CD4+CD25highT细胞在小细胞肺癌患者外周血中的表达及意义

目的探讨CD4+CD25high调节(抑制)性T细胞在小细胞肺癌患者外周血中的表达情况及其意义.方法应用流式细胞技术检测40例初诊小细胞肺癌患者,18例CE及CAP方案交替化疗后完全缓解的小细胞肺癌患者外周血中的CD4+CDhighT细胞,计算它们占CD4+T细胞的比率.结果初诊小细胞肺癌患者CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的比率(6.69±2.32)%,高于健康对照组(4.13±1.25)%(P＜0.01);经化疗后完全缓解的小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的比率与初诊时相比无明显变化.结论小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25high调节T细胞占CD4+T细胞的比率增高,它们对小细胞肺癌患者具有免疫抑制作用.     

慢阻肺急性加重患者外周血单核细胞CD64，TLR2及TLR4水平表达与预后的关系研究

目的　研究慢阻肺急性加重（AECOPD）患者外周血单核细胞CD64和Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)与预后的关系。方法　将南京医科大学附属江苏盛泽医院2017.06~2020.06间收治的96例慢阻肺急性加重（AECOPD）患者纳为研究对象,同时将30例稳定期COPD患者纳为稳定组,30例健康志愿者纳为对照组。采集三组外周静脉血,检测单核细胞亚群CD64,TLR2和TLR4的表达水平,分析其与炎症标志物降钙素原（PCT）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞计数（WBC）及肺功能间的相关性,随访6个月,统计AECOPD组中再次急性复发的患者,绘制受试者特征工作曲线（ROC）,分析外周血单核细胞亚群CD64表达,TLR2和TLR4在AECOPD急性复发中的预测价值。结果　COPD组以及AECOPD组外周血CD64水平（32.69±6.43,39.69±7.79 vs 26.74±5.14）,TLR2水平（169.79±29.07,181.15±22.44 vs 140.03±28.74）以及TLR4水平（186.25±34.15,200.58±33.47 vs 153.65±35.14）均高于对照组,差异均有统计学意义（F=51.774,26.957,2.488,均P<0.05）,AECOPD组外周血CD64,TLR2以及TLR4水平均高于COPD组,差异具有统计学意义（t=4.466,2.249,2.037,均P<0.05）;随访6个月,96例AECOPD患者中共20例患者因再次急性复发入院,再次复发者首次入院时外周血TLR2（249.66±40.52 vs 163.21±35.64）、TLR4（253.66±36.85 vs 186.69±45.21）及CD64（53.69±13.58 vs 35.41±14.47）水平均高于无复发者,差异均有统计学意义（t=9.379,6.105,5.089,均P=0.000）。相关性分析提示,AECOPD患者外周血CD64与其吸烟史,IL-6,PCT水平呈正相关（r=0.36,0.33,0.31,均P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.45, P<0.05）。TLR2与其PCT水平呈正相关（r=0.34, P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.35, P<0.05）,TLR4与其他临床指标无相关性（r=0.07,0.11,0.13,0.13,-0.17,-0.23,-0.26,0.29, 均P >0.05）。绘制ROC曲线发现,血清CD64,TLR2及TLR4在预测AECOPD患者再次急性复发中均具有良好的应用效能,各指标单独应用时以TLR2应用效能最高,其AUC=0.805,95%CI(0.679~0.931),三指标联合应用的预测效能最高,AUC=0.833,95%CI(0.703~0.964)。结论　AECOPD患者外周血CD64,TLR2及TLR4水平均较COPD者明显升高,且其在预测患者半年内再次急性复发中具有良好的效能。     

白细胞介素-13与干扰素-γ在异位性皮炎患者血清中的表达及意义

【目的】探讨白细胞介素-13（IL-13）与干扰素-γ（IFN-γ）水平在异位性皮炎（atopic dermatitis,AD）患者血清中的表达及意义。【方法】采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测48例AD患者（观察组）治疗前和42例健康体检者（对照组）外周血中IL-13和IFN-γ水平并比较,采用糖皮质激素对AD患者进行治疗,检测治疗后3个月、6个月时IL-13、IFN-γ及其特异性IgE水平,并分析IgE水平与IL-13、IFN～7水平的相关性。【结果】观察组治疗前IL-13水平为（42．37±6．13）pg／mL,显著高于对照组（15．71±2．32）pg／mL,观察组IFN-γ水平为（45．59±7．07）pg／mL,显著低于对照组（73．14±5．28）pg／mL,其差异均有统计学意义（P〈0．05）。观察组糖皮质激素治疗3个月后IL-13水平明显低于治疗前（P〈0．05）,IFN-γ高于治疗前（P〈0．05）,而6个月时这两个指标与3个月时比较差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗前后IL-13、IFN-γ水平变化均与IgE成明显的相关性（P〈0．05）。【结论】AD患者外周血中IL-13较健康者显著增高,而IFN-γ显著降低,且两种指标与特异性IgE水平呈明显相关,推测其IL-13、IFN-γ变化可能与AD发病机制有关。     

