miR-452在肾透明细胞癌中的异常表达研究

目的检测miR-452在肾透明细胞癌组织中的表达差异,探讨miR-452在肾癌发生过程中的作用。方法提取20例肾透明细胞癌及其相应癌旁组织的总RNAs,通过逆转录(RT)方法获得cDNA后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织中miR-452的表达差异,并分析其与肾癌患者临床病理特征的关系。结果与相应的癌旁组织相比,miR-452在肾透明细胞癌组织中显著高表达,癌组织较癌旁组织升高约4.69倍,但其异常表达与肾癌患者临床病理特征并无显著相关性。结论 miR-452在肾透明细胞癌组织中明显高表达,其可能作为重要的致癌基因参与了肾癌的发生与发展过程,可能成为潜在的肾癌标志物,为肾癌的早期诊断及治疗提供新靶点。     

肾癌中miR-210的异常表达及意义

目的探讨miR-210在肾细胞癌发生过程中的作用。方法利用荧光定量PCR技术检测miR-210在52例不同阶段肾细胞癌及其癌旁组织中的表达量,并分析其与肾癌患者病理分期、年龄、性别的相关性。结果与相应癌旁组织相比,miR-210在肾癌组织中表达量显著上调(P=0.00),平均上调倍数为7倍。但miR-210上调倍数与肾细胞癌癌的病理分型、分期、年龄、性别均无显著相关。结论 miR-210在肾癌组织中表达明显上调,对肾癌的诊断和治疗具有潜在的意义。     

miR-122和miR-144-3p在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨miR-122和miR-144-3p在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法使用实时荧光定量PCR技术检测46例肾细胞癌患者癌组织与癌旁组织中miR-122和miR-144-3p的表达情况,比较二者在癌组织与癌旁组织中的差异。以肾细胞癌组织中miR-122、miR-144-3p的表达水平平均值作为分界,将46例患者分为miR-122低表达和miR-122高表达、miR-144-3p低表达和miR-144-3p高表达,并分析不同年龄、性别、临床病理特征患者中miR-122和miR-144-3p的表达情况。结果 miR-122和miR-144-3p在肾细胞癌患者癌组织中的相对表达水平均明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。不同年龄、性别患者miR-122、miR-144-3p低表达百分率分别与miR-122、miR-144-3p高表达百分率比较,差异无统计学意义(P0.05)。不同TNM分期、临床分期患者miR-122、miR-144-3p低表达百分率分别与miR-122、miR-144-3p高表达百分率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 miR-122和miR-144-3p在不同TNM分期、临床分期的肾细胞癌患者中表达存在差异,可能在肾细胞癌发生、发展中起重要作用。     

非小细胞肺癌患者癌组织和血浆中microRNA-21的表达及意义

目的探讨microRNA-21(miRNA-21,miR-21)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织和血浆中的表达及临床意义。方法用荧光定量PCR检测100例NSCLC患者肺癌组织及癌旁组织miR-21的相对表达量,并检测100例NSCLC患者及100例健康人血浆miR-21的相对表达量,用t检验比较其表达水平的差异,用卡方检验分析肺癌组织miR-21表达量与各临床病理资料之间的关系,ROC曲线评价miR-21对NSCLC的诊断价值。结果 miR-21在肺癌组织的表达水平高于癌旁组织(t=10.154,P0.05),且在NSCLC患者血浆中的表达水平高于健康人(t=13.444,P0.05);肺癌组织中miR-21高表达患者肺癌复发转移率明显高于低表达患者(χ2=11.335,P0.05);生存分析显示,肺癌组织或血浆中miR-21高表达患者较低表达者生存期明显缩短(χ2为6.685和5.692,P0.05);ROC曲线表明,miR-21对NSCLC诊断价值中等。结论 miR-21在NSCLC患者癌组织及血浆中均有高表达,肺癌组织miR-21高表达与NSCLC复发转移具有密切关系,可作为NSCLC诊断及评价预后的指标。     

miR-21和miR-93表达水平与三阴性乳腺癌发生发展的相关性研究

目的探讨miR-21和miR-93的表达水平与三阴性乳腺癌(TNBC)发生发展的相关性。方法选择行乳腺癌根治术的女性患者86例,收集癌组织与正常乳腺组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21和miR-93的相对表达量,并分析其与临床病理特征的相关性。结果 miR-21和miR-93在TNBC组织中相对表达量高于癌旁组织;TNBC组织中,miR21高表达54例,占62.79%,miR-93高表达50例,占58.14%;miR-21和miR-93在肿瘤直径5 cm、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期以及淋巴结转移的患者中高表达率显著增高(P0.01);miR-21和miR-93的表达水平与患者年龄、月经状态、病理分级无明显相关性。癌组织中miR-21与miR-93表达水平呈显著正相关(r=0.761,P0.01)。结论 miR-21与miR-93在TNBC中表达异常增高,且与肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移有关,可作为TNBC诊断及判断预后的辅助指标。     

