MTT比色测定淋巴细胞增殖的反应

MTT比色检测淋巴细胞功能无需特殊仪器,且方法简便、快速、准确。本文通过测定正常人淋巴细胞转化,找出测定中最佳细胞浓度、PHA浓度以及合适的溶解剂。结果表明:细胞浓度在1.0~3.5×10~5/孔、PHA为40μg/ml时诱导淋巴细胞增殖最为合适;二甲亚枫(DMSO)对甲的溶解具有灵敏度高、重复性、稳定性好的特点。     

MTT比色分析法检测卵巢癌药物敏感性

目的:探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为卵巢癌临床化疗用药提供参考.方法:采用常用的12种化疗药物对65例卵巢癌进行MTT法药物敏感试验.结果:不同类型的卵巢癌及同一类型的不同个体对化疗药物的敏感性差异较大.卵巢癌对紫杉醇、表阿霉素、卡铂和顺铂中度敏感,平均抑制率分别为(67.3±4.6)%、(54.5±4.8)%、(52.0±4.3)%和(50.8±4.5)%;对鬼臼乙叉甙、烃基喜树碱和长春地新低度敏感,平均抑制率分别为(39.6±3.8)%、(39.3±4.3)%和(30.7±2.6)%;而对丝裂霉素C、噻替哌、5氟尿嘧啶、长春新碱和氨甲喋呤则耐药,平均抑制率均小于30%.结论:卵巢癌化疗敏感性个体差异较大.MTT法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为卵巢癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据.     

MTT比色分析法的实验条件探索和改良

对MTT比色分析法用于人淋巴细胞、小鼠脾和胸腺细胞增殖的最适实验条件进行了探索.发现微量细胞经48小时培养,加MTT后再培养4小时为最佳时间;培养板离心后简化为一次性摔弃上清液,不需补充培养液,加酸化异丙醇后15～30分钟测OD值为宜.改良后的MTT比色分析法具有简便快速、稳定可靠等优点,为一般实验室提供了一种实用的检测手段.     

检测狂犬疫苗细胞免疫反应的MTT比色分析法的建立和应用

细胞免疫是机体免疫反应的基础,在抗病毒感染中具有重要的地位,但目前对许多病毒感染和免疫后的细胞免疫状态报告较少,尤其是对狂犬疫苗接种后的反应在国内尚未见报告,淋巴细胞在疫苗免疫后的活性反应、动态变化及其作用等的资料仍不完整。细胞免疫的检查方法常用的是皮肤反应和体外试验,但这些方法手续繁杂,特异性不高,敏感度低,客观性差。近年来所用的~3H-Tdr掺入法测定淋巴细胞转化,提高了敏感性和客观性,因其条件要求较高而影响了     

影响MTT比色试验的关键环节

0 引言 M1Tr比色试验即四唑盐比色试验,是一种检测细胞存活和生长方法的试验.MTT比色试验操作非常简单,一般涉及试剂的准备、接种细胞、培养细胞、呈色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步操作不当都会影响测定结果,现将测定过程中可能发生的主要问题分析如下.     

MTT比色检测细胞增殖方法的改良及实验影响因素的观察

探讨了改良前后两种MTT比色法的显色机制及区别,并进行了改良方法与未改良方法及同位素掺入方法检测敏感性的比较和改良方法实验影响因素的观察。结果表明①改良前异丙醇只能溶解细胞外部甲,改良后异丙醇不但能溶解细胞周围的甲,而且能将细胞内的MTT代谢物全部溶解。②改良后较改良前的敏感性有了较大的提高,其敏感性检测结果与~3H-TdR检测结果相一致。③改良方法可以测出约3×10~3个CTLL_2细胞和用6×10~3个细胞活化后的PBL。④适当提高MTT浓度能进一步提高检测敏感性及OD值。     

微型比色分析法的应用与研究

在医用化学及分析化学实验中,光电比色法是传统的定量分析方法之一,光电比色法避免了用眼睛观察颜色而引起的误差,准确度高,但操作复杂,且在仪器数量有限的情况下,无法满足学生大面积开展此实验的需要,为此,笔者试用微型化学实验专用仪器多用滴管和九孔井穴板进行微型比色分析,其操作简便,可实现人手一套仪器,独立性强,适合课堂内外实验,应用效果良好。     

