P16INK4a和Ki-67在宫颈癌前病变诊断中的意义

目的研究P16INK4a、Ki-67在宫颈癌前病变中的表达及早期诊断价值。方法宫颈活检标本92例,采用免疫组织化学PV-9000二步法检测宫颈鳞癌28例,CIN 45例（CINⅢ级17例、CINⅡ级7例、CINⅠ级21例）,炎性病变19例。结果在宫颈癌、CIN病变、宫颈炎P16INK4a的阳性表达率分别为100%、44.4%和10.5%,Ki-67的阳性表达率分别为100%、51.11%、21.05%,三组不同病变比较均差异有显著性（P〈0.001）。P16INK4a与Ki-67表达存在正相关（r2=0.893,P〈0.001）。结论 P16INk4a、Ki-67联合检测可以提高宫颈癌的早期诊断率。     

P14ARF、P16INK4a基因表达与高危型HPV感染的关系

目的探讨P14ARF、P16INK4a的基因表达与高危型人乳头瘤病毒DNA（HPVDNA）感染的关系。方法采用免疫组化EnVision法,对130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织进行P14ARF、P16INK4a蛋白基因检测,并采用原位杂交法检测130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织中的HPVDNA。结果宫颈鳞癌组中P14ARF、P16INK4a蛋白表达率分别为100．0％（130／130）和96．9％（126／130）;在60例宫颈上皮内瘤变组中其表达率分别为85．0％（51／60）、81．7％（49／60）;在20例正常宫颈组中其表达率分别为10．0％（2／20）、15．0％（3／20）,宫颈鳞癌组显著高于正常对照组（P〈0．01）;正常宫颈组与宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组P16INK4A和P14ARF的表达呈显著差异（P〈0．05）。HPV16／18在130例宫颈鳞癌中86例（66．2％）表达阳性;在宫颈上皮内瘤变中39例（65．0％）表达阳性;P14ARF、P16INK4a阳性率HPVI）NA阳性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组与HPVDNA阴性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组比较无显著差异（P〉0．05）。结论P14ARF、P16INK4a蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组织中呈高表达,有较高的特异性和敏感性,可作为宫颈癌前病变及宫颈癌的诊断指标,     

p16INK4A在宫颈细胞学中的辅助诊断作用

p16INK4A作为人乳头瘤病毒(HPV)活动的标志在宫颈高度病变中的表达阳性率高,且呈较强及弥漫表达.将p16lNK4A免疫组化染色检查方法和宫颈细胞学方法结合,可以增加细胞学诊断的准确性,因此可以更好地发现高危患者,指导其治疗和随访,尤其对于细胞学涂片为非典型鳞状细胞(ASCUS)的患者,可减少过度创伤性诊治和随访次数,有重要临床应用价值.     

P16INK4A在宫颈上皮内瘤变中的表达及与HPV感染的关系

目的 探讨抑癌基因P16INK4A在宫颈上皮内瘤变中的表达情况及其与HPV感染的相关性.方法 采用免疫组化染色法,对59例宫颈上皮瘤变(CIN)标本、30例病理检查为正常宫颈组织的标本进行检测.结果 CIN Ⅰ级组织中ILK表达阳性率62.50％、CIN Ⅱ～Ⅲ级为65.71％,均显著高于正常宫颈组织(23.33％),且差异均具有统计学意义(x2=8.472,P=0.004＜0.05;x2=11.675,P=0.001 ＜0.05);CIN Ⅰ级组织中ILK表达阳性率与CIN Ⅱ～Ⅲ级比较差异无统计学意义(x2=0.064,P =0.800 ＞0.05).P16INK4A在HPV16、HPV18 2种高危型宫颈HPV感染中的表达显著高于其他高危型或者低危型(HPV53、HPV58、HPV6).结论 P16INK4A在宫颈上皮内瘤变(CIN)中显著高表达,同时P16INK4A高表达可能与HPV16、HPV18的阳性表达具有协同作用.     

HIV阳性女性患者P16INK4a蛋白表达与HPV感染相关性分析

[目的]了解HIV阳性感染者宫颈脱落细胞P16INK4a蛋白表达与HPV感染的相关性。[方法]采用通用引物PCR和反向点杂交技术建立的检测方法,对182例HIV阳性感染者和300例HIV阴性感染者检测23种HPV亚型,包括18种高危型和5种低危型。同时采用免疫组织化学技术(S-P染色法)检测宫颈脱落细胞中P16INK4a蛋白表达情况。[结果]HIV阳性女性HPV感染率(36.8%)及P16INK4a蛋白阳性表达率(18.7%)较HIV阴性者(19.3%、4.3%)高(P均为0.000)。HIV阳性患者中,HPV感染阳性者宫颈脱落细胞P16INK4a蛋白表达率为43.3%,HPV阴性者4.3%(P=0.000);HPV多型感染者宫颈脱落细胞P16INK4a蛋白表达率(60.9%)较HPV单型感染者高(34.1%)(P=0.042);高危型HPV感染者宫颈脱落细胞P16INK4a蛋白表达率(80.6%)较低危型HPV感染者高(0)(P=0.000)。HIV阴性患者中,HPV感染阳性者P16INK4a蛋白阳性表达率(5.2%)较HPV阴性者(1.3%)高(P=0.721);所检HPV阴性患者均为单一HPV感染;高危型HPV感染患者P16INK4a蛋白阳性表达率(40.0%)较低危型(1.9%)明显增高(P=0.018)。[结论]HIV阳性女性中HPV感染阳性、多型HPV感染及高危型HPV感染宫颈细胞P16INK4a蛋白的表达率更高。     

p16INK4a对宫颈癌患者的早期筛查效果研究

目的 探讨p16INK4a对宫颈癌患者的早期筛查效果.方法 选取2017年10月至2019年10月间北京百子湾和美妇儿医院收治的80例宫颈癌患者,根据检测方式不同分为观察组和对照组,每组40例.对照组患者采用液基细胞学检测(LCT),观察组患者采用LCT联合p16INK4a检测,比较两组患者细胞学诊断结果与病理检测结果...     

P16INK4A和PTEN在高危型HPV相关宫颈癌组织中的表达及意义

背景与目的:高危型人乳头状瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)是宫颈癌最主要的致病因素,目前研究发现,在宫颈上皮癌变过程中,P16INK4A的异常表达和HR-HPV感染密切相关;同时,另一抑癌基因PTEN也参与了宫颈上皮肿瘤的形成.本研究旨在探讨宫颈上皮癌变过程中P16INK4A、PTEN表达与HR-HPV感染的关系及其意义.方法:应用免疫组织化学方法检测P16INK4A蛋白和PTEN蛋白在30例正常宫颈组织、11例原位癌、24例宫颈浸润癌组织中的表达.用第二代杂交捕获法(HC-2)检测每一病例的13种HR-HPV DNA.结果:HR-HPV和P16INK4A阳性率浸润癌组(91.7%、87.5%)和原位癌组(90.9%、81.8%)都明显高于正常宫颈组(30.0%、6.7%),差异有统计学意义(P＜0.001).P16INK4A过表达(中、强阳性)和HR-HPV阳性同时出现有30例,其中原位癌组9例,浸润癌组21例;两者同时阴性有23例,其中正常宫颈组20例,原位癌组1例,浸润癌组2例.相关性分析结果显示,HR-HPV感染与P16INK4A表达呈正相关(rs=0.690,P＜0.001).26例PTEN中、强阳性表达均在正常宫颈组,其阳性率在浸润癌组(37.5%)和原位癌组(36.4%)明显低于正常宫颈组(83.3%),差异有统计学意义(P＜0.01).相关性分析证实,HR-HPV感染与PTEN表达的相关性无统计学意义(rs=-0.174,P=0.167).结论:在HR-HPV感染的宫颈癌中,P16INK4A出现过表达,其蛋白的肿瘤抑制功能不明显;PTEN独立于HR-HPV途径,以其功能下调促进宫颈癌的发生、发展.     

HPV16 E7和Brn-3a在宫颈癌前病变中的表达及其意义

 目的研究HPV16E7和Brn3a在各级宫颈癌前病变(CIN)中的表达情况以及两者之间的关系,从分子生物学水平探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性,以期寻找新的宫颈癌前病变筛查方法。方法对71例患者行宫颈薄层细胞学检查(ThinprepCellTest,TCT),并在阴道镜下组织学活检,其TCT残留标本,用RTPCR法检测各标本中HPV16E7和Brn3a的表达。结果HPV16E7和Brn3a表达按细胞学分级和病理学分级其阳性率呈逐级增高趋势,差异均有显著性(P<0.0001)。两者作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的诊断标志物,其结果是一致的(P<0.05)。结论TCT残留标本适合进行RTPCR分析研究。HPV16E7可作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的生物标志物。Brn3a可作为可靠的CIN3生物标志物和HPV致癌基因转录活化的标志物。HPV16E7和Brn3a相互作用,可能为宫颈高度癌变发展的原因之一。     

P16INK4a及Ki-67免疫细胞化学检测对ASC-US中高级别病变检出的意义

目的：探讨液基细胞学剩余细胞标本P16INK4a、Ki-67免疫细胞化学染色检测宫颈癌前病变的价值。方法：选取2010年1月至2012年6月因宫颈疾病于北京大学第三医院妇产科就诊患者液基细胞学剩余标本50例。所有患者行高危型HPVDNA杂交捕获II代（HCII）检测,P16INK4a、Ki-67免疫细胞化学检测,同时行阴道镜检查及组织病理学活检。结果：以病理诊断将患者分为CIN2以下组和CIN2及以上组。CIN2及以上组P16INK4a及Ki-67表达量高于CIN2以下组,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;P16INK4a或Ki-67检测对高级别病变预测的准确性在ASC—US组中优于异常细胞学组;在ASC—US中,P16INK4a或Ki-67检测对高级别病变预测的准确性优于高危型HPV检测。结论：宫颈脱落细胞中P16INK4a或Ki-67免疫细胞化学检测相比于高危型HPV检测可以提高对ASC—US中高级别病变的检出作用。     

p16INK4a免疫细胞化学检测在筛查宫颈癌中的作用

目的 探讨p16^INK4a免疫细胞化学检测在筛查宫颈癌及其癌前病变中的作用。方法 选择220例宫颈液基细胞学剩余标本,制作液基薄片进行p16^INK4a 免疫细胞化学检测,随访组织活检结果,并与高危人乳头瘤病毒（HR—HPV）DNA检测结果进行对照。结果 p16^INK4a在宫颈细胞学诊断的鳞状细胞癌（SCC）、鳞状上皮内高度病变（HSIL）、鳞状上皮内低度病变（LSIL）、非典型鳞状细胞-小除外上皮内高度病变（ASC—H）和非典型鳞状细胞-不能明确意义（ASC—US）病例的阳性表达率分别为100．0％（7／7）、92．2％（107／116）、24．3％（17／70）、100．0％（14／14）和36．4％（4／11）。150例p16^INK4a阳性者中,111例有组织活检诊断,其中宫颈上皮内瘤变（CIN）2级及以上病变者97例（87．4％）;70例p16^INK4a阴性者中,18例有组织活检诊断,无一例CIN2及以上病变。p16^INK4a在CIN2及以上病变与在CIN1之间的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.01）,而HR-HPV DNA的阳性率在两者之间差异无统计学意义。结论 p16^INK4a在宫颈HSIL及以上病变中高表达,有利于高危病例的筛选。     

PML、P53和P16INK4A在肺癌中的表达及其与临床预后的关系

背景与目的 作为肿瘤抑制因子,早幼粒细胞白血病(PML)蛋白同P53和P16INK4A在肺癌中的表达关系、以及PML与肺癌临床预后关系不明.本研究旨在揭示三者在肺癌中的表达关系,以及与临床和预后之间的联系.方法 构建包含144例肺癌,12例肺良性肿瘤和正常组织的组织芯片,利用SP免疫组化检测蛋白表达.阳性率比较采用列联表法.Kaplan-Meier法用来估计生存差异,组间比较应用Log rank检验.Cox风险比例模型用来进行单因素和多因素生存分析.结果 PML在121例非小细胞肺癌(NSCLC)和23例小细胞肺癌(SCLC)细胞浆的表达率分别为14.0%和39.1%(P=0.010),在细胞核的表达率分别为31.4%和8.7%(P=0.026);PML阳性SCLC患者的5年生存率50%,显著高于阴性者的23%(P=0.047);多因素分析显示PML表达是SCLC预后的保护因素.P53在肺癌的阳性率为33.3%,在肺良性肿瘤和正常组织无表达(P=0.038);P16INK4A在肺癌(28.5%)尤其在分化低和未分化肺癌(36.5%)、SCLC(69.6%)中高表达.肺癌中PML细胞核表达与P16INK4A表达呈负相关,P53与P16INK4A在肺癌和腺癌的表达呈正相关,PML与P53在鳞癌的表达呈负相关.结论 作为肿瘤抑制因子,PML在鳞癌中与P53基因突变存在联系,并可能与P16INK4A共同成为SCLC的标记物;肺癌中高表达的P16INK4A蛋白可能是基因突变产物,与突变型P53蛋白存在相关性.     

p16INK4a在宫颈液基细胞学辅助筛查中的标记意义

目的 评价p16INK4a在宫颈液基细胞学检查中的标记意义.方法 收集74例宫颈外口和颈管的脱落细胞标本,分别进行液基细胞学检测和p16INK4a免疫细胞化学染色,并应用杂交捕获二代法检测高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染.结果 74例标本中,细胞学诊断未见癌细胞或癌前病变细胞(阴性)10例,意义不明的不典型鳞状细胞(ASC-US)15例,鳞状上皮内低度病变(LSIL)28例,不除外上皮内高度病变的不典型鳞状细胞(ASC-H)5例,鳞状上皮内高度病变(HSIL)11例,鳞状细胞癌(SCC)5例.各级别病变中,HR-HPV阳性者分别为1、4、3、9、7和5例,p16INK4a免疫细胞化学染色阳性者分别为2、5、3、8、9和5例.随着宫颈病变级别的上升,HR-HPV和p16INK4a免疫细胞化学染色阳性率均增高.结论 p16INK4a免疫细胞化学染色增强了对不典型细胞的区分能力,可以提高宫颈癌筛查的准确性.     

P16INK4Gene Mutations Are Relatively Frequent in Ampullary Carcinomas

A high incidence of gene mutations or deletions of P16INK4, a cell cycle regulator which inhibits the activity of cyclin-dependent kinase 4/cyclin D complex and blocks the Gl-to-S transition, has been reported in pancreato-biliary tract cancers. In order to investigate P16INK4 gene alterations in sporadic ampullary carcinomas, 17 sporadic ampullary carcinomas were examined. After histological diagnosis, DNA samples extracted separately from both cancerous and normal paraffin-embedded tissues were investigated. Loss of heterozygosity (LOH) was investigated utilizing 3 microsatellite markers on 9p21-22, and a mutationsl analysis was performed by cloning and sequencing. LOH was observed in 3 cases (17.6%) and somatic mutations with retention of heterozygosity were found in 7 cases (41.2%). Of note was that two mutations resulted in truncated incomplete proteins and one was a point mutation at the consensus site in the conserved ankyrin repeats, which would be crucial for function. Although two-hit inactivation was not evident in any of the mutation cases and further investigation would be needed to elucidate the role of altered p16INK4 , these results suggest that the pl6INK4 gene mutations are relatively frequent and its inactivation might be important in ampnllary carcinogenesis.     