miR-886-3p在肾癌组织及癌旁组织中差异表达及其临床意义

目的分析miR-886-3p在肾细胞癌与相应癌旁正常组织中的表达情况,为进一步研究miR-886-3p在肾癌发生发展中的作用奠定基础,并初步探讨其临床意义。方法收集48例肾癌手术患者癌组织和癌旁正常组织标本,分别提取组织中的总RNAs,通过逆转录获得cDNA,实时定量PCR法分析miR-886-3p在肾癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其表达量与患者临床病理各指标之间的相关性。结果与相应癌旁正常组织对比,miR-886-3p在肾癌组织中存在显著高表达,48例标本中,有35例(72.92%)miR-886-3p表达上调,13例(27.08%)表达下调,差异有统计学意义(P=0.000),平均升高5.125倍。但miR-886-3p的表达水平与肾癌患者年龄、性别、病理类型、临床TNM分期(主要为T1N0M0和T2N0M0期)没有关系(P>0.05)。结论 miR-886-3p在肾癌组织中存在显著高表达,提示它可能与肾癌的发生与进展有关,可能成为指导肾癌诊断、治疗乃至预后判断的新的生物标志物。     

Caspase-3和E-cadherin在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Caspase-3和E-cadherin在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义.方法 75例肾透明细胞癌标本、癌旁标本以及18例正常肾组织采用免疫组化检测Caspase-3和E-cadherin的表达情况.结果 Caspace-3在肾透明细胞癌的阳性表达明显低于正常肾组织和癌旁组织(P＜0.01),随着肾细胞癌病理分级的升高,Caspase-3的阳性表达率降低,临床分期的升高,Caspase-3的阳性表达率增高,但差异无统计学意义(P＞0.05).E-cadherin在肾透明细胞癌的阳性表达明显低于正常肾组织和癌旁组织(P＜0.05或P＜0.01),在癌旁组织表达低于正常肾组织(P＜0.05),其表达与病理分级和临床分期相关(P＜0.05).二者在有淋巴结转移组中的表达低于无转移组(P＜0.05).二者表达呈正相关(r=0.4352,P=0.0002).结论 Caspase-3及E-cadherin在肾透明细胞癌中的异常表达,可能在肾细胞癌的生长、分化中发挥重要作用,可以考虑作为判定肾癌生物学行为的辅助诊断指标.     

肾细胞癌中Wif-1基因的甲基化状态及表达

目的检测肾细胞癌(RCC)中Wnt抑制因子-1(Wif-1)基因的甲基化状态及表达水平,探讨其在肾细胞癌发生发展中的可能机制。方法分别应用甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测56例肾细胞癌及相应癌旁正常肾组织中Wif-1基因的甲基化状态及表达水平。结果 Wif-1基因在RCC组织中的甲基化率显著高于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。Wif-1基因在RCC组织中的相对表达量显著低于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。在RCC组织中,Wif-1基因甲基化阳性组mRNA的相对表达量与甲基化阴性组mRNA的相对表达量比较无显著差异(P>0.05)。结论 Wif-1基因启动子区的高甲基化在肾细胞癌的发生中是一个频发事件。     

miR-200a和YAP1在肺癌的不同表达及病理学意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-200a与Yes相关蛋白1(YAP1)表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床病理意义。方法回顾性选取259例非小细胞肺癌患者术后切除的肿瘤组织及癌旁组织为本次研究对象,采用RT-PCR方法检测并比较患者的miR-200a与YAP1表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床病理意义。结果所选患者中miR-200a及YAP1在非小细胞肺癌中表达量显示,miR-200a与YAP1的表达量在病理类型、浸润深度、肿瘤分级、肿瘤数目中的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-200a与YAP1的表达量在肿瘤分化程度、淋巴结转移的比较中,差异有统计学意义(P<0.05)。所选患者中miR-200a、YAP1在非小细胞肺癌组织表达量比癌旁组织较高,其中,YAP1的非小细胞肺癌组织表达量水平明显高于miR-200a的表达量水平,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-200a、YAP1对非小细胞肺癌ROC曲线显示,miR-200a的ROC曲线下面积0.689比YAP1的0.666大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200a、YAP1表达量水平与非小细胞肺癌临床病理严重程度呈正相关,对非小细胞肺癌诊断有一定预测价值。     

胃癌组织miR155的表达及其与临床预后的关系

目的:探讨胃癌组织miR-155的表达水平及其临床意义。方法:收集手术切除的胃癌标本116例,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌及癌旁组织miR-155的表达水平,分析其与临床病理的关系及对临床预后的影响。采用免疫组织化学法检测癌组织中PTEN的表达,分析其表达与miR-155的相关性。结果:胃癌组织miR-155表达高于配对癌旁组织,差异有统计学意义(P0.001);miR-155高表达与肿瘤TNM分期、侵犯层次、淋巴结转移有关(P0.05)。K-M曲线分析表明,miR-155高表达预示着较低的3年无病进展率(P0.001)及总生存率(P0.001)。PTEN表达与miR-155负相关,miR-155高表达患者PTEN表达低(P0.001)。结论:miR-155与胃癌发生发展密切相关,可能是胃癌潜在的临床诊断及预后指标。     

miR-16在肾癌中表达和临床意义的研究

目的检测肾癌组织及癌旁正常组织中miR-16的表达,分析miR-16表达水平与临床病理特征之间的关系,为深入研究miR-16在肾癌的发生发展中功能作用奠定基础。方法在标本库中随机挑选48例手术切除的肾癌及配对癌旁组织标本,提取总RNA并通过反转录获得cDNA,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测标本中miR-16表达量,统计学分析其表达量与患者临床病理特征间的联系。结果 48对标本中41例(85.42%)肾癌标本miR-16表达上调,统计学分析证实肾癌组织中miR-16表达量明显高于配对的癌旁正常组织(P<0.01)。肾癌中miR-16表达量与患者性别、年龄、肾癌组织类型、TNM分期、AJCC临床分期无明显相关(P>0.05)。结论 miR-16在肾癌标本中明显表达上调,提示其可能与肾癌的发生发展有关。     

CDH11基因在肾细胞癌中的甲基化状态及其临床意义研究

目的检测CDH11基因启动子在肾癌中的甲基化情况,并分析甲基化与临床病理特征的关系。方法通过甲基化特异性PCR（MSP）检测CDH11基因在5株肾细胞癌细胞系、1株正常肾细胞系、46例肾细胞癌组织、23例癌旁肾组织,以及10例非肾实质肿瘤正常。肾组织中的甲基化状态。将甲基化情况与患者I临床资料联系,进行统计学分析。结果CDH11在5株肾癌细胞系中,有3株出现甲基化,甲基化率为60％;在人正常肾细胞系中未检测到甲基化。CDH11在肾癌组织中的甲基化率为45．7％（21／46）,显著高于癌旁肾组织（26．1％,6／23）及非肾实质肿瘤正常肾组织（0,（3／10）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。肾细胞癌各分期间及各分级间,癌组织中CDH11基因甲基化检出率无统计学意义（P〉0．05）;左侧肾癌与右侧肾癌相比,癌组织CDH11基因甲基化率差异无统计学意义（P〉0．05）;男性肾癌患者与女性肾癌患者相比,肾癌组织中CDH1基因甲基化率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肾细胞癌组织中CDH11基因甲基化率显著高于癌旁正常肾组织及非肾实质肿瘤正常肾组织,且癌组织中CDH11基因甲基化率与临床病理资料如肿瘤分期及分级无显著相关性,提示CDH11基因甲基化是。肾细胞癌发生中的早期频发事件,可能是。肾细胞癌独特的基因甲基化谱成员之一,并在肾细胞癌的早期诊断上发挥作用。     

肾细胞癌中Mina 53的表达及其与临床病理及预后的关系

目的探讨肾细胞癌组织中Mina53的表达水平及其与临床病理及预后的关系。方法采用RT-PCR技术测定96例肾细胞癌组织及20例癌旁正常肾组织中Mina53的表达,免疫组化法测定其蛋白水平的表达,分析其结果与临床病理及预后的关系。结果 Mina53平均模板量在肾细胞癌组织中的表达明显高于正常肾组织的表达（P〈0.01）,且在Ⅲ期、Ⅳ期肾细胞癌组织中的表达明显高于Ⅰ期、Ⅱ期的表达水平（P〈0.01）,Mina53蛋白在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于其在正常肾组织的表达水平（P〈0.01）;Mina53高表达者的预后较低表达者明显要差（P〈0.01）。结论 Mina53基因及蛋白的高表达与肾细胞癌临床病理分期有关,其表达水平越高,预后越差,Mina53有望成为预后判断的新指标。     

