石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的 探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段.方法 采用石蜡切片进行脱蜡,修复抗原直接免疫荧光染色,将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较.结果 石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100%,而石蜡切片具有组织结构保存好,免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点.结论 石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段.     

肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色方法的再改良

探讨肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色再改良的方法,以提高石蜡切片的诊断准确率。方法选择2010年6-12月在北京大学深圳医院行肾组织活检确诊为肾小球疾病的患者44例,其中IgA肾病20例,狼疮性肾炎12例,膜性肾病12例。对其肾组织除常规冰冻切片直接免疫荧光染色外,对石蜡切片进行高温、高压修复和胃蛋白酶消化处理,再分别行免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C1q)、纤维蛋白(Fib)、HBsAg及HBcAg直接免疫荧光染色,比较石蜡与冰冻切片的直接免疫荧光染色结果。结果冰冻切片:肾小球数1～12个,平均5个;石蜡切片:肾小球数7～30个,平均15个。20例IgA肾病、12例狼疮性肾炎、12例膜性肾病患者的肾组织行冰冻(IgA、IgG、IgM、C3、C1q、Fib、HbcAg和HbsAg)直接免疫荧光染色时在不同荧光强度中所占比例与行石蜡直接免疫荧光染色比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论再改良的肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色是冰冻切片失败时较好的补救手段。其石蜡切片组织结构更清晰,免疫复合物沉积部位较冰冻切片更易判断。     

肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色结果的比较

目的:探讨冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对肾活检标本病理诊断的影响.方法:将40例肾活检标本制成并分为冰冻切片组和石蜡切片组,其中石蜡切片组用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色,比较两组切片免疫荧光染色结果.结果:石蜡切片组出现较多的假阴性结果和非特异性染色,与冰冻切片组相比,抗体IgG、IgA、C1q、C3的荧光强度均不同,差异有统计学意义.结论:肾活检标本石蜡切片用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色可能影响肾活检标本的病理诊断.     

石蜡切片免疫荧光染色在肾脏病理诊断中的应用

冰冻切片免疫荧光染色是肾脏疾病免疫病理学的常用检查方法,在肾脏病理诊断中起着重要作用.有时由于一些原因不能采用冰冻切片免疫荧光染色而影响诊断.我们利用微波加热及酶消化相结合的抗原修复技术,对肾活检组织的石蜡切片进行免疫荧光染色,弥补了此不足,取得了较好的效果.     

微小组织冰冻制片技术的改进

<正> 随着纤维内镜检查及各种内镜针吸等检查广泛开展,微小组织逐渐增多,目前多有用石蜡切片法、HE染色在光镜下观察并做出病理诊断。按照上述常规切片法和染色法,需时间较长,不能急时诊断。为满足病理快速和科研需要,提高微小组织冰冻切片的质量和染色速度,我们采用琼脂包埋微小组织进行冻切片,分别进行组织化学、免疫荧光染色、免疫酶染色和快速染色法弥补了微小组织冰冻制片之不足,现介绍如下。     

不同的抗原修复方法对肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色的影响

目的：探讨了不同的抗原修复方法对肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色的影响。方法选取该院30例肾活检标本作为研究对象,随机分成对照组与研究组,对照组采用冰冻切片方法,研究组采用石蜡切片方法,其中分成应用无抗原修复组、胰酶抗原修复组、高压加热抗原修复组,均进行免疫荧光染色。分析和对比研究组与对照组标本的免疫荧光染色结果。结果研究组中的胰酶抗原修复组与对照组的免疫荧光染色结果基本相同（P＜0.05）;研究组中高压加热抗原修复组的假阴性明显高于对照组（P＜0.05）,研究组中无抗原修复组的染色效果比对照组较差（P＜0.05）;两组所观察的有效肾小球数均≥3个,两组数据差异无统计学意义（P＞0.05）。结论冰冻切片的免疫荧光染色标本无肾小球的时候,可以采用胰酶抗原修复作为补救措施。     

囊壁样组织冰冻切片方法

目的 :探讨囊壁样组织冰冻切片方法。方法 :利用 OCT包埋剂对 15 2例不同种类囊壁样组织包埋进行冰冻切片。结果 :冰冻切片快速 ,组织结构完整 ,染色清晰 ,诊断准确。结论 :利用 OCT包埋剂对囊壁样组织包埋后进行冰冻切片能够较好解决此类组织冰冻切片。     

CD71和IgA在IgA肾病肾小球上共位表达分子研究

1材料和方法1.1分组2005年6月~2006年6月对78例肾活检患者,其中男40例,女38例,年龄20~55岁,分为2组:①IgA肾1.2方法1.2.1病理检查肾活检标本进行石蜡包埋,常规HE、PAS、Masson、PASM染色。冰冻切片直接或间接免疫荧光检查IgA、IgG、IgM、C3、C1q、FRA、HBsAg和HbcAg(均购自丹麦     

囊壁样组织冰冻切片方法

目的:探讨囊壁样组织冰冻切片方法.方法:利用OCT包埋剂对152例不同种类囊壁样组织包埋进行冰冻切片.结果:冰冻切片快速,组织结构完整,染色清晰,诊断准确.结论:利用OCT包埋剂对囊壁样组织包埋后进行冰冻切片能够较好解决此类组织冰冻切片.     

含有中肾旁管的小鼠胚胎组织石蜡切片制备

目的基于雌性小鼠胚胎连续石蜡切片进行中肾旁管定位,探讨制备高质量的含中肾旁管的小鼠胚胎组织切片的方法。方法正常孕15.5 d、17.5 d、19.5 d小鼠的胚胎,聚合酶链式反应(PCR)鉴定性别,取雌性鼠胚石蜡包埋,连续横断切片,每4张取1张行HE染色后获取连续切片图像。根据雌性小鼠胚胎生殖管道解剖走形,识别并定位中肾旁管。结果获取含不同发育天数中肾旁管的小鼠胚胎切片。结论利用石蜡包埋连续切片对中肾旁管进行解剖定位,是有效获得含中肾旁管的小鼠胚胎石蜡切片的方法。     

两种切片法对脊髓Ⅱ板层BDNF免疫组化反应的影响

目的：为比较不同组织切片方法对免疫组织化学结果的影响。方法：用成年SD大鼠L5脊髓分别制成冰冻（20μm）和石蜡（5μm）切片，用兔抗BDNF多克隆抗体作ABC免疫组化染色。结果：冰冻切片组背角Ⅱ板层除有大量BDNF阳性神经膨体外，尚可见一些阳性神经元，石蜡切片组则仅有大量阳性神经膨体，而几乎未见阳性神经元。结论：不同制片法对免疫组织化学结果有影响，即冰冻切片可能较石蜡切片具有更高的免疫反应敏感性。本文中石蜡切片较低的BDNF免疫活性可能与其制作过程中有机溶剂（酒精、二甲苯）的使用和/或包埋过程中加热处理所致的BDNF抗原丢失有关。     

区分肾淀粉样变类型的病理染色方法比较

目的分析3种特殊染色及免疫染色方法对区分肾淀粉样变类型的准确性、灵敏度和着色强度的影响,以提高临床的诊治
水平。方法选择30例肾淀粉样变患者的病理切片,采用3种酸化刚果红染色和5种抗原修复法,对轻链蛋白（κ、λ）、淀粉样蛋白
A等指标进行冰冻组织及石蜡组织的免疫荧光、免疫组化染色。使用IPP图像分析系统进行半定量分析及荧光着色半定量分
析,观察比较阳性部位着色的准确性、灵敏度和着色强度效果。结果酸化甲醇刚果红染色法优于酸化Bennhold’s刚果红染色
法、酸化Alkaland’s刚果红染色法,IPP半定量分析冰冻组织的免疫荧光、免疫组化优于石蜡组织（P=0.02）。荧光半定量分析着
色强度相差一个+左右;石蜡组织暴露抗原的方法中蛋白酶K消化优于抗原热修复、胰酶或胃酶消化（P=0.01）。结论酸化甲醇
刚果红染色法在肾组织淀粉样变部位的阳性着色准确性、灵敏度、着色强度和重复率均优于Bennhold’s 刚果红染色法、酸化
Alkaland’s刚果红染色法。起到初步分型及辅助验证免疫荧光染色结果的作用;进行冰冻组织轻链蛋白（κ、λ）及淀粉样蛋白A
免疫荧光染色,更有利于肾淀粉样变的准确分型,如果无冰冻组织也可选用蛋白酶K消化石蜡组织免疫荧光染色。
     

如何控制肾活检组织在冰冻切片中发生的冰晶

快速冰冻切片是手术过程中进行病理诊断的主要手段,也是肾活检组织学检查和免疫荧光检测的一个重要环节。但由于新鲜的组织未经任何固定处理,所以冰冻切片很容易产生冰晶,以致影响观察诊断和免疫荧光染色的效果。本实验目的是探讨一种能解决冰晶的方法和途径,对３５例肾活检组织,通过采用不同水溶液包埋剂和不同的方法制作冰冻切片,对其结果进行了对比观察。材料与方法　　１　材料：肾活检组织３５例。国产聚乙烯醇粉末。英国ＡＳ恒温冷冻切片机。挂蛋白载物片。２　２－５％聚乙烯醇（ＰＶＡ）生理盐水包埋剂,生理盐水１００ｍｌ,…     

165例小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术分析

目的 探讨肾穿刺技术对小儿肾病诊断上的价值.方法 对165例小儿肾病在B超引导下经皮肾穿刺活检,石蜡切片和冰冻切片,石蜡切片分别做HE、PAS、PASM、Masson染色,冰冻切片分别做IgG、IgM、IgA、C3、C1q及Fibrinogen染色.结果 石蜡切片的4种染色对比鲜明,各种病理改变清晰,肾小球数量充足≥10个.冰冻切片免疫荧光染色背景清晰,肾小球数量均≥5个,没有冰晶形成,荧光标记明确,所有病种可分别在病变相应部位找到团块状、线状或颗粒状的黄绿色荧光.结论 通过改进标本的处理方法能提高制片质量,明显提高肾病的诊断率.     

不同固定方法对冰冻切片间接免疫荧光结果的影响

目的：寻找一种冰冻切片间接免疫荧光染色以及HE染色过程中最佳的组织固定方法。方法：取健康成年小鼠双侧睾丸冰冻切片,分别采用3种方法进行固定：①丙酮4℃固定15分钟,-20℃保存24h;②95％酒精4℃固定15分钟,-20℃保存24h;③切片-20℃保存24h后,再用4℃丙酮固定15分钟。然后做间接免疫荧光和HE染色,观察组织结构及染色情况。结果：4℃丙酮固定的组织切片HE染色以及间接免疫荧光效果良好。-20℃保存24h后,4℃丙酮固定15分钟的冰冻切片HE染色和间接免疫荧光结果最差。结论：酒精和丙酮都可以固定组织,但是4℃丙酮固定效果最好。     

石蜡切片免疫荧光法在肾病穿刺组织中的应用

目的：探讨石蜡切片免疫荧光法检测肾病穿刺组织中免疫球蛋白等指标的最佳实验条件。方法：收集北京大学基础医学院病理学系的肾病穿刺组织标本45例,包括IgA肾病20例、膜性肾病15例、膜型乙肝病毒相关性肾炎10例,将组织标本用10%（体积分数）中性甲醛溶液固定、石蜡包埋、组织切片,在不同的抗原修复条件和抗体结合时间下,分别标记IgG、IgA、HBsAg、HBcAg,观察染色结果,并与其新鲜组织的免疫荧光染色结果相比较,评判石蜡切片免疫荧光法的应用价值。结果：热诱导抗原修复法修复后一步法和二步法染色均为阴性;蛋白水解酶消化法中胰蛋白酶优于胃蛋白酶,并以胰蛋白酶消化30 min、IgG和IgA 37 ℃温箱孵育90 min、HBsAg和HBcAg二抗37 ℃温箱孵育150 min染色结果最佳,与新鲜组织标本染色强度接近或略弱一些,阳性表达的方式也与后者相同,符合率100%。结论：经胰蛋白酶消化的石蜡切片免疫荧光法能够较好地应用于肾病穿刺组织诊断。     

国产半导体冰冻切片机在肾活检组织制片中的应用

国产半导体冰冻切片机在肾活检组织制片中的应用杨小燕，李全华，于建平，崔若兰我们试用简易的国产半导体冰冻切片机对２１例患者肾穿刺组织标本进行冰冻切片，全部切片均满足免疫荧光抗体染色检查的要求。现报告如下。１材料和方法１．１临床资料１９９４年４月至１９９...     

不同切片和染色技术在陶瓷支架体内植入中的组织学研究

目的探讨石蜡切片与硬组织切片及不同染色方法在体内组织工程研究中的应用。方法将大节段多孔生物陶瓷/聚乳酸复合支架植入犬4个不同的非骨部位,取材后分石蜡切片组和硬组织切片组做HE和M asson染色,在光镜下观察其组织学形态并做比较。结果石蜡切片组色彩鲜艳,可以清楚的观察到成骨细胞、类骨质等成分;硬组织切片组镜下观察未充分体现出其优越性。结论M asson染色是HE染色的有益补充,两者结合更有利于镜下组织形态学观察;硬组织切片工序多、难度大,质量控制尚需完善,在本实验研究中,石蜡切片仍是非常重要和有效的观察手段。     

冰冻及石蜡切片对脊髓背角Ⅱ板层BDNF免疫组织化学反应的影响(摘要)

为比较不同制片法对免疫组织化学结果的影响 .分别用成年ＳＤ大鼠Ｌ5脊髓制作冰冻 (2 0 μｍ)和石蜡 (5μｍ)切片 .用兔抗ＢＤＮＦ多克隆抗体作ＡＢＣ免疫组织化学染色 .结果 :石蜡切片组背角ＩＩ板层可见大量ＢＤＮＦ阳性神经膨体 ,几乎未见阳性神经元 .而冰冻切片组除大量ＢＤＮＦ阳性神经膨体外 ,还可见一些阳性神经元 .结果表明 :不同制片法对免疫组织化学结果有影响 .表明冰冻切片者可能较石蜡切片者免疫反应敏感 ,即前者对抗原保存较好 .而后者可能是石蜡包埋过程中因加热使一些抗原损失 .故冰冻切片者所含ＢＤＮＦ可能较石蜡包埋切片…     

不同因素对石蜡切片和冰冻切片ANAE的染色效果探讨

用大白鼠淋巴组织的石蜡切片和冰冻切片,探索不同因素(固定液、固定时间、染液 pH 值、孵育时间等)对 ANAE 染色效果的影响。结果显示石蜡切片和冰冻切片 ANAE 染色各有特点:石蜡切片较冰冻切片的染色定位准确,组织结构清晰,背景干净;但冰冻切片处理简便、快速,能较好地保存组织和细胞酶的活性,便于定性分析。