生物膜结构对白色念珠菌的耐药性的影响

白色念珠菌生物膜是一种可黏附并生长于植入性生物医学材料具有高度耐药特性的膜样生物集落,可造成植入失败和持续的感染源,对患者产生不良的影响。这种耐药的机制十分复杂,迄今尚未完全查明,本文就其结构形态与耐药机制有关的研究近况作一综述。     

不同提取条件下对诃子中鞣质含量的影响

目的:测定诃子提取液中鞣质含量。比较不同提取条件对诃子中鞣质含量的影响。方法:络合法。结果:从诃子中提取鞣质的最佳条件是:用水作提取剂;诃子重(g):提取剂用量(ml)为1:25;在50℃左右水浴加热4小时;结论:本方法对鞣质的提取工艺具有原料来源充足,价格低廉,工艺简单,提取成本低的特点。     

不同煎煮方法对诃子中鞣质含量的影响

采用干酪素法测定诃子煎出液中鞣质含量,比较不同的煎煮方法的对诃子鞣质煎出率的影响。结果表明,其鞣质含量随着热水浸泡温度的升高,煎煮时间的延长而呈增长趋势。     

密度感应分子对白色念珠菌生物被膜形成作用的研究

目的:白色念珠菌生物被膜形成受密度感应分子调控,法尼醇和酪醇是白色念珠菌产生的两种密度感应分子?本研究探讨不同生物被膜时相,密度感应分子对白色念珠菌形态及生物被膜形成的作用?方法:体外构建白色念珠菌生物被膜?研究分为法尼醇处理组?酪醇处理组?法尼醇和酪醇联合处理组?对照组?首先采用XTT检测不同生物被膜时相酪醇和法尼醇对白色念珠菌细胞活力的作用?扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察酪醇和法尼醇对白色念珠菌生物被膜的作用?同时采用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC/MS)检测白色念珠菌生物被膜法尼醇的产生,高效液相色谱(high press liquid chromograph,HPLC)检测白色念珠菌生物被膜酪醇的产生?结果:XTT结果显示,与对照组比较,酪醇可促进6 h白色念珠菌生物膜活力(P < 0.05),法尼醇抑制早期(3 h和6 h)生物被膜活力(P < 0.05),联合作用组抑制6 h生物被膜活力(P < 0.001)?扫描电镜观察发现,酪醇促进3 h和6 h白色念珠菌细胞的出芽,法尼醇抑制3 h和6 h菌丝形成,两者联合作用以后者对菌丝形成的抑制作用为主?GC/MS及 HPLC结果表明在早期(3 h和6 h)生物被膜,2种密度感应分子产生少且无明显升高趋势(P > 0.05);随着生物被膜成熟(24 h及36 h),酪醇产生明显增多(P < 0.05),法尼醇产生也明显增多(P < 0.05)?24 h生物被膜产生酪醇最多,36 h 生物被膜产生法尼醇最多?结论:酪醇可以促进白色念珠菌出芽和菌丝伸长,促进早期生物被膜形成?法尼醇抑制出芽和菌丝形成,抑制早期生物被膜形成?两者联合作用以法尼醇对菌丝形成的抑制作用为主?     

