淫羊藿甙对去卵巢大鼠骨组织核心结合因子α1表达的影响

目的 观察淫羊藿甙对去卵巢大鼠骨组织Cbfa1表达的影响.方法 54只雌性SD大鼠随机分成6组9只/组:假手术组、模型组、尼尔雌醇组、淫羊藿甙低剂量组、淫羊藿甙中剂量组和淫羊藿甙高剂量组.对尼尔雌醇组和淫羊藿甙低、中、高剂量组分别给予尼尔雌醇(0.1mg/kg)和淫羊藿甙(40,80和160mg/kg)治疗12周.12周后,以DXA法测定大鼠全身的骨密度;放射免疫法测定各组大鼠血清中骨钙素及雌二醇的浓度;处死各组大鼠,直接从头盖骨中提取总.RNA,采用荧光定量PCR技术检测Cbfa1 mRNA的相对表达量.结果 12周后,模型组大鼠的骨密度和血清雌二醇水平明显降低,与假手术组相比,差异有显著性(P<0.05).与模型组相比高剂量组的全身骨密度和血清骨钙素含量增加(P<0.05),但是血清雌二醇的水平无变化(P>0.05).12周后,与假手术组相比,模型组大鼠骨组织中Cbfal mRNA表达明显降低,差异有显著性(P<0.01).与模型组相比高剂量组骨组织中Cbfal mRNA的表达,显著升高(P<0.01).结论 淫羊藿甙对去卵巢大鼠骨质疏松症具有防治作用,其部分机制可能为淫羊藿甙促进骨组织中Cbfa1表达,从而调节骨形成.     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织Ⅰ型胶原代谢及组织蛋白酶K表达的影响

目的 观察淫羊藿总黄酮（HEF）对去卵巢大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白代谢及组织蛋白酶K表达的影响。方法 54只雌性SD大鼠随机分成6组。假手术组为阴性对照组，其余各组切除卵巢后分别不给予或给予HEF（每日40，80和160mg／kg）和尼尔雌醇（每日0．1mg／kg）治疗12周。测定大鼠全身骨密度和尿NTx／Cr比值，采用免疫组化法和Western印迹测定Ⅰ型胶原蛋白和组织蛋白酶K的含量。结果 12周后，HEF可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度（均P〈0．05）。HEF各组Ⅰ型胶原的表达升高，组织蛋白酶K的表达及尿中NTX／Cr水平明显下降，并呈剂量依赖关系，以高剂量组最为显著（P〈0．01）。结论 HEF可能通过促进大鼠骨Ⅰ型胶原蛋白的合成、抑制其水解吸收从而提高大鼠骨密度，改善骨质量。     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠雌激素水平的影响

目的探讨淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠雌激素水平的影响。方法雌性SD大鼠88只,随机分为对照组,假手术组,模型组,阳性组,淫羊藿低、中和淫羊藿高剂量组。模型组、阳性组及受试药物各剂量组及假手术组动物去势及假手术后7 d开始给药,连续给药12 w后,测定血清钙离子、磷离子、雌二醇、皮质醇和孕激素的浓度。结果假手术组、淫羊藿低、中、高剂组大鼠血清中雌二醇的浓度与模型组比较差异显著(P<0.05)。淫羊藿总黄酮低、中和高剂组大鼠血清中皮质醇的浓度与模型组比较显著降低(P<0.05)。淫羊藿总黄酮低剂组大鼠血清中孕激素的浓度与模型组比较显著降低(P<0.05)。结论淫羊藿总黄酮能够提高去势大鼠血清中雌激素水平。     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织细胞凋亡的影响

目的 观察淫羊藿总黄酮(HEF)对去卵巢大鼠骨组织中细胞凋亡的影响.方法 54只雌性SD大鼠随机分成6组:假手术组,去卵巢组,尼尔雌醇组(0.1 mg·kg-1·d-1)和HEF低、中、高剂量组(40,80和160 mg·kg-1·d-1),治疗12周,测定大鼠令身骨密度及雌二醇水平,采用3'-OH末端DNA原位标记技术和透射电镜检测细胞凋亡,并用免疫组化方法观察骨转化生长因子β1(TGF-β1)、成纤维细胞生长因子(FGF-2)和凋亡相关基因Fas的蛋白表达.结果 HEF增加去卵巢大鼠的全身骨密度,中、高剂量组与去卵巢组差异有统计学意义(均P<0.01),但不增加血清雌二醇水平(P>0.05).去卵巢组骨细胞、成骨细胞凋亡较假手术组明显增高(P<0.01),HEr组明显降低(P<0.01).与去卵巢组相比,HEF组Fas的表达明显降低(P<0.01),TGF-β1、FGF-2表达明显增加,尤以中、高剂量组为显著(P<0.01).结论 HEF对去卵巢大鼠骨丢失具有防治作用,其部分机制可能与促进TGF-β1、FGF-2,抑制Fas蛋白的表达和抑制骨细胞、成骨细胞凋亡有关.     