原因不明反复自然流产患者外周血TLR2、TLR4表达及CD4+ CD25+ Treg细胞的变化

目的探讨原因不明反复自然流产(URSA)患者外周血TLR2、TLR4的表达及CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞变化的关系。方法用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测35例URSA患者、24例妊娠孕妇外周血单个核细胞(PBMC)中TLR2、TLR4mRNA及其蛋白质的表达;流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例,并分析表达TLR2、TLR4蛋白与CD4+CD25+Treg细胞的相关性。结果 URSA组PBMC中TLR2、TLR4 mRNA分别为0.52±0.04、3.26±1.37;表达TLR2、TLR4蛋白的PBMC比例分别为(32.36±4.18)%、(41.29±3.67)%;与妊娠对照组相比,URSA组外周血TLR4 mRNA及表达TLR4蛋白的PBMC比例差异显著(t分别为19.84和21.85,P均<0.05);URSA组CD4+CD25+Treg细胞的比例为(2.75±0.62)%,显著低于妊娠对照组的(5.17±0.65)%,差异有统计学意义(t=48.40,P<0.01);URSA患者表达TLR4蛋白的PBMC与CD4+CD25+Treg细胞的比例降低呈显著相关(r=0.724,P<0.05)。结论 URSA患者外周血中低表达的CD4+CD25+Treg细胞、高表达的TLR4可能参与了URSA的发生。     

外周血CD14+单核细胞Toll样受体2表达在肝硬化并发感染患者的诊断价值

目的 探讨外周血CD14+单核细胞Toll样受体2(TLR2)表达在肝硬化并发感染患者的诊断价值.方法 选择我院诊治的104例肝硬化患者为研究组,根据是否感染分为感染组和未感染组,选取同期健康体检者96例为对照组.检测所有研究对象的外周血CD14、TLR2的表达及降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,...     

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和TLR4表达的影响

目的探讨糖皮质激素对哮喘小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatory T cells,Tr）及Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法将雌性BALB/c小鼠30只按随机数字表法分成正常对照组（NS）、哮喘组（OVA）和哮喘糖皮质激素治疗组（OVA/GC）制备动物模型,每组10只。取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;同时应用流式细胞检测技术检测各组小鼠脾单个核细胞CD4＋CD25＋Tr占CD4＋T细胞的百分率及CD4＋CD25＋Tr上的TLR4平均荧光强度。结果哮喘小鼠脾单个核细胞CD4＋CD25＋Tr百分率明显降低（P〈0.01）,但该细胞上表达的TLR4平均荧光强度值与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;经糖皮质激素治疗后哮喘小鼠CD4＋CD25＋Tr百分率和该细胞上表达的TLR4平均荧光强度均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论糖皮质激素可促进哮喘小鼠CD4＋CD25＋Tr数量的增加及TLR4的表达,可能是治疗哮喘的免疫学机制之一。     

Toll样受体4在强直性脊柱炎患者外周血白细胞中的表达及临床意义初探

目的：探讨Toll样受体4（Toll-likereceptor 4,TLR4）在不同人群外周血白细胞的差异表达及其在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,As）中的意义。方法：应用流式细胞术检测60例AS患者及40例健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞TLR4的表达。结果：TLR4在外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞均有表达,以单核细胞表达为主;HLA-B27阳性和阴性AS患者外周血3种细胞TLR4的阳性表达率均明显高于对照组（P〈0．001）,但两者之间并无显著差异。结论：TLR4主要表达于外周血单核细胞,但AS患者外周血3种细胞表达均上调,这种上调与HLA-B27阳性与否无关,提示TLR4信号通路的异常与AS的发病相关。     

大肠癌患者外周血CD44和CD54的表达及临床意义

目的：探讨大肠癌患者外周血CD44、CD54的表达及临床意义。方法：采用流式细胞术对40例大肠癌患者及20例良性病变组、20例正常对照组外周血CD44、CD54的表达水平进行检测。结果：大肠癌患者外周血CD44、CD54的表达水平显著高于良性病变组及正常对照组（P〈0．05）；大肠癌患者外周血CD44和CD54的表达水平与淋巴结转移和临床分期相关；良性病变组与正常对照组比较差异无显著性。结论：外周血CD44及CD54的表达与肿瘤转移密切相关，为肿瘤的发生、发展及预后判断提供依据。     

隐球菌性脑膜炎患者外周血中TLR4的表达以及血清中TNF-α,IL-10的水平研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）在隐球菌性脑膜炎患者外周血中的表达,以及研究血清中TNF—α,IL-10的变化情况。方法收集25例隐球菌性脑膜炎患者和25例健康体检者全血,采用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测TLR2,TLR4的mRNA表达。ELISA法检测血清中TNF—α,IL-10的表达。结果隐球菌性脑膜炎患：者TLR4 mRNA的表达显著低于对照组（0．35&#177;0．18）（P〈0．05）,TLR2均无显著变化（0．87&#177;0．23）（P〉0．05）。血清中的IL-10显著升高（4．25&#177;1．30）pg／ml（P〈0．05）,TNF—α的变化不显著（1．49&#177;0．87）pg／ml（P〉0．05）。结论隐球菌性脑膜炎患者TLR4 mRