苯致小鼠胚胎肢芽发育毒作用

目的 研究苯对小鼠胚胎肢芽发育和分化的影响,探讨苯的发育毒性.方法 应用恒温旋转培养装置对12 d孕龄小鼠胚胎前肢芽进行培养,观察不同浓度的苯对肢芽发育和分析的影响,并进行Neubert评分.结果 苯浓度在75μmoL/L以上时,前肢芽的发育和分化受到抑制,且随着苯浓度的增加,肢芽各软骨的发育分化越差,Neubert评分越少,剂量-效应关系良好.结论 苯可抑制小鼠胚胎肢芽发育和分化.     

钙和锌对胚胎肢芽细胞体外培养增殖分化的影响

目的:研究钙和锌对大鼠胚胎肢芽细胞分化和增殖效应关系,并探讨其中的机制。方法:利用16 d大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养,观察氯化钙和氯化锌对细胞增殖和分化的影响,并利用图像分析细胞形态的变化、丙二醛(MDA)和蛋白质相对含量。结果:钙和锌能促进体外培养胚胎肢芽细胞增多。测得胚胎肢芽细胞内蛋白质相对含量明显高于对照组,200.0 mol/L钙和锌浓度时MDA活性明显增加。结论:当50.0~100.0 mol/L钙和锌浓度时对体外培养胚胎肢芽细胞的生长发育有一定的促进生长分化作用,200.0 mol/L钙和锌浓度时对体外培养胚胎肢芽细胞的生长发育有明显的细胞毒性和抑制作用。     

甲醛对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化及增殖的影响

目的 探讨甲醛对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化、增殖的影响. 方法分离12 d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞,与不同浓度的甲醛共培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖. 结果随着甲醛染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少(P<0.01),肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降(P<0.01),均具有剂量-效应关系;甲醛对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为14.63μmol/L和27.67μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为16.46 μmol/L和26.92μmol/L. 结论甲醛对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

锌与金雀异黄素对小鼠胚胎肢芽的影响

[目的]研究锌与金雀异黄素对软骨发育分化的影响。[方法]利用12d小鼠胚胎肢芽体外培养方法,在培养基中分别加入10-7～10-5mol/L不同含量的金雀异黄素以及在加入10-5mol/L金雀异黄素的同时加ZnSO450μmol/L和70μmol/L,并设对照组,培养3d后,收获肢芽用原位杂交的方法测量肢芽软骨细胞II型胶原mRNA及BMP-2mR-NA的表达水平以及IL-6的表达水平。[结果]体外培养3d的肢芽在金雀异黄素(10-5mol/L)组与金雀异黄素(10-5mol/L)加ZnSo4组的II型胶原mRNA及BMP-2mRNA阳性表达密度与积分光密度显著高于对照组;体外培养3d的IL-6表达水平在金雀异黄素(10-5mol/L)组与金雀异黄素(10-5mol/L)加ZnSo4组显著低于对照组。[结论]锌与金雀异黄素在一定浓度下能协同促进胚胎肢芽软骨细胞BMP-2mRNA及II型胶原mRNA的表达,以及降低IL-6的表达水平,促进发育中软骨面积的增加,具有刺激胚胎软骨发育分化的作用。     

硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞增殖和分化的影响

目的研究硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞的增殖和分化的影响。方法应用微团培养法探讨不同浓度铝(0~100μmol/L)对体外培养的小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果铝对肢芽细胞的50%增殖抑制浓度(IP50)和50%分化抑制浓度(ID50)分别为45.97和3.60μmol/L,IP50/ID50值为12.8,并有明显的剂量?反应关系。结论硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞的增殖和分化可能有抑制作用。     

应用小鼠胚胎肢芽培养方法研究重铬酸钾的发育毒性

采用小鼠胚胎前肢芽培养方法研究重铬酸钾对小鼠的发育毒性。结果表明:重铬酸钾浓度在2 .0mg .L- 1 以上时,前肢芽器官的发育和分化受到影响,并且随着重铬酸钾浓度的增加,肢体中各软骨的发育分化越差,Neubert 评分得分越少,呈剂量- 效应关系。说明重铬酸钾为小鼠胚胎发育毒性物质     

锌缺乏和过量对小鼠胚胎体外骨形成的影响

目的　研究锌缺乏和锌过量对骨形成的影响。方法　采用小鼠胚胎长骨体外培养 ,通过骨组织的形态图象分析及长骨肥大区软骨细胞计数和骨化区破骨细胞计数以及羟脯氨酸( Hyp)含量和碱性磷酸酶 ( AKP)的活性测定研究锌缺乏和锌过量对骨形成的影响。结果　当培养基锌浓度高至 1× 1 0 -3 mol/ L时 ,长骨总长度及面积和骨干长度及面积、羟脯氨酸的含量、肥大区软骨细胞数均低于对照组 ;破骨细胞数高于对照组 ;当培养基锌浓度为 5× 1 0 -4 mol/ L时 ,AKP活性开始降低 ,当为 1× 1 0 -3 mol/ L时 ,AKP活性降低更为明显 ,锌缺乏时 ,AKP活性也降低。结论　锌缺乏和锌过量均可影响骨的发育。AKP在锌对骨发育的研究中是一个较为敏感的指标     

醋酸锌对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化影响的研究

目的　研究醋酸锌对原代培养的大鼠胚胎肢芽细胞形态、细胞相对蛋白含量、细胞集落形成率以及肢芽细胞生长发育的影响。方法　取SD大鼠胚胎肢芽组织,分别加入不同浓度的醋酸锌进行体外原代微团培养。用光学显微镜观察细胞形态,在倒置相差显微镜下计数细胞集落数,同时用Folin-酚法检测细胞蛋白含量。结果　当锌浓度为0.05mmol/L时,对肢芽细胞生长和集落的形成无显著影响,而当锌浓度增至0.1mmol/L时,表现出显著促进作用,锌浓度大于1.0mmol/L时则呈现抑制作用,且影响的程度随着锌浓度的增加而增强。醋酸锌对大鼠胚胎肢芽细胞的半数分化抑制浓度(ICD50)为1360.9μg/mL。结论　醋酸锌对胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响呈现双向效应,即低浓度促进,高浓度抑制。     

邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

为探讨邻苯二甲酸 二 2 乙基己基酯 (Di 2 ethylhexylphthalate ,DEHP)对体外培养小鼠胚胎的发育毒性 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8.5天龄Balb c小鼠胚胎移入含DEHP即刻离心血清培养 48h ,DEHP终浓度为 0、12 .5、2 5、5 0、10 0和 2 0 0mg L ,观察DEHP对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示DEHP对体外培养小鼠胚胎生长发育毒性的最大无作用剂量为 12 .5mg L ,≥ 2 5mg L的DEHP可诱发胚胎生长迟缓及组织器官形态分化异常 ,出现心脏、神经系统、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形 ;10 0mg L的DEHP对体外培养胚胎偶尔呈致死效应 ;2 0 0mg L时各组织器官形态分化均出现了异常 ,但未发现死胎。上述改变具有明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。提示DEHP对体外培养的小鼠胚胎具有胚胎毒性 ,并以致畸效应为主     

应用全胚胎培养方法研究CrCl3对大、小鼠胚胎的发育毒性研究

目的 研究三价铬化合物的发育毒性及其种属差异。方法 采用植入后大、小鼠全胚胎培养技术,观察胚胎生长发育及组织分化的改变。结果 三氯化铬（CrCl3）影响大、小鼠胚胎的生长发育,CrCl3对大鼠或小鼠胚胎作用浓度在112．5μmol／L或150．0μmol／L以上时可导致大、小鼠胚胎体长、头长、卵黄囊直径及胚胎干重等指标明显低于对照组,形态学评分结果可见,CrCl3主要影响大、小鼠胚胎神经管、体屈、前肢芽及鳃弓等形态分化,高浓度组还可导致胚胎畸形发生率的明显升高。结论 表明CrCl3对体外培养的大、小鼠胚胎具有明显的发育毒性,且大鼠较小鼠敏感。     

用小鼠肢芽器官培养技术研究锌缺乏与过量的致畸性

应用小鼠胚胎肢芽器官体外培养和计算机图像分析技术，通过体内／外和体外实验途径研究锌缺乏与过量的致畸性。结果表明：缺锌使多数肢体软骨原基发育受阻，软骨面积减小，外形发育受抑制，出现严重的缺指（趾）和并指（趾）。软骨和软组织均受影响。后肢比前肢受到的影响大；随着锌剂量的过度增加，肢体中各种软骨原基的发育分化越差、软骨面积越小，呈剂量反应关系。后肢比前肢易受影响，爪骨比长骨敏感，骨组织受到的影响比软组织严重。在体外实验中，锌含量在１０～１５ｍｇ／Ｌ（培养基）显示了致畸性。在体内／外实验中，５０ｍｇ／ｋｇｂｗ就开始对肢体产生影响。     

锌对体外培养小鼠胎鼠前肢骨发育的影响

目的 研究锌对骨发育的影响。方法 用一次通气旋转装置,在缺锌的基础培养基和分别加入45、70和120μmol／LZn^2 的培养基中对16d孕龄胎鼠前肢进行培养。结果 培养基中缺锌和在培养基中补充Zn^2 至Zn^2 浓度120μmol／L时,骨组织中骨钙素(OC)和^45Ca含量减少,碱性磷酸酶(AKP))活性显著降低;当在培养基中补充Zn^2 至Zn^2 浓度45、70μmol/L时OC合成量、骨组织对钙的吸收及AKP活性显著增加。培养液中缺锌及锌浓度为120μmol／L时,X线显示,长骨长度和密度与其自身对照相比,长骨长度较短,骨密度降低;当培养液中Zn^2 浓度分别为45和70μmol／L时,与其自身对照相比,长骨长度及其骨密度有所增加。组织学分析显示,培养液中缺锌及锌浓度为120μmol／L时,镜下可见骨细胞死亡,基质丢失;当培养液中Zn^2 浓度分别为45和70μmol／L时,骨细胞增殖、分化活跃,类骨质的分泌与合成增加。结论 适量补锌能促进骨组织形成及发育,锌缺乏或过量时均可影响骨组织正常生长发育及代谢。     

锌对骨发育影响的体外研究

目的　研究锌对骨发育的影响。方法　将 1 6 d孕龄的小鼠 (每组 1 2只 )脱颈椎处死 ,无菌条件下切下胎鼠的前肢分 5组 ,分别在基础培养基 (Zn2 + 浓度为 2 0 μmol/L)及基础培养基中加终浓度为 2 0 μmol/L的 Zn2 +络合剂 (TPEN) ,及基础培养基中加 Zn SO4 至 Zn2 +浓度分别为45 μmol/L、70 μmol/L、1 2 0 μmol/L的培养基中培养 6 d。结果　 1 .培养后的胎鼠右肢与未培养左肢相比 ,其长骨长度、骨组织密度均有所增加 ;组织学分析显示 :骨组织呈活跃增殖分化相 ,骨小梁增加 ,骨基质深染。2 .生化指标及 4 5Ca示踪显示 :培养基中缺锌和在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度1 2 0μmol/L时 ,骨组织中骨钙素 (OC)和 4 5Ca含量减少 ,碱性磷酸酶 (AKP)活性降低 (P<0 .0 5 ) ;当在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度 45μmol/L、70μmol/L时 OC合成量 ,骨组织对钙的吸收及AKP活性增加 (P<0 .0 5 )。 3 .形态学指标 :X- ray显示 ,培养液中缺锌和锌浓度为 1 2 0 μmol/L时 ,长骨长度和密度与对照组相比 ,长骨长度较短 ,骨密度降低 ;当在培养液中 Zn2 +浓度分别为 45μmol/L和 70 μmol/L时 ,与对照组相比 ,长骨长度及其骨密度有所增加。结论　锌参与骨组织发育的生理和生化过程 ,锌缺乏 /过量时均可影响骨的正常     

锌及复合微量营养素的营养干预对学龄前儿童认知功能的影响

相同年龄段（６～７岁）学龄前儿童２８０名，男、女各半，分为锌组（Ｚｎ组）、锌加复合微量营养素组（ＺｎＭ组）和单纯补充微量营养素组（Ｍ组），每组８０人，另外４０名儿童为对照组，采用双盲法进行营养干预实验，实验周期为１０周。结果显示，重庆市城区学龄前儿童近８０％处于边缘性锌缺乏状态，一半以上儿童血铅超过０．４８３μｍｏｌ／Ｌ的安全标准，经过１０周营养干预后，发现每日补充１６ｍｇ锌的同时再添加多种复合微量营养素能有效增加儿童血锌含量、降低血铅水平，同时明显增强儿童的认知功能，而单纯补锌效果并不理想。本研究儿童认知功能的改善可能与体内良好的锌营养状况、铅负荷减少有关。     

人参总皂甙对小鼠胚胎发育的影响

目的探讨人参总皂甙对体外培养的小鼠胚胎发育的影响。方法采用植入后全胚胎培养模型,将8.5d龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参总皂甙的大鼠即刻离心血清中旋转培养48h(人参总皂甙终浓度分别为0,5,15,30,40,50mg/L),观察人参总皂甙对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着人参总皂甙浓度的增加,反映胚胎生长发育的指标得分和胚胎总形态学得分无明显变化,各剂量组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参总皂甙浓度达到50mg/L时,未见对体外培养的小鼠胚胎有毒性作用。     

赖氨葡锌颗粒对反复呼吸道感染儿童血清微量元素锌含量的影响

目的观察赖氨葡锌颗粒对反复呼吸道感染儿童血清微量元素锌含量的影响,探讨儿童反复呼吸道感染与血清微量元素锌的关系。方法将58例反复呼吸道感染患儿纳入观察组,取56例同年龄段的健康儿童作为健康对照组,取静脉血测定微量元素锌含量;对患儿组进行口服赖氨葡锌冲剂治疗6个月后再进行血微量元素锌测定,观察治疗前后血微量元素锌的变化。结果患儿组血锌为(43.62±3.22)μmol/L,而对照组血锌为(77.78±6.56)μmol/L,患儿组血锌明显低于对照组,差异具有显著性意义(P<0.01);患儿组经口服赖氨葡锌颗粒治疗6个月后血锌上升到(72.30±6.08)μmol/L,比治疗前明显升高,治疗后前后比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论赖氨葡锌颗粒可明显升高反复呼吸道感染儿童血清微量元素锌的含量,说明微量元素锌与儿童反复呼吸道感染有关。     

微量元素锌与儿童生长发育关系的研究

目的:探讨锌与儿童生长发育的密切关系。方法:对362例4～6岁学龄前儿童进行血清锌检验,并做身高、体重的测量,将结果进行比较分析。结果:缺锌组生长发育状况明显低于血清锌正常组(P<0.01)。结论:缺锌影响儿童生长发育,由于缺锌引起营养素摄入不足,蛋白质、糖类、脂肪等代谢障碍,体内ATP消耗过多,进一步引起营养不良。因此,在增加营养、纠正偏食、改善饮食结构的同时应进行一定量的药物性锌元素的补充以达到促进生长发育的目的。     

锌缺乏和锌过量对培养长骨细胞周期和细胞凋亡的影响

目的　探讨锌缺乏和锌过量对培养长骨细胞周期和细胞凋亡的影响 ,为阐明锌对骨骼的生长发育影响的机制提供科学依据。方法　用小鼠胚胎长骨体外培养 ,采用流式细胞仪研究细胞周期各个时相所占比例和凋亡细胞百分比 ,进行电镜分析 ,观察细胞的超微结构。结果　缺锌可使细胞周期停滞在 G0 /G1期 ,培养 2 d,缺锌组 G0 /G1期细胞所占百分比 (82 .3% )高于对照组(76.9% ) ,G2 /M期细胞所占百分比 (3.4% )低于对照组 (8.9% ) ;培养 4d,缺锌组 G0 /G1期细胞所占百分比 (88.6% )明显高于对照组 (78.4% ) ,S期细胞所占百分比 (4.3% )明显低于对照组 (1 1 .0 % ) ;缺锌可使凋亡细胞数目增加。电镜观察 ,缺锌组可见大量的凋亡细胞 ,而高锌组则有大量的坏死细胞。结论　锌缺乏可改变培养长骨的细胞周期 ,诱导细胞凋亡 ,但锌过量对细胞周期和细胞凋亡没有影响。