染料木素和17β-雌二醇对去卵巢大鼠松质骨微结构的作用

目的 观察染料木素和小剂量17β-雌二醇对去卵巢（OVX）大鼠松质骨微结构的作用。方法90只7月龄SD大鼠被随机分为基线组、OVX组、假手术（SHAM）组、小剂量17β-雌二醇干预组（10μg·kg^-1·d^-1，EST组）和染料木素干预组（5mg·kg^-1·d^-1，GEN组），分别在基线时、手术后3周和15周处死。分离左胫骨行显微CT扫描，分析距生长板远端1．6mm、层厚0．5mm骨组织的感兴趣区域松质骨结构。结果去卵巢后第3周，GEN组的组织骨密度和骨小梁厚度明显大于OVX组和EST组（均P〈0．05）；EST组的骨小梁数目显著多于GEN组（P〈0．05），骨小梁间隔则明显小于GEN组（P〈0．05）；OVX组、GEN组和EST组3组的体积骨密度和骨体积分数差异无统计学意义，但均明显小于SHAM组（均P〈0．05）。第15周时，OVX组、GEN组和EST组3组间的体积骨密度、骨体积分数、骨小梁数目和联接密度差异无统计学意义，但均小于SHAM组（均P〈0．05），结构模型指数和骨小梁间隔则大于SHAM组（均P〈0．05）。纵向观察发现，OVX组、GEN组和EST组3组的体积骨密度、骨体积分数、骨表面积分数和联接密度随时间出现下降，而组织骨密度、结构模型指数、骨小梁厚度和骨小梁间隔等参数随时间增加（均P〈0．05），其中OVX组和EST组组织骨密度和骨小梁厚度在第3周和第15周之间出现明显增长（均P〈0．05），GEN组组织骨密度增长主要发生在去卵巢后的第3周内，骨小梁厚度则在3周和15周均有增长（均P〈0．05）。SHAM组骨小梁厚度和骨小梁间隔亦随时间增加，骨表面积分数和联接密度则下降，其他参数随时间无明显变化。结论 染料木素能促进松质骨矿物质沉积和骨小梁增厚，17β-雌二醇则对抗雌激素缺乏引起的骨小梁数目减少和骨小梁间隔增大。     

淫羊藿甙促成骨细胞中Cbfa1表达的信号通路机制

目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一.     

淫羊藿甙促成骨细胞中Cbfa1表达的信号通路机制

目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一.     

复方淫羊藿对去卵巢大鼠腰椎松质骨的影响

目的 观察淫羊藿提取物与乙烯雌酚（DES）组成复方淫羊藿对去卵巢大鼠腰椎松质骨的影响。方法 4.5月龄SD雌性大鼠70只，随机分成假手术组、去卵巢组、DES组、淫羊藿提取物组、复方淫羊藿高、中、低剂量组，持续给药90d。大鼠处死后用骨组织形态计量学等方法测量腰椎松质骨的动态参数和静态参数，同时测量子宫内膜厚度。结果 复方淫羊藿3个剂量组的腰椎％TbAr、Tb.Th均高于去卵巢组，而Tb.Sp、Oe.N、BFR／BV均低于去卵巢组。复方淫羊藿商剂量组的作用比单用DES强，而低剂量组的作用与DES相当。复方淫羊藿3个剂量组子宫重量、子宫内膜厚度均高于去卵巢组，但子宫内膜厚度均小予DES组。结论 复方淫羊藿预防去卵巢大鼠腰椎松质骨丢失的作用强于DES，对子宫刺激的作用比DES小。     

淫羊藿甙促成骨细胞中Cbfa1表达的信号通路机制

目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一.     

去卵巢大鼠骨细胞中间隙连接蛋白43表达的研究

目的　研究去卵巢致骨质疏松大鼠骨细胞中间隙连接蛋白 43(Cx43)的表达及意义。方法　采用 1 0月龄未孕产 Wistar雌性大鼠 30只 ,随机分为去卵巢组、假手术组和尼尔雌醇治疗组。于术后 8w末测量三组大鼠全身及腰椎骨密度 (BMD) ,采用放免法测定血清雌二醇水平 ,采用SABC免疫组化法观察 Cx43在成骨细胞和破骨细胞中的表达情况。结果　术后 8w末去卵巢组全身及腰椎 BMD和血清雌二醇水平明显低于假手术组和尼尔雌醇治疗组 (P<0 .0 1 )。去卵巢组成骨细胞内 Cx43阳性表达率 (1 3.8%± 1 .1 4 % )低于假手术组 (63.6%± 2 .46% )和尼尔雌醇治疗组(63.6%± 2 .1 2 % ) (P<0 .0 1 ) ,而破骨细胞内去卵巢组 Cx43阳性表达率 (66.1 %± 1 .37% )高于假手术组 (42 .2 %± 1 .93% )和尼尔雌醇治疗组(41 .8%± 1 .81 % ) (P<0 .0 1 )。上述指标假手术组和尼尔雌醇治疗组差异无显著性。结论　去卵巢大鼠 Cx43在成骨细胞中表达下降 ,而在破骨细胞中表达增加 ,在成骨和破骨细胞中 Cx43表达的变化可能是去卵巢大鼠发生骨质疏松的机制之一。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.