脂质过氧化在再灌流性肝损伤中的作用

采用低流率-再灌流模型研究脂质过氧化在再灌流性肝损伤中的作用,肝脏经过90min低速率灌流未见明显损伤,当灌流速率恢复到正常后中心静脉周围区(PC区)细胞发生迅速不可逆损害,并伴有丙二醛生成率大幅度上升,低速率灌流期间,灌流液中黄嘌呤与次黄嘌吟浓度由原来的1.5和3.6μmol·L~(-1)逐步升高至5.5和11.5μmol·L~(-1),自由基清除剂儿茶酸能使再灌流期丙二醛生成率由295 nm01·g~(-1)·h~(-1)下降至109 nmol·g~(-1)·h~(-1),并使LDH释放率减少约50％,PC区细胞死亡率减少89％,再灌流初期用氮饱和灌流液冲洗3 min,使再灌流所致的LDH释放下降约50％,PC区细胞死亡率减少84％,别嘌吟醇(2～6mmol·L~(-1))对防止再灌流性肝损伤表现出明显的剂量效应关系。 与预计结果相反低浓度别嘌呤醇(0.5～1mmol·~(-1))能增加再灌流性肝损伤,400μmol·L~(-1)黄嘌呤则使再灌流性肝损伤明显减轻,其代谢产物尿酸对降低再灌流时丙二醛生成率以及细胞损害均表现出明显的剂量反应关系。     

托吡酯对原代培养海马神经元癫痫样放电的抑制效应

目的:探讨托吡酯对原代培养海马神经元癫痫样放电的抑制作用及其特点。方法:分离原代培养 1日龄SD大鼠海马神经元,d9~15采用膜片钳全细胞模式记录托吡酯 ( 20, 100μmol·L-1 )和苯妥英 (10μmol·L-1 )对电流刺激及谷氨酸诱导神经元癫痫样放电的抑制效应。结果:苯妥英(10μmol·L-1 )、托吡酯(20, 100μmol·L-1 )抑制电流刺激诱导神经元动作电位,分别减少 100 %,(38±25) %和 ( 70±19 ) %。苯妥英 ( 10μmol·L-1 )及托吡酯(100μmol·L-1 )分别完全或部分抑制谷氨酸诱导海马神经元的癫痫样放电。结论:托吡酯抑制原代培养海马神经元的癫痫样放电,并与其浓度及作用时间有关。     

加锡果宁抑制荷包牡丹碱在大鼠海马脑片CAl区诱发的痫样放电

在大鼠离体海马脑片标本表面灌流荷包牡丹碱(10μmol·L~(-1)),单脉冲电刺激Schaffer侧支,激活CAl区锥体细胞,给出痫样放电,作者在这种痫样放电模型上研究了加锡果宁对该痫样放电的影响,结果表明,微量推注不同浓度的加锡果宁到脑片CAl区表面,对荷包牡丹碱诱发的CAl区锥体细胞痫样放电呈剂量依赖性抑制,提示加锡果宁可对抗荷包牡丹碱的致痫作用,并讨论了可能机理。     

二氮嗪预处理大鼠海马脑片抗缺氧无糖损伤作用与激活PKC-ERK1/2通路有关

目的观察二氮嗪预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖(oxygenglucosedeprivation,OGD)损伤的作用及PKC、ERK1/2抑制剂对其的影响。方法建立大鼠海马脑片OGD损伤模型,分别以25、50、100μmol·L-1二氮嗪灌流海马脑片30min,或分别用mitoKATP通道、PKC、ERK1/2抑制剂5HD、chelerythrine、U0126灌流30min,再用二氮嗪(100μmol·L-1)预处理,观察OGD13min、复氧1h后顺向群峰电位(orthodromicpopulationspike,OPS)的变化。结果二氮嗪预处理组(50、100μmol·L-1)OPS消失时间明显延长,复氧供糖后OPS恢复良好;二氮嗪(100μmol·L-1)预处理抗OGD损伤作用可被5HD完全取消,可被chelerythrine或U0126部分取消。结论mitoKATP通道特异性开放剂二氮嗪预处理有抗海马脑片OGD损伤作用,该效应与激活PKCERK信号通路有关。     

赛庚啶的抗脂质过氧化作用

赛庚啶(Cyp)对自氧化及自由基发生系统(FRGS)诱导离体大鼠心,肝,脑组织脂质过氧化作用均有明显的抑制效应,且对后者的抑制作用更为明显,其IC_(50)分别为2.56mmol·L~(-1),693,973μmol·L~(-1)和63,56,379μmol·L~(-1)Cyp对FRGS诱导离体大鼠心肌线粒体膜脂质过氧化作用也有一定的抑制作用,其IC_(50)为5.1mmol·L~(-1).结果提示Cyp的抗脂质过氧化作用与其清除氧自由基作用有关     

