泮托拉唑对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡的影响

目的 探讨泮托拉唑对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡的影响及相关机制.方法 采用0、10、20、40 μg/ml的泮托拉唑处理MKN-45细胞48 h;MTT法检测细胞活力;Hoechst染色检测细胞形态;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及Cyclin E表达.结果 与0 μg/ml比较,10、20、40 μg/ml的泮托拉唑能明显降低MKN-45细胞活力(P﹤0.01),使细胞核发白,皱染,使细胞周期阻滞在G1期(P﹤0.01),下调Cyclin D1及Cyclin E的表达(P﹤0.01);与0 μg/ml比较,20、40 μg/ml的泮托拉唑能明显下调MKN-45细胞中Bcl-2的表达(P﹤0.01),上调Bax的表达(P﹤0.01).结论 泮托拉唑通过调控细胞周期蛋白及细胞凋亡相关蛋白表达抑制胃癌细胞MKN-45的增殖,并诱导细胞凋亡.     

丹参酮Ⅰ抗肿瘤作用及作用机制的实验研究

目的通过丹参酮Ⅰ(tanshinone Ⅰ)对肿瘤细胞的体内外实验研究,探讨丹参酮Ⅰ抗肿瘤作用及作用机制.方法人肝癌细胞(HepG2)培养液中加入不同浓度的丹参酮Ⅰ,培养72小时,观察HepG2细胞的增殖率;倒置显微镜下观察HepG2细胞的形态变化;流式细胞仪(FCM)检测HepG2细胞周期及凋亡率;免疫组化检测HepG2细胞的增殖凋亡调控相关基因(Bax、Bcl-2)的蛋白表达.用HepG2细胞制作Balb/c裸鼠荷瘤模型,每天腹腔注射丹参酮Ⅰ 1次连续10天,观察抑瘤率.结果丹参酮Ⅰ抑制HepG2细胞生长;阻滞HepG2细胞周期于G0/G1期并诱导细胞凋亡;通过下调Bcl-2基因表达(P＜0.01),上调Bax基因表达(P＜0.01)诱导HepG2细胞凋亡;抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长,抑瘤率为33.3%.结论丹参酮Ⅰ具有抗肿瘤活性,其作用机制之一是诱导细胞凋亡.     

Apoptotic effect and regulatory mechanism of 1, 4-benzoquinone on HELF cells

目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制.方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L pBQ处理HELF细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测PBQ对HELF细胞增殖的抑制作用,以PI单染法检测细胞周期的改变,用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,以实时荧光PCR法检测Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平的改变.结果:与对照组相比,不同PBQ染毒浓度下作用24 h后,随PBQ浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(P＜0.05),G0/G1期细胞下降(在40和60μmol/L时,P＜0.05),S期细胞增加(P＜0.05),以40 μmol/L PBQ浓度作用于HELF细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和S期细胞均下降(P＜0.05),而G0/G1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(P＜0.05)；当染毒浓度大于20 μmol/L时,染毒24 h可诱导HELF细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；不同浓度的PBQ染毒24h,细胞的Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平均上调.40μmol/L PBQ作用不同时间后,Bax、p53 mRNA水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(P均＜0.05); Bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72 h时与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；Bax/Bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:PBQ能抑制HELF细胞增殖,影响HELF细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值的上升,及p53 mRNA表达的上调有关.     

共轭三烯酸对乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的:探讨共轭三烯酸(TCLA)对乳腺癌细胞的增殖抑制、凋亡作用及其作用机制.方法:用TCLA处理人正常肝细胞(LO2)及乳腺癌细胞(MCF-7),用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、EdU掺入试验研究TCLA对人正常肝细胞和乳腺癌细胞的增殖抑制作用;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测TCLA对细胞周期的影响;RT-PCR检测凋亡相关基因PPAR-γ、P53、CASPASE-3 mRNA表达.结果:用TCLA处理后,肿瘤细胞增殖活性降低(P<0.05),半效抑制浓度(IC50)为50 μmol,呈时间-剂量-效应关系;克隆形成下降(P<0.05)亦呈时间-剂量-效应关系;EdU标记指数降低(P<0.05),AO/EB染色凋亡细胞增多(P<0.05),细胞周期分布改变,凋亡指数显著增加(P<0.01),S期细胞显著减少(P<0.05);RT-PCR检测RT.PCR检测凋亡相关基因PPAR-γ(P<0.05)、P53(P<0.05)、CASPASE-3(P<0.01)mRNA表达均比对照组显著增加.结论:TCLA对乳腺癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用机理可能与抑制DNA合成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因PPAR3γ、P53、CASPASE-3表达有关.     

罗格列酮对肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡及PTEN、存活蛋白表达的作用

目的:探讨过氧化物酶体增殖激活物受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor γ,PPARγ)配体罗格列酮对人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡及肿瘤抑制基因PTEN和存活蛋白(survivin)表达的影响.方法:经不同浓度罗格列酮(0、0.1、1、10和100 μmol/L)处理SMMC-7721细胞24、48和72 h后,用MTT法测定细胞的增殖情况,FCM法检测细胞周期变化和凋亡情况,Westem印迹法检测细胞中PTEN和survivin蛋白表达的变化.结果:罗格列酮可以显著抑制SMMC-7721细胞增殖(P＜0.01);可使SMMC-7721细胞G0/G1期比例明显升高(P＜0.05),G2/M期比值降低(P＜0.05),并能显著诱导细胞凋亡(P＜0.05),呈时间依赖性和剂量依赖性.罗格列酮能上调细胞PTEN的表达,并呈时间和剂量依赖性,而对survivin的表达则无明显改变(P＞0.05).结论:PPARγ/被罗格列酮活化后可抑制SMMC-7721细胞增殖、诱导细胞凋亡,该作用可能是与上调细胞PTEN的表达有关.     

小檗胺对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制

目的:探讨小檗胺对胃癌细胞（AGS和SGC-7901）增殖、凋亡的影响并探讨其分子机制。方法:利用MTT 实验检测胃癌细胞的增殖,利用集落形成实验检测胃癌细胞的生长, 流式细胞技术检测胃癌细胞的凋亡率以及细胞周期, Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果:小檗胺（0~64 μg/ml）能够剂量依赖性以及时间依赖性的抑制 AGS和SGC-7901细胞的增殖 （P＜0.05）。集落形成实验结果显示小檗胺(32 μg/ml)能够抑制AGS和SGC-7901细胞的生长 （P＜0.05）。流式细胞实验显示,小檗胺(32 μg/ml)同时能够促进AGS和SGC-7901细胞的凋亡 （P＜0.05）,增殖G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例 （P＜0.05）。Western blot实验结果显示小檗胺(32 μg/ml)能够增加AGS和SGC-7901细胞的cleaved caspase-3,cleaved caspase-9以及Bax的蛋白水平,同时降低Bcl-2的蛋白水平 （P＜0.05）。结论:小檗胺能够抑制胃癌细胞的增殖,其机制可能与改变细胞周期以及促进细胞凋亡有关。     

蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞诱导凋亡作用及其机制

 目的 研究蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞诱导凋亡作用，并探讨其作用机制。方法 采用流式细胞仪检测HeLa细胞的细胞周期分布相和细胞凋亡率；末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的脱氧核苷酸缺口末端标记（TdT mediated dUTP nick end labeling）TUNEL法检测凋亡细胞；通过免疫细胞化学SP法测定凋亡相关基因产物p53、Fas、bcl 2、Bax蛋白的表达情况。结果 (1)蛴螬粗提物可以诱导HeLa细胞发生凋亡，加药组出现亚二倍体峰，并且G0/G1期细胞比例显著增加（P＜0.01），而S期和G2/M期细胞比例则明显下降,将细胞阻滞在G0/G1期；（2）蛴螬粗提物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多，凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性；(3)蛴螬粗提物作用后bcl 2、p53蛋白随提取物浓度表达均下降，Bax、Fas蛋白表达上升，四种蛋白表达各组间比较差异均有具有统计学意义（P<0.01）。结论 (1) 蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞具有诱导凋亡作用；(2)蛴螬粗提取物诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生G0/G1期阻滞有关；并且通过下调bcl 2、p53蛋白表达,上调Bax、Fas蛋白表达，经由细胞凋亡的死亡受体通路和线粒体通路完成凋亡的启动和执行。     

1,4-苯醌致人胚肺成纤维细胞的凋亡效应与调控机制

目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制。方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L PBQ处理HELF细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测PBQ对HELF细胞增殖的抑制作用,以PI单染法检测细胞周期的改变,用Annexin-Ⅴ/PI双染法检测细胞凋亡,以实时荧光PCR法检测Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平的改变。结果:与对照组相比,不同PBQ染毒浓度下作用24 h后,随PBQ浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(P0.05),G0/G 1期细胞下降(在40和60μmol/L时,P0.05),S期细胞增加(P0.05),以40μmol/L PBQ浓度作用于HELF细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和S期细胞均下降(P0.05),而G0/G1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(P0.05);当染毒浓度大于20μmol/L时,染毒24 h可诱导HELF细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05);不同浓度的PBQ染毒24 h,细胞的Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平均上调。40μmol/L PBQ作用不同时间后,Bax、p53 mRNA水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(P均0.05);Bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72 h时与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05);Bax/Bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论:PBQ能抑制HELF细胞增殖,影响HELF细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值的上升,及p53 mRNA表达的上调有关。     

小鼠胃癌Cyclin G1和其它相关基因表达及凋亡研究

目的:探讨胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因的表达水平、细胞周期变化和凋亡情况.方法:建立胃癌模型;免疫组化法检测小鼠胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因蛋白表达,RT-PCR技术检测Cyclin G1mRNA的表达;流式细胞术检测小鼠胃癌细胞的凋亡率和细胞周期.结果:阳性组的CvclinG1、Cyclin D表达明显高于正常组和化疗组(P＜0.05),p16则相反;各组p21、bcl-2的表达无明显差异;阳性组p53的表达为阴性,而化疗组与正常组表达无明显差异(P＞0.05);阳性组中Cvclin G1mRNA的表达水平明显高于正常组和化疗组(P＜0.05);化疗组和阳性组的细胞凋亡率均较正常组增高(P＜0.05),且化疗组的凋亡率比阳性组明显增高(P＜0.01).结论:CyclinG1、Cyclin D高表达、p16低表达可能与胃癌的发生、发展有关.     

过氧化物酶体激活物活化受体γ活化对人胃癌细胞周期的影响

目的:探讨过氧化物酶体激活物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)活化在诱导人胃癌MGC803细胞周期停滞中的作用。方法:MTT法检测吡格列酮(pioglitazone,PGZ)对MGC803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测肿瘤细胞周期的改变;RT-PCR方法检测PPARγ、细胞周期蛋白Cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4的表达。结果:0.1~10μmol/L PGZ作用MGC803细胞96 h后能显著抑制细胞增殖;10μmol/L PGZ分别作用48、72和96 h,G1期细胞随着作用时间的延长而增加,呈明显的G1期阻滞;在MGC803细胞中PPARγ表达较弱,经10μmol/L PGZ作用48 h表达水平显著增加;作用96 h,细胞中细胞周期调节因子CDK4表达显著降低(P<0.01),Cyclin D1轻微下调。结论:PPARγ活化能诱导MGC803细胞周期G1期阻滞,该作用可能与其下调细胞周期因子CDK4和Cyclin D1的表达有关。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。     

Use of the data of quantitative analysis of organo-systemic distribution of tumors in the evaluation of real hazards of chemical carcinogens

The study was concerned with objective criteria for identification of actual carcinogenic hazards. It used quantitative analysis data on morphologic structures of tumors induced in 12565 albino noninbred rats in the course of carcinogenicity evaluation of 112 chemical agents. The totality of all the data were analyzed versus morphologic parameters of tumors and carcinogenicity of the agents. Spontaneous tumors turned to be the cause of death in animals treated with noncarcinogenic or slightly carcinogenic agents whereas a completely different spectrum of tumors were responsible for lethality in those receiving potent carcinogens. It was inferred that increased incidence of spontaneous tumors following treatment with maximum tolerable doses can not be used as a criterion of actual blastogenicity of an agent.