银耳多糖提取工艺的研究

本文探讨了银耳子实体多糖的提取方法。实验结果表明,复水完全的子实体经机械粉碎、超声波处理后热水浸提的提取方法,能显著提高银耳多糖的浸提率,缩短浸提时间,浸提率比酶法浸提得率的16.3％高出4.693％。     

银耳多糖提取工艺的研究

本文探讨了银耳子实体多糖的提取方法。实验结果表明，复水完全的子实体经机械粉碎、超声波处理后热水浸提的提取方法，能显著提高银耳多糖的浸提率，缩短浸提时间，浸提率比酶法浸提得率的１６．３％高出４．６９３％。     

银耳多糖湿法打浆快速提取工艺的研究

以银耳子实体为原料,研究湿法打浆快速提取银耳多糖的工艺条件。以银耳多糖提取率为评价指标,考察料液比、打浆时间、加水温度3个影响因素对银耳多糖提取率的影响,并通过正交试验,确定出最佳提取条件。使用凝胶渗透色谱法(GPC)测定银耳多糖的分子量。结果表明:最佳优化条件为料液比1∶50(g∶m L),打浆时间7min,加水温度为80℃,在此最佳条件下银耳粗多糖的提取率可达40.57%,是传统热水浸提法多糖提取率的2.2倍,提取时间仅为传统热水浸提的1/60。湿法打浆快速提取法和热水浸提法所制备的银耳多糖的平均分子量分别为5.89×10~4KDa和5.86×10~4KDa。     

银耳芽孢多糖提取方法的研究

采用六种方法提取液体培养的银耳芽孢中的多糖。结果显示应用复合酶结合热水浸提法多糖提取率最高,是最佳的提取方法。通过正交实验,确定了复合酶的最佳反应条件为:复合酶用量为1%,酶解时间为6h,酶解pH6.0,酶解温度为45℃。在此条件下,多糖提取率高达29%。     

银耳芽孢多糖提取方法的研究

采用六种方法提取液体培养的银耳芽孢中的多糖。结果显示应用复合酶结合热水浸提法多糖提取率最高,是最佳的提取方法。通过正交实验,确定了复合酶的最佳反应条件为:复合酶用量为1%,酶解时间为6h,酶解pH6.0,酶解温度为45℃。在此条件下,多糖提取率高达29%。      

酶法提取大枣多糖的研究

比较了大枣多糖的多种提取方法。结果表明,复合酶法为最佳提取方法,即调pH=7,先加胰蛋白酶3％,65℃水温浸1.5h,再加木瓜蛋白酶2.5％,55℃温浸1h。      

银耳多糖分离提取工艺的优化研究

银耳多糖是银耳中的主要生物活性物质之一,可由银耳子实体、孢子及发酵液中分离、纯化后获得。大量研究表明,银耳多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血脂和降血糖等多种生理活性。采用超声辅助热水浸提法来提取银耳多糖,通过单因素及正交试验优化料液比、浸提温度、浸提时间和浸提液pH值,得出银耳多糖的提取工艺条件为:料液比1∶50(g/mL),浸提温度80℃,浸提时间4.5 h,pH 10,银耳多糖得率最高,为(16.25±0.37)%。方差分析结果表明料液比对银耳多糖得率具有显著性影响(p<0.10)。     

超声波辅助酶法提取北五味子多糖工艺研究

建立了超声波辅助复合酶(纤维素酶/蛋白酶/果胶酶=1∶1∶1)提取北五味子多糖的方法。以多糖的提取率为研究指标,通过设计正交试验和响应面优化试验,对超声波辅助复合酶法提取北五味子多糖的工艺进行了优化。确定最佳工艺条件为酶解温度45℃,缓冲液pH 4.6,复合酶用量2%,酶解时间为2.0h,超声波功率166W,萃取温度56℃,萃取时间39 min。在此最佳条件下,北五味子多糖提取量达到105.36mg/g。超声波辅助复合酶法应用到多糖的提取领域,节省了时间,降低了溶剂消耗,且明显提高了多糖的提取率,该法操作方便,简单易行,为北五味子多糖工业化生产提取提供了理论依据。     

响应面优化酶法提取茯苓多糖工艺

以茯苓水提后残渣为原料,研究酶法提取茯苓多糖的最优工艺.以多糖提取率为考察指标,筛选木聚糖酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶及以上三种复合酶(质量比为1:1:1)对茯苓多糖提取率的影响,以温度、pH、时间、酶的添加量为考察因素,采用响应面分析法优化提取工艺.结果表明,复合酶相较木聚糖酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶,可显著提高茯苓多糖提...     

碱溶性银耳多糖硫酸酯化的研究

采用化学修饰法,对碱溶性银耳多糖进行硫酸酯化。并研究了不同反应条件对其酯化度和水溶解度的影响。随着反应温度的升高,其取代度和水溶性也逐渐增大,当反应温度达为90℃时,取代度达到最大为1.19,水溶解度为38.33 mg/mL。通过紫外光谱和红外光谱检测,说明在碱溶性银耳多糖的糖残基单元上成功地引入了硫酸基团。     

银耳多糖结构与生物活性研究进展

银耳多糖主要是以α-(1 → 3)-D- 甘露糖为主链的杂多糖,具有多种生物学活性,本文对不同来源的银耳多糖的结构特征,免疫调节、抗肿瘤、抗氧化衰老、降血糖血脂等功效及其构效关系方面的国内外研究现状进行综述,并提出进一步的研究方向。     

液体深层发酵条件对银耳菌丝体酸性多糖富集的影响

考察液体发酵培养基中不同碳源、碳源用量以及培养基pH 值对银耳菌丝体富集酸性多糖的影响。结果表明：1% 的蔗糖、pH 值为7.0 的培养基有利于银耳菌丝体酸性多糖的富集。并对所得银耳多糖进行DEAE-sepherosefast flow 柱层析,发现菌丝体与子实体相比,多糖组成发生显著改变。     

银耳多糖乙酰化修饰及其抗氧化活性

以银耳多糖为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化银耳多糖,以乙酰化取代度为指标,探讨反应的时间、温度和乙酸酐用量对取代度的影响,在单因素的基础上,采用响应面法对银耳多糖乙酰化工艺进行优化,并研究乙酰化修饰前后银耳多糖的抗氧化活性。结果表明:银耳多糖乙酰化修饰最佳工艺条件为反应时间2.37h,反应温度61.04℃,乙酸酐用量为2.89mL,在该最佳修饰工艺条件下,乙酰化银耳多糖取代度为0.39。抗氧化研究表明:与未修饰银耳多糖相比,乙酰化银耳多糖对DPPH自由基的清除能力有所增强,对·OH和O2-·的清除能力减弱。     

银耳干品的DNA提取及随机扩增多态性分析

银耳子实体中因含有大量的多糖和蛋白质,严重干扰其基因组DNA的提取。本实验建立一种银耳干品（子实体）中DNA的提取方法,利用此法可直接以银耳干品为材料提取DNA,不需芽孢分离和菌丝培养步骤,而且DNA产量高、质量好,可用于随机扩增多态性（random amplified polymorphic,RAPD）DNA分析。RAPD分析的结果显示,本实验所选取的银耳样品间存在DNA多态性。研究结果将有助于当前食品分析检测中直接以银耳干品为材料进行DNA提取及品种鉴别等分析工作。     

银耳多糖抑制鲜湿面水分迁移及改善黏连的作用

通过不同银耳多糖添加量对鲜湿面的粉质特性及质构特性的品质评价以及傅里叶变换红外光谱、低场核磁共振、动态流变学分析和激光共聚焦显微镜等微观结构分析,探究银耳多糖与鲜湿面水分迁移及抑制黏连的量效关系。结果表明：添加银耳多糖的鲜湿面具有较低的表观黏性,且多糖可抑制自由水的迁移,致使水分分布发生变化。与未添加银耳多糖鲜湿面相比,添加0.5%银耳多糖的鲜湿面的α-螺旋的相对含量增加了9.96%,β-转角的相对含量降低了7.11%;面筋蛋白有序性增强,且微观结构较为紧密,淀粉颗粒暴露较少,使鲜湿面持水性更佳,进而贮藏期间更加稳定。通过热特性、动态流变学特性分析结果均可证明,银耳多糖能够促进鲜湿面形成均匀、有序稳定的面筋网络结构。其中添加0.5%银耳多糖对抑制鲜湿面贮藏期间水分迁移,改善黏连的效果最好。     

银耳芽孢总蛋白提取方法的建立

采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris）-饱和酚法、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法提取银耳芽孢总蛋白的效果。结果表明：高压均质的细胞破碎效果优于超声波,3 种方法所得到的银耳芽孢总蛋白质量浓度分别为2.33、1.26、1.02 mg/mL,且Tris-饱和酚法经传统考马斯亮蓝染色法染色所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法。因此,Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法。     

银耳芽孢基因组DNA五种提取方法的比较

采用酚仿法、CTAB法、蛋白酶K法、氯化苄法和盐析法五种方法分别提取银耳芽孢基因组DNA,用吸光度估计DNA的纯度和得率、RAPD(随机扩增多态DNA)技术和限制性内切酶酶切反应评价DNA的质量.结果表明:五种方法所提的DNA纯度及产率有差别,氯化苄法和蛋白酶K法的产率要高于另外三种方法,但CTAB法所提DNA纯度最高.综合而言,CTAB法是五种方法中最为适合银耳芽孢基因组DNA提取的方法.     

微波辅助提取银耳多糖工艺优化及其流变、凝胶特性

优化微波辅助提取银耳多糖工艺,并研究银耳多糖的流变特性及凝胶特性。利用单因素试验和正交试验确定最佳提取条件为液料比50∶1（mL/g）、粒度120 目、微波功率400 W、微波时间2.0 h,此条件下银耳多糖的提取率达到（33.25±0.14）%。傅里叶变换红外光谱和流变性质测定结果表明,银耳多糖是一种独特的酸性杂多糖,多糖溶液表现出假塑性流体的性质,随着角频率的增加,动态模量增加,银耳多糖溶液在高频区域可形成弱凝胶结构。通过质构测定表明银耳多糖质量浓度显著影响银耳多糖凝胶的硬度及弹性。流变学测试和质构分析表明,银耳多糖具有良好的流变特性和凝胶特性,可替代部分胶体在食品中的使用。     

银耳芽孢和菌丝的转录组分析

采用RNA-Seq技术对银耳菌丝M1332及其2个单核亲本芽孢Y13、Y32进行转录组测序,通过测序共获得13.16G数据,从头(de novo)拼接后得到16 190个基因(Unigene)。利用NCBI的NR、COG、GO、KEGG等常用数据库对组装的Unigene进行同源性预测:NR数据库中的序列同源性比较表明,55.75%的Unigene比对到金黄银耳,13.35%比对到新型隐球酵母;与COG数据库进行比对得到7 203个Unigene,根据其功能大致可分为25类;有3 921个Unigene在GO数据库中注释到,分为生物学过程、细胞组分和分子功能3大类46个分支。差异表达基因的KEGG富集分析结果表明,差异基因富集在氨基糖和核酸糖的代谢、氨基酸代谢、细胞内噬等代谢通路。