TMB-8对大鼠软脑膜动脉收缩的作用(英文)

目的:研究TMB-8对大鼠软脑膜动脉的作用。方法:通过颅窗连续直接地观察软脑膜动脉,用微循环系统记录和分析动脉直径的变化。结果:Nim 1μmol·L~(-1)使PA直径立即增加,在给药后2min时达到最大,而TMB-8 50μmol·L~(-1)对PA无明显影响。预先给予TMB-825,50μmol·L~(-1)则明显抑制KCl引起的PA收缩幅度。在CSF中存在5-HT使PA持续收缩的情况下,TMB-8浓度依赖性地扩张PA,在TMB-8 50μmol·L~(-1)加入前,灌流一氧化氮(NO)合酶抑制剂L-NAME 10μmol·L~(-1)则TMB-8扩张PA的作用减弱。结论:TMB-8能扩张痉挛的脑血管,可能与其钙拮抗和一氧化氮释放作用有关。     

蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞钾电流的阻断作用(英文)

目的:研究蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞快激活(I_(Kr))和慢激活(I_(Ks))延迟整流钾电流及内向整流钾电流(I_(K1))的作用。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。电压箝制方式下全细胞记录豚鼠单个心室肌细胞钾通道电流。结果:蝙蝠葛碱1-100μmol·L~(-1)浓度依赖性阻断I_(Ks),I_(Ks-tail)[IC_(50)=33(95 ％可信限:24-46)μmol·L~(-1)]及I_(Kr),I_(Kr-tail)[IC_(50))=16 (95％可信限:13-22)μmol·L~(-1)]。对I_(Ks-tail),I_(Kr-tail)的去激活过程无明显影响,给药前的时间常数分别为(92±18)ms和(140±38)ms,给药后分别为(84±16)ms和(130±26)ms(P>0.05)。蝙蝠葛碱对I_(Ks)的抑制作用具有电压依赖性。 蝙蝠葛碱20μmol·L~(-1)对I_(K1)的内向部分具有阻断作用。结论:蝙蝠葛碱对I_(Kr)和I_(Ks)具有阻断作用,但不影响此两种成分的去激活过程. 蝙蝠葛碱同时具有阻断I_(K1)的作用。     

鸡胚心肌细胞的膨胀激活氯电流

目的:研究白羽鸡胚心肌细胞的膨胀激活氯电流及氯丙嗪对其的模拟作用.方法:膜片箝技术的全细胞记录模式.结果:低渗膨胀在白羽鸡胚心肌上诱发出一个可逆变化的氯电流,渗透压从300 mmol·L~(-1)减小至270 mmol·L~(-1)时,该电流从(452±200)pA增加到(849±373)pA.DIDS 100 μmol·L~(-1)使氯电流从(1196±505)pA减至(830±328)pA.I(Cl,swell)不能被CPZ 30μmol·L~(-1)模拟出来,该结果不同于大肠杆菌原生质体的结果.结论:白羽鸡胚心肌细胞的膨胀激活氯通道能被低渗激活,其激活的机制与大肠杆菌的机制敏感性离子通道激活的机制不同.     

DDPH抑制豚鼠单个心室肌细胞L-钙电流和钠电流(英文)

目的:研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流的作用。方法:全细胞膜片箝技术。结果:(1)DDPH(3-300μmol·L~(-1))浓度依赖性地抑制L-型钙电流,IC_(50)为28.5μmol·L~(-1)(95％可信限:14.3-42.7μmol·L~(-1))。维拉帕米0.3-30μmol/L浓度依赖性地抑制钙电流,IC_(50)为1.8μmol·L~(-1)(95％可信限:1.3-2.3μmol·L~(-1))。美西律100μmol·L~(-1)对钙电流无影响。DDPH30μmol·L~(-1)使用依赖性阻滞钙电流,1Hz时抑制率为58％±13％(n=5,P<0.01),3Hz时为76％±11％(n=5,P<0.01)。(2)DDPH(20-320μmol·L~(-1))浓度依赖性抑制钠电流,IC_(50)为89.0μmol·L~(-1)(95％可信限:68.7-109.3μmol·L~(-1))。美西律抑制钠电流的IC_(50)为32.2μmol·L~(-1)(95％可信限:11.7-52.7μmol·L~(-1))。维拉帕米10μmol·L~(-1)对钠电流无影响(P>0.05).DDPH80μmol·L~(-1)对钠电流无使用依赖性阻滞。结论:DDPH抑制豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流,但抑制钙电流的作用弱于维拉帕米,抑制钠电流的作用弱于美西律。     