MTT比色分析法检测接种狂犬疫苗者淋巴细胞活性的初步报告

1983年Mosmann创建MTT比色分析法检测细胞增殖,1986年周道洪等用此法进行小鼠瘤细胞活性及脾细胞转化试验,认为它在评价细胞增殖活性方面与3H-Tdr掺入法结果相近。我们应用MTT法检测接种狂犬疫苗者的淋巴细胞转化以及狂犬疫苗激活淋巴细胞活性程度,获得初步结果。材料与方法 (一)标本来源:被犬咬伤以及注射不同针次疫苗的人群。(二)试剂仪器:RPMI1640培养液(日本),淋巴细胞分离液(上海试剂二厂);PHA(上海市医学化验所);MTT Fluka:(AG瑞士);人用组     

制备淋巴细胞转化标本的改进方法

淋巴细胞转化实验即淋．巴细胞的增殖反应，是测定免疫细胞功能及状态的一种方法。机体内淋巴细胞在受到抗原及有丝分裂原的特异或非特异的刺激后，导致细胞活化，细胞因子合成，细胞因子受体表达及活化的细胞发生增殖，可表示此群细胞在整体状态下的增殖能力，是免疫缺陷病诊断的主要依据，通过对其功能的研究，可为临床疾病(如Down综合     

MTT比色分析法的方法学探讨

本文以检测K562细胞增殖活性为例，对MTT法的实验条件进行了探讨，结果表明：20％SDS～50％DMF作甲溶解缓冲液效果最佳，其溶解的甲产物吸收峰为570nm波长。测定细胞范围800～400000／孔，能广泛地应用于多种细胞存活和增殖的测定。     

氟对淋巴细胞转化能力的影响

运用氟标记胸腺嘧啶检测氟暴露工人，氟染毒豚鼠，氟染毒培养人外周血淋巴细胞的转化能力，我们观察了氟对淋巴细胞增的影响。显示氟暴露工龄大于２０年的工人，氟染毒剂量为２０ｍｇ／ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，期为２个月的豚鼠及氟化钠剂量为５ｍｇ／ｍｌ或高于此剂量时，淋巴细胞转化能力明显肥抑制，这揭示氟对细胞免疫功能具有抑制作用。     

扩增结核分枝杆菌DNA的微孔杂交比色检测

目的建立简单的杂交方法特异地检测聚合酶链反应(PCR)扩增的结核杆菌DNA.方法用玻璃粉提纯结核分枝杆菌DNA,dUTP-脲DNA糖基化酶(UDG)防污染,用5'端标记生物素的引物进行PCR扩增,5'端带标记的扩增产物与固定在微孔板上特异探针杂交,然后用酶标链霉亲和素进行酶联免疫法检测.结果对100份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的痰标本检测,扩增杂交法检出40份阳性,比抗酸染色法(15/100),培养法(28/100)和PCR电泳法(35/100)检出率高,而50份来自无结核感染者的痰标本,几种方法检查均为阴性.结论该方法可灵敏、特异、客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌,比传统PCR-电泳法优越.     

结节性血管炎患者丝裂原刺激的淋巴细胞转化

以＾３ＨＴｄＲ掺入法和ＭｃＡｂ间接免疫荧光法检测结节性血管炎患者细胞免疫功能,为探索结节性血管炎的免疫学发病机理提供实验依据。结果表明：与健康对照组比较,结节性血管炎患者外周血、细胞数明显降低（Ｐ〈０．０１）,细胞百分率无明显变化（Ｐ〉０．０５）,而Ｂ＾＋细胞数增高（Ｐ〈０．０１）;ＰＨＡ、ＣｏｎＡ、ＰＷＭ丝裂原刺激的淋巴细胞转化能力均低下（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５）。提示结节性血管炎存在免疫功     

应用MTT比色分析法检测鼠干扰素(摘要)

MTT比色分析法是一种采用双波长比色分析的方法。MTT(3-(4,5-dimethyl-thiazohl-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,Switzerland.)是一种淡黄色四氮唑盐,在细胞线粒体内代谢成兰黑色的甲(月朁),其代谢量与细胞代谢功能成正比,通过测定代谢量的多少,就能定量区别增殖细胞和静止细胞,活细胞和死细胞。根据此原理我们     

介绍一种快速简便的淋巴细胞转化实验方法

淋巴细胞转化实验是体外检测细胞免疫功能的主要方法之一,早已成为临床和科研常规检测手段,尤其对肿瘤、移植、反复感及其应用免疫抑制剂患者的疗效判定,转归和预后估计更具有意义。淋巴细胞转化实验常用方法有3HTdR掺入法,MTT比色法和G—W染色法。前二种方法受条件限制而且实验周期转长,G—W染色法虽然应用