厚朴煎剂对白色念珠菌及其生物膜影响的初步研究

目的 观察厚朴煎剂对白色念珠菌(Candida albicans)芽管形成、早期黏附基因及成熟期生物膜的影响。方法 采用芽管形成试验检测厚朴煎剂对白色念珠菌芽管形成的影响;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测厚朴煎剂作用后,凝集素样序列1(agglutinin-like sequencefamily1,ALS1)、ALS2、ALS3基因的表达情况;荧光显微镜及扫描电镜观察厚朴煎剂对白色念珠菌成熟期生物膜的影响;共聚焦显微镜观察厚朴煎剂对生物膜中菌活性的影响。结果 芽管形成试验结果显示,厚朴煎剂可抑制白色念珠菌的芽管形成且抑制作用具有浓度依赖性(P＜0.05)。厚朴煎剂能使ALS1、ALS2、ALS3基因表达下调且具有浓度依赖性(P＜0.05)。荧光显微镜下空白对照组生物膜以菌丝为主,厚朴煎剂作用24、48及72 h后生物膜结构被破坏。扫描电镜结果也提示厚朴煎剂可以破坏生物膜的结构。共聚焦显微镜下空白对照组白色念珠菌以活菌为主,15.625 mg/L厚朴煎剂作用48 h后死菌数量明显增加。结论 厚朴煎剂可通过下调ALS1、ALS2、ALS3基因抑制白色念珠菌早期黏附,同时可通过破坏成熟期生物膜的结构促进药物进入生物膜内抑制芽管形成和发挥杀菌作用。     

白色念珠菌生物膜的形成及其机制的研究进展

深部真菌感染较难治愈,且研究发现深部真菌多伴随有真菌生物膜的出现,影响深部真菌的治疗效果。了解生物膜形成过程的特点及其机制对治疗深部真菌感染具有重要意义。本文综述了白色念珠菌生物膜的形成及其分子生物学机制和耐药机制的最新进展,为白色念珠菌的研究及临床防治策略提供参考。     

白色念珠菌感染诱导人气道上皮细胞的损伤机制

目的探讨不同产膜能力白色念珠菌入侵后诱导人气道上皮细胞的免疫损伤机制。方法选择2019年6至12月宁夏医科大学总医院分离培养的25株白色念珠菌, 质控菌株SC5314为标准菌株。建立白色念珠菌生物膜体外模型, 利用结晶紫染色和酶标板法检测不同白色念珠菌的生物膜形成能力;采用酶标板法测定570 nm处的吸光度值(A570):A570≥0.5为强产膜菌(SBF), 0.25相似文献   

白色念珠菌对Ca试剂的影响

酶试剂的有效存贮时间与环境中的细菌污染有关( 1) ,是因为酶试剂中有大量有机成分可被细菌所利用。然而 ,我室在使用 Ca试剂的过程中也发生了类似情况 ,现报道如下。1　试剂与仪器1 . 1　试剂 :上海申能公司生产的液体单一试剂。1 . 2　仪器 :日立 71 70 A全自动生化分析仪 ,贝克曼 - 70 0半自动生化分析仪。2　实验与结果我室在使用全自动生化分析仪 71 70 A测定 Ca时 ,连续两次在做每日质控前的定标时 ,仪器报警提示超标 ,查看定标时的工作曲线 ,其试剂空白的吸光度为 1 . 32 7,标准液 浓度为 2 . 2 5mmol/L,吸光度为 1 . 8561 ,标准…     

白念珠菌IFD6基因高表达促进生物被膜形成

目的考察白念珠菌IFD6基因对生物被膜形成能力的影响。方法构建白念珠菌IFD6基因高表达质粒,将IFD6基因开放阅读框(ORF)置于pCaEXP高表达载体中MET3启动子的控制下,醋酸锂法转染白念珠菌CAI4,PCR鉴定IFD6基因的原位整合,real-timePCR筛选IFD6基因表达量明显升高的菌株。利用XTT法和激光共聚焦显微镜测定并观察IFD6基因高表达前后生物被膜形成能力的变化,利用细胞表面疏水性实验考察白念珠菌细胞表面疏水性的变化。结果通过酶切和测序验证IFD6基因高表达质粒构建正确;通过PCR验证IFD6基因高表达菌株构建正确,并通过real-timeRT-PCR筛选得到1株IFD6基因表达量相对较高的菌株。XTT法和激光共聚焦显微镜观察的结果一致显示IFD6基因高表达菌形成生物被膜的能力增强,细胞表面疏水性增加。结论 IFD6基因高表达能增加白念珠菌细胞表面疏水性,从而使白念珠菌生物被膜的形成能力增强。     