蓝萼甲素对兔血小板生成血小板活化因子及花生四烯酸代谢的影响

蓝萼甲素在浓度0.1～100μmol·L~(-1)时可抑制A23187刺激的免血小板生成血小板活化因子,其IC_(50)为0.47μmol·L~(-1),当其浓度为10,100μmol·L~(-1)时能抑制花生四烯酸诱导的兔血小板血栓素A_2生成同时升高前列腺素E_2,推测蓝萼甲素通过抑制血小板活化因子生物合成及选择性抑制血栓素A_2生成而抑制血小板激活。     

钩藤碱对麻醉大鼠颈动脉窦压力感受器活动的抑制作用(英文)

目的探讨钩藤碱(Rhy)对大鼠颈动脉窦压力感受器活动的影响及其有关机制。方法通过隔离灌流颈动脉窦区的方法来获得颈动脉窦压力感受器活动的各项参数,阈压(TP)、饱和压(SP)、最大斜率(PS)和窦神经放电的最大积分值(PIV)。① Rhy10, 50和100μmo·lL-1用K-H液稀释后,隔离灌流颈动脉窦区。待钩藤碱发挥作用后,用K-H液冲洗恢复,在给药前后以阶梯方式升降窦内压以刺激颈动脉窦压力感受器,同时记录窦神经传入放电及积分。②分别预先灌流一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、K+通道阻断剂四乙胺(TEA)和L-钙通道开放剂Bay K8644,观察他们对钩藤碱效应的影响。结果①Rhy 10μmol.L-1灌流隔离的颈动脉窦区,PS从(19.2±0.3)%降至(18.2±0.1)%·kPa-1,PIV从(219.3±3.3)%降至(199.1±3.8)%,同时TP和SP分别从(8.2±0.3)和(21.5±0.1)增加至(9.1±0.1)kPa和(22.1±0.1)kPa。用Rhy 50和100μmol·L-1进行灌流时,如PS,TP和SP的变化均呈浓度依赖性,表明Rhy可以抑制CBA。②预先灌流L-NAME不能阻断Rhy的效应。③预先灌流K+通道阻断剂TEA 1mmol·L-1也不能阻断Rhy对颈动脉窦压力感受器放电活动的抑制。④预先灌流L-钙通道开放剂Bay K8644可大部分阻断Rhy的作用。结论 Rhy可直接抑制大鼠颈动脉窦压力感受器传入神经放电活动,其机制可能为Rhy抑制了动脉压力感受器上的Ca2+内流。     

八肽胆囊收缩素对大鼠颈动脉窦神经传入放电的抑制作用(英文)

目的　观察八肽胆囊收缩素 (CCK 8)是否通过直接抑制颈动脉窦压力感受器放电活动而影响心血管功能。方法　在麻醉雄性大鼠隔离灌流颈动脉窦区条件下记录窦神经传入放电及积分。结果　①CCK 80 .1,0 .5和 1.0 μmol·L- 1使压力感受器机能曲线向右下方移位 ,曲线最大斜率和窦神经传入放电积分最大值均明显减小 ,表明CCK 8可剂量依赖性抑制颈动脉窦压力感受器活动。②预先灌流CCK 8非特异性受体阻断剂丙谷胺 10 0 μmol·L- 1或钙通道开放剂BayK86 440 .5 μmol·L- 1可部分阻断CCK 80 .5 μmol·L- 1对颈动脉窦压力感受器放电活动的抑制作用。预先灌流一氧化氮合酶抑制剂L NAME不能阻断CCK 8的效应。结论　CCK 8可直接抑制大鼠颈动脉窦压力感受器传入神经放电活动。其机制可能为CCK 8作用于颈动脉窦区相应的受体后 ,对牵张敏感性通道产生抑制作用。     

司帕沙星、联苯乙酸对大鼠海马神经元GABA-A和离子型谷氨酸受体的作用(英文)

目的 :观察司帕沙星单用和与联苯乙酸合用时 ,对γ 氨基丁酸 (GABA) ,NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导电流的作用。方法 :应用全细胞式膜片钳技术在急性打散的新生大鼠海马锥体神经元上记录GABA ,NMDA ,AMPA和海人藻酸的诱导电流。结果 :司帕沙星 1mmol·L- 1对GABA诱导的电流有迅速可逆的抑制作用 ,抑制率为 (4 7.6±s2 .9) % ,而联苯乙酸 10 μmol·L- 1无抑制作用。但联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)与司帕沙星 1mmol·L- 1合用时 ,稍稍增强抑制作用 ,司帕沙星单用或合用联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)对GABA诱导电流的IC50 分别为 (2 38± 2 1) μmol·L- 1和 (89± 5 ) μmol·L- 1。司帕沙星、联苯乙酸或司帕沙星合用联苯乙酸对NM DA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无明显作用。结论 :提示司帕沙星 ,或与联苯乙酸合用时所产生的中枢神经毒性可能与抑制GABA诱导的电流有关 ,而与NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无关。     

白藜芦醇对家兔窦房结起搏细胞的电生理效应(英文)

目的为探讨白藜芦醇是否能成为抗心律失常药,研究了其对窦房结起搏细胞的电生理效应。方法应用细胞内微电极方法记录家兔窦房结起搏细胞的动作电位。结果白藜芦醇(30~120μmol.L-1)显著降低窦房结起搏细胞的动作电位幅度、零相最大上升速率(Vmax)、舒张期除极速率和起搏放电频率。而对最大舒张期电位和90%复极化的时间无明显作用。预先应用L型钙通道开放剂Bay-K-8644(0.5μmol.L-1)灌流窦房结10 min可阻断白藜芦醇(60μmol.L-1)对起搏细胞的上述电生理效应。而应用超极化激活电流阻断剂氯化铯(2 mmol.L-1)加钾通道阻断剂四乙铵(20 mmol.L-1)或应用一氧化氮(NO)合酶阻断剂-LNAME(0.5 mmol.L-1)灌流窦房结标本10min对白藜芦醇(60μmol.L-1)的电生理效应没有明显影响。结论白藜芦醇能抑制家兔窦房结起搏细胞的自发活动,此效应可能与其通过非NO依赖性途径抑制钙离子内流有关。     

染料木黄酮对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道的影响(英文)

目的研究酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮(GST)对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道电流的作用。方法木瓜蛋白酶法分离单个豚鼠结肠平滑肌细胞,应用全细胞式膜片钳技术记录L型钙通道电流。结果 GST(10 ~100μmo·lL-1)浓度依赖性地阻断L型钙通道电流,其作用可被洗脱,半数有效抑制浓度为(39.9±3.6)μmol·L-1。GST可使L型钙通道的稳态失活曲线向超极化方向左移约10 mV(P<0.01),对其斜率没有影响。GST的无活性拟似物大豆异黄酮对L型钙通道电流的作用明显小于GST。酪氨酸磷酸酶抑制剂原钒酸钠可阻断GST对钙通道电流的抑制作用。结论 GST可通过酪氨酸激酶途径抑制豚鼠结肠平滑肌L型钙通道。     

白藜芦醇抑制麻醉大鼠颈动脉窦压力感受性反射(英文)

目的研究白藜芦醇的心血管保护作用是否与其对颈动脉窦压力感受器的作用有关。方法隔离灌流麻醉大鼠颈动脉窦区,同时记录动脉血压的变化,并绘制压力感受性反射的功能曲线。结果白藜芦醇(30,60和120μmol.L-1)隔离灌流颈动脉窦区,压力感受性反射机能曲线向右上方移位,曲线的最大斜率下降,反射性血压下降的幅度降低,阈压增加,其变化呈浓度依赖性。预先应用NO合酶抑制剂L-NAME100μmo.lL-1或钙通道开放剂BayK8644500nmol.L-1可消除白藜芦醇对压力感受器的抑制作用。用酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠1mmol.L-1预处理对白藜芦醇抑制压力感受性反射的作用无影响。结论白藜芦醇对大鼠颈动脉窦压力感受器反射有抑制作用,此作用可能与局部NO的释放及减弱牵张敏感性通道的钙离子内流有关。     