P16INK4a as an adjunct marker in liquid-based cervical cytology

Cytological screening for cervical cancer is hampered by high false negative rates. Inter-observer reproducibility needs optimizing. The potential of p16(INK4a) as a biomarker for cervical lesions was examined in a study of liquid-based cytology (LBC), HPV DNA testing by MY09/MY11 consensus PCR and type-specific PCRs and p16(INK4a) immunocytochemistry on a series of 291 patients selected from routine screening. Comparison of the number of p16(INK4a) immunoreactive cells/1,000 cells exhibited a significantly higher mean count in HSIL (8.80 +/- 1.13) than other cytological groups. The mean count of LSIL (1.09 +/- 0.18) was significantly higher than that of the negative group (0.82 +/- 0.40). ASC-H and HSIL combined showed a significantly higher mean count (6.46 +/- 1.17) than negative, ASC, ASC-US and LSIL. The mean count of immunoreactive cells/1,000 cells was significantly higher in HPV16 positive samples (3.22 +/- 0.72) than in samples containing infections with types of unknown malignant potential (0.83 +/- 0.26) or HPV negative samples (1.17 +/- 0.41). The mean count in infections with other high-risk HPV types (2.55 +/- 0.52) was significantly higher than that in HPV negative samples. Receiver-operating characteristic curves yielded a test accuracy (area under curve) of 0.76, 0.79, 0.88 and 0.95 for ASCUS, LSIL, ASC-H/HSIL and HSIL, respectively. Thresholds for 95% sensitivity were at 0.005, 0.007, 0.098 and 0.445 immunopositive cells/1,000 cells for ASCUS, LSIL, ASC-H/HSIL and HSIL, respectively. The 95% specificity threshold for the detection of HSIL was at 1.87 immunopositive cells/1,000 cells. P16(INK4a) immunocytochemistry can be used as an adjunct to LBC in cervical screening, because it has a good diagnostic accuracy to discriminate HSIL and ASC-H from other lesions. It could be used as a surrogate marker of high-risk HPV infections.     

宫颈液基细胞学标本中p16^INK4A的表达

[目的]探讨p16^INK4A在新柏氏宫颈液基细胞学（TCT）标本中各级宫颈上皮内瘤变的表达，评价其在宫颈病变中表达的意义。[方法]采用Envision法，检测76例TCT标本及相应宫颈活检组织中p16^INK4A表达。[结果]在TCT中，P16^INK4A在无上皮内病变（NILM）、非典型鳞状细胞（ASC）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）、高级别鳞状上皮内病变（HSIL）阳性表达率分别为0、15．78％、45．45％、88％。在相应活检组织中，p16^INK4A在宫颈炎、CINI、CINⅡ、CINⅢ中阳性表达率分别为0、63．15％、89．28％、100％。p160^INK4A在TCT和相应活检组织中表达的符合率为91.23％。[结论]TCT标本的p16^INK4A表达检测可以提高宫颈高级别病变的检出率。     

p16INK4a downregulation is involved in immortalization of primary human prostate epithelial cells induced by telomerase

Prostate cancer is a major cause of cancer death among male population. Therefore, development of appropriate model systems is critical for understanding the molecular basis of prostate cancer progression. In this study, introduction of human telomerase (hTERT) into normal human prostate epithelial cells (PrECs) renders them higher telomerase activity, elongated telomere length and an extended proliferative lifespan. The immortal mass culture of PrEC-hTERT cell line with stabilized telomere length has been established using hTERT transfection. However, activation of hTERT alone appears to be insufficient for immortalization of PrEC cells because methylation of p16(INK4a) promoter has been found to be involved in the immortalization process. p53 was functionally intact and no mutations of p53 gene were identified in the immortalized PrECs. In addition, the immortal PrECs show a near diploid complement of chromosomes albeit a few reciprocal and non-reciprocal translocations are identified. They are anchorage dependent and do not form tumors in immunosuppressed host animals. Therefore, premalignantly transformed human PrECs provide a valuable model for prostate cancer research.