21蛋白的表达没有相关性（P〉0．05）。结论：①FHIT基因和p21基因异常表达与外阴鳞癌和外阴尖锐湿疣的发生发展有关,部分外阴尖锐湿疣有可能是外阴癌的前期病变;②FHIT基因在外阴癌发生发展中所起的作用可能与p21基因没有关系。     

食管鳞癌细胞中ESCCAL_1对蛋白激酶磷酸化的调节作用

目的探讨ESCCAL_1在食管鳞癌中发挥功能的可能机制。方法使用人磷酸化激酶阵列试剂盒检测ESCCAL_1敲减前后EC9706细胞中相关蛋白激酶磷酸化水平,对各蛋白条带进行灰度值定量分析。结果 KD组与NC组中FAK、JNK1、Src、AMPKα1等蛋白激酶的相对磷酸化水平比值分别为2.76∶1、2.20∶1、2.15∶1、2.01∶1,表达量明显降低(P<0.05)。结论 ESCCAL_1可能通过调节相关蛋白激酶的磷酸化水平调控EC9706细胞生长。     

膀胱癌组织中癌基因ras和C—erbB—2蛋白产物的免疫组织化学研究

采用免疫组织化学ＡＢＣ方法检测５６例膀胱癌组织中的癌基因ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物，有３０例和１９例分别呈ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达阳性，ｒａｓ表达在分化较高、表浅性和非复发性肿瘤中高于分化较差、浸润性和复发性，而Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达在高分级、浸润性和复发性肿瘤中较高。ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达与膀胱癌组织分级、临床分期和复发密切相关。     

ras癌基因产物P~(21)在肺癌中表达的研究进展

癌基因的发现,使肿瘤的研究进入一个崭新的纪元,到目前为止,已有50余种癌基因被分离和识别,其中在人类恶性肿瘤中的癌基因的研究较为深入,ras癌基因已在肺癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌得到证实。本文就ras癌基因及其产物P~(21)在肺癌中的应用进展作一扼要介绍。     

食管癌组织中 HPV 原位杂交及 E_6、P~(21ras)和 P~(53)免疫组化的研究

采用分子原位杂交和ＳＰ法免疫组化技术对柳州地区４０例食管鳞状细胞癌和２０例食管粘膜慢性炎的材料进行地高辛标记的ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ及ＨＰＶ１６、１８早期蛋白Ｅ６、Ｐ２１ｒａｓ和Ｐ５３癌基因产物检测，结果显示：食管癌中ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ及Ｅ６蛋白的阳性率分别为２５％（１０／４０）和６５％（２６／４０），与对照组对比差异均有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。Ｅ６、和Ｐ５３蛋白呈双阳性者为５２．５０％（２１／４０），其中９０．４８％（１９／２１）阳性表达出现在同一区域同一癌细胞核内，似表达Ｅ６、可与Ｐ５３结合形成复合物，从而导致野生型Ｐ５３的降解或突变。本组鳞癌组织中Ｐ２１ｒａｓ与Ｐ５３、Ｐ５３与Ｅ６的阳性表达均具有显著相关性（Ｐ＜０．０５）。提示高危ＨＰＶ１６、１８感染与多癌基因协同在本地区食管癌病因学中起着十分重要的作用。