大黄酸对体外大鼠皮质神经元突起长度及微管相关蛋白2mRNA表达的影响

目的研究大黄酸(RH)对大鼠皮质神经元的营养作用,并初步探讨其相关机制。方法体外DMEM/F12+0.4%B27培养新生大鼠皮质神经元,应用神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白2(MAP2)免疫细胞化学染色法鉴定神经元。神经元细胞加入RH 2,4和8μmol·L-1作用72 h,计算神经元平均突起长度;或分别同时加入Trk受体拮抗剂K252a 50 nmol·L-1和PI3K抑制剂LY294002 10μmol·L-1测量神经元平均突起长度。MTT法检测细胞存活,并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测MAP2 mRNA表达。结果 NSE及MAP2免疫荧光染色结果显示,绝大多数细胞呈阳性反应,所培养的细胞90%以上为神经元。MTT和LDH检测结果表明,与溶媒对照组相比,RH2,4和8μmol·L-1能明显提高神经元存活率(P<0.01);平均突起长度明显增加(P<0.01)。与RH8μmol·L-1组相比,同时加入K252a 50 nmol·L-1或LY294002 10μmol·L-1,平均突起长度明显缩短(P<0.01)。与溶媒对照组相比,RH 2,4和8μmol·L-1组MAP2 mRNA表达量明显增加(P<0.01)。结论 RH对新生大鼠皮质神经元具有神经营养作用,能促进神经元突起的生长和提高神经元的存活率。RH神经营养作用可能部分通过激活Trk受体,继而激活Ras/PI3K/PKB通路而发挥的。     

硝普钠对离体视上核神经元的抑制和兴奋作用

目的观察NO供体硝普钠(SNP)对视上核(SON)神经元的影响,以了解NO对SON细胞活动的调节作用。方法对成年大鼠下丘脑切片SON神经元进行细胞内生物电记录,测定细胞电生理参数。结果在11个安静的细胞灌流给药SNP(1mmol·L-1)3～5min,使55％的细胞发生去极化(P＜0.05),伴有膜电阻和时间常数减小,而使45％的细胞超极化(P＜0.05)。SNP使73％细胞的诱发动作电位的幅度和超射值减小、半幅时程增大(P＜0.05),并伴放电频率降低、电流-电压曲线斜率减小、AHP幅度增大(P＜0.05);但在6个有自发性放电的细胞,SNP使67％细胞的自发性放电频率升高(P＜0.05)。结论SNP能细胞类型和功能状态依赖性地对SON神经元产生兴奋性或抑制性影响,提示NO对SON细胞活动有不同的调节作用。     

ATP通过P2受体调节大鼠近端结肠纵行肌的舒张与收缩反应(英文)

目的腺苷三磷酸(ATP)对大鼠离体远端结肠纵行肌运动的影响已明确,对近端结肠纵行肌的影响可能不同,但未有报告,为此对此进行观察并探讨其受体机制。方法观察静息张力时或预收缩时0.1μmol·L-1～1mmol·L-1ATP和1～100μmol·L-1腺苷对大鼠近端结肠纵行肌的抑制和兴奋作用。结果在静息张力下,1μmol·L-1～1mmol·L-1ATP对大鼠近端结肠纵行肌产生3种效应,即抑制自发性收缩反应,一过性轻度降低基础张力(0.05～0.08g),随后产生浓度依赖性收缩反应(0.04～0.44g)。0.1μmol·L-1河豚毒素不影响ATP的上述作用。在静息张力下,1～100μmol·L-1腺苷对近端结肠纵行肌未产生明显的收缩反应。应用5羟色胺(5HT)或乙酰胆碱(ACh)预收缩标本时,1μmol·L-1～1mmol·L-1ATP产生明显的浓度依赖性舒张反应(23.2%～94.6%,5HT预收缩;24.8%～92.4%,ACh预收缩),而腺苷引起的舒张反应明显小于ATP。结论在大鼠离体近端结肠纵行肌,ATP主要通过嘌呤嘧啶(P)2受体介导收缩反应,部分通过P1受体介导舒张反应。     

三七总皂苷主要成分对人肝微粒体CYP3A4酶的抑制作用研究

目的：研究三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对人肝微粒体CYP3A4酶的体外抑制作用.方法：采用人肝微粒体体外孵育法,在孵育体系中分别加入不同浓度的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1与探针底物睾酮共孵育,用LC-MS /MS 法测定代谢产物6β-羟基睾酮的生成量反映CYP3A4酶活性的影响.结果：人参皂苷Rg1在2～1 000 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4未见剂量相关的抑制作用;人参皂苷Rb1在2～200 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4未见剂量相关的抑制作用,在1 000 μmol·L-1的测试浓度下对CYP3A4具有轻微抑制作用;三七皂苷R1在2～1 000 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4的IC50为126 μmol·L-1（＞100 μmol·L-1）.结论：三七总皂苷3个主要有效成分单体对CYP3A4酶的体外抑制作用不同,人参皂苷Rg1无抑制作用,人参皂苷Rb1高浓度下有轻微抑制作用,三七皂苷R1有弱抑制作用,三七总皂苷制剂与CYP3A4酶代谢相关的药物之间产生相互作用的可能性低.