西青果丙酮及水提取物体外抗氧化活性初步研究

目的 探讨西青果丙酮提取物和水提取物在3种评价体系下的体外抗氧化活性.方法 采用福林酚比色法测定西青果丙酮提取物和水提取物的总酚含量;利用清除1,1-二.苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)评价法、还原法测定西青果两种溶剂提取物的抗氧化活性.结果 西青果丙酮提取物和水提取物总酚含量分别为(622.19±1.35)mg/g和(457.43±0.96) mg/g;两种溶剂提取物均表现出良好的抗氧化活性,对DPPH、ABTS自由基清除率的IC50值分别为8.427、19.575 μg/mL和20.273、33.064 μg/mL;对Fe3+均有一定的还原能力,其结果与浓度呈良好的量效关系,丙酮提取物还原效果最为明显.结论 西青果丙酮提取物和水提取物具有较强的抗氧化活性.     

药用植物诃子ISSR-PCR反应体系的建立与优化

目的 建立和优化药用植物诃子的ISSR-PCR反应体系.方法 以诃子叶片为实验材料,采用CTAB法提取诃子DNA为模板,通过单因素和双因素实验,研究诃子ISSR-PCR反应体系中DNA模板、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs等的用量,以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合诃子ISSR分析的反应体系...     

铜绿假单胞菌脂多糖对白色念珠菌生物膜的影响

目的研究铜绿假单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对白色念珠菌生物膜形成的抑制作用。方法甲基四氮盐[(2,3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide,XTT]减低法用于检测铜绿假单胞菌LPS对白色念珠菌生物膜形成不同阶段生成量的影响,同时,利用倒置显微镜观察生物膜形态学改变;实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测铜绿假单胞菌LPS对白色念珠菌生物膜菌丝特异基因(hypha specific genes,HSGs)表达的影响。结果铜绿假单胞菌LPS可以抑制白色念珠菌生物膜的形成,以及使菌丝特异基因HWP1、ALS1、ALS3、ECE1和SAP4的表达分别下调8.3~12.8、1.1~3.0、2.0~4.6、1.3~3.8和6.2~7.6倍。结论铜绿假单胞菌LPS可以通过抑制白色念珠菌菌丝的形成从而抑制其生物膜的形成。     

西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯含量测定及抗菌作用研究

目的 建立西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯含量的测定方法,并测定其对金黄色葡萄球菌(SA)的杀菌作用.方法 采用甲醇和0.2％磷酸水为流动相,检测波长276 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃.测定总鞣质及没食子酸乙酯对SA的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC);透射电镜探究其抗菌作用机制.结果 没食子酸和没食子酸乙酯线性范围分别为8 ～ 64 mg/L和14～110 mg/L,加样回收率分别为101.18％和100.04％,RSD分别为2.88％和3.59％.总鞣质和没食子酸乙酯对SA的MIC均为0.3125 g/L,MBC分别为1.250 g/L和0.625 g/L.结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好,能准确检测西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯的含量.西青果总鞣质与没食子酸的杀菌机制与改变细菌细胞膜形态有关.     

大蒜素对白假丝酵母菌生物被膜的抑制作用

目的：研究大蒜素对白假丝酵母菌生物被膜（BF）内真菌的抑制作用。方法用FITC-conA标记白假丝酵母菌BF的多糖成分,利用荧光显微镜从形态学上观察大蒜素对白假丝酵母菌BF形成过程的影响。将标本分为5组,分别是对照组（大蒜素浓度为0）、大蒜素0．25 mg/mL组、大蒜素0．5 mg/mL组,大蒜素1．0 mg/mL组、大蒜素2．0 mg/mL组。应用XT T减低法定量检测大蒜素对白假丝酵母菌BF中真菌的杀灭作用。结果在荧光显微镜下可见大蒜素2．0 mg/mL组大蒜素干预白假丝酵母菌BF后的荧光强度较大蒜素0．5 mg/mL组及对照组的荧光强度减弱。大蒜素0．5、1．0、2．0 mg/mL作用于白假丝酵母菌BF 5 h后,XT T减低法光密度（OD）450的值分别为1．87±0．31、1．64±0．25和1．30±0．29,分别与对照组的2．11±0．26比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）;0．25 mg/mL的大蒜素作用白假丝酵母菌BF后,OD450值为1．93±0．31,与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论大蒜素能杀灭白假丝酵母菌BF内的真菌,对BF有抑制作用。在一定浓度范围内,随着大蒜素浓度的增加,其对BF的抑制作用逐渐增强。     

盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌成熟生物膜的抑制作用及其形态学的影响

目的研究盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌(Candida albicans)成熟生物膜(biofilm,BF)的影响。方法用微孔板法建立体外白色假丝酵母菌ATCC 90028 BF模型;采用甲基四氮盐(the abated tetrazolium salt,XTT)减低法定量评价盐酸氨溴索对白色假丝酵母菌成熟BF的抑制作用;银染后,倒置显微镜下观察该药对白色假丝酵母菌成熟BF的形态学影响。结果在96孔微量细胞培养板上成功建立白色假丝酵母菌BF模型;1.25、2.5、5、7.5 mg/ml的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF 12 h后,XTT减低法D(450)值分别为(0.63±0.05)、(0.52±0.08)、(0.31±0.05)和(0.11±0.03),分别与空白对照组(0.71±0.07)比较,差异有显著性(P<0.05);0.625 mg/ml的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF后,D(450)值为(0.67±0.04),与空白对照组比较,差异无显著性(P>0.05);不同浓度的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF,组间比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌成熟...     

去甲亚精胺对白色念珠菌生物膜形成的抑制作用

目的：研究去甲亚精胺对白色念珠菌生物膜形成的作用及可能的机制。方法：通过结晶紫染色、甲基四氮盐（XTT）检测、菌落形成单位（CFU）计数、扫描电镜（SEM）成像和qRT-PCR分别检测或观察去甲亚精胺对白色念珠菌生物膜生物量、代谢活性、菌落数、真菌形态和毒力相关基因表达的影响。结果：结晶紫染色结果显示不同浓度去甲亚精胺对白色念珠菌生物膜形成的抑制作用不同;XTT检测结果表明去甲亚精胺能显著抑制白色念珠菌生物膜的代谢活性;CFU计数结果显示去甲亚精胺能显著减少生物膜中白色念珠菌的菌落数;SEM结果显示去甲亚精胺能显著抑制生物膜形成,高浓度的去甲亚精胺能促进酵母相形成;qRT-PCR结果显示去甲亚精胺能显著抑制白色念珠菌毒力相关基因hwp、als3、csh1的表达。结论：去甲亚精胺能显著抑制白色念珠菌生物膜形成的作用并抑制毒力基因的表达,是一种潜在的抑制白色念珠菌生物膜的多胺类药物。     

基于厚朴酚对白色念珠菌黏附性及其生物膜形成的影响探讨其抗龋作用

目的 观察厚朴酚对白色念珠菌黏附性及生物膜形成的影响,以探讨其能否用于治疗白色念珠菌相关龋病。方法 运用微孔板法复制白色念珠菌体外黏附及生物膜模型,采用XTT〔2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide〕减低法评价不同浓度厚朴酚对白色念珠菌黏附、生物膜形成的影响。结果 厚朴酚对白色念珠菌的黏附具有抑制作用,其作用具有时间及浓度依赖性,62.5 mg/L和125 mg/L厚朴酚可以显著的抑制白色念珠菌的黏附,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P < 0.05);实验所选5个浓度的厚朴酚对白色念珠菌的生物膜均有不同程度的抑制作用,其中125 mg/L厚朴酚对生物膜的抑制率达到66.32%。结论 厚朴酚可通过抑制白色念珠菌的黏附而有效降低其致病性,并对已形成的生物膜具有明显的抑制作用,提示其作为抗龋药物有良好的应用前景。