microRNA-152在胃癌中表达及与临床病理间关系研究

目的探讨microRNA152（miR152）在胃癌中的表达及其与临床病理特衙间关系。方法采用实时荧光定量PCR法检测70例胃癌组织及其相应癌旁正常组织中miR152表达水平,分析其与患者临床病理指标间关系。结果58例（82．9％）胃癌组织中miR-152表达下调;胃癌组织miR-152表达水平（△CT=5．30±1．47）低于癌旁正常组织（△CT=3．87±1．79）（P〈0．01）;胃癌组织中miR152低表达在肿瘤浸润深度、有无淋巴转移及TNM分期上差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miRNA152在胃癌组织中表达明显下调,可促进胃癌发生、发展,可能成为胃癌诊断与治疗的重要生物学标志物。     

肾细胞癌与良性肾肿瘤组织微血管密度和血管内皮细胞生长因子表达的对比研究

目的：通过检测肾细胞癌、肾脏良性肿瘤标本中的微血管密度（MVD）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达情况,研究不同性质肾脏肿瘤血管生成的差异。方法：肾细胞癌标本39例,良性肾脏肿瘤标本12例。采用“热点（hotpoint）”法计数MVD,VEGF的定量标准为VEGF染色强度与阳性细胞百分比分值的乘积。结果：MVD、VEGF在肾细胞癌和良性肾脏肿瘤均有表达。肾细胞癌组织MVD（18．3±6．9）计数／视野,VEGF乘积值3．63±2．5（×400）,转移者MVD和VEGF乘积值分别为（26．2±7．8）计数／视野、5．83±2．4,未转移者MVD和VEGF乘积值分别为（14．4±4．6）计数／视野、2．06±2．7;12例良性肾脏肿瘤MVD为（2．5±1．3）计数／视野,VEGF乘积值为0．32±0．2。肾细胞癌组织MVD和VEGF表达显著高于良性肾肿瘤（P〈0．01）,转移组肾细胞癌MVD和VEGF表达显著高于未转移组（P〈0．01）;肾细胞癌组织MVD与VEGF统计学上呈正相关（r=0．684,P〈0．001）。结论：肾细胞癌MVD及VEGF表达均显著高于良性肾脏肿瘤,提示不同性质的肾脏肿瘤其血管生成情况不同．转移肾细胞癌血管生成水平亦高于未转移肾细胞癌,提示血管生成与肾细胞癌转移相关,肾细胞癌组织MVD和VEGF表达水平呈正相关     

MicroRNA-199a-3p在肾癌中的表达及作用

目的检测microRNA-199a-3p（miR-199a-3p）在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-199a-3p后,通过CCK-8、克隆形成、Transwell以及细胞周期检测来探究其在肾癌细胞中的作用。结果 miR-199a-3p在肾癌细胞中明显低表达,在78%（14/18）的肾癌组织中亦明显低表达;上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞的增殖、存活和侵袭并能诱导细胞周期G1期阻滞。结论我们的研究显示在肾癌中miR-199a-3p明显低表达并参与肾癌的发生、发展,这表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断和治疗靶点的潜能。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

miR-21在弥漫大B细胞淋巴瘤肿瘤组织中的表达及临床意义

本研究旨在检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者肿瘤石蜡组织中miR-21的差异性表达与PTEN相关性及其临床意义。采用Real-time-PCR方法检测26例DLBCL患者及10名正常对照的miR-21表达,应用聚合物免疫组化检测系统检测PTEN蛋白水平。结果表明,26例DLBCL石蜡组织中miR-21的表达量为6．586（1．10,38．22）,显著高于正常对照[0．791（0．35,2．87）]（P〈0．05）,在26例DLBCL中有6例PTEN蛋白（23％）阳性,而在20例（77％）中为阴性。DLBCL中miR-2l表达水平与PTEN蛋白水平呈负相关,其高表达与DLBCL血清LDH水平呈正相关、Ⅲ／Ⅳ期患者miR-21表达水平明显高于Ⅰ／Ⅱ期患者（P〈0．05）,与临床亚型无关（P〉0．05）。结论：在DLBCL中miR-21表达升高可能提示肿瘤恶性程度高,预后不良,PTEN可能是miR-21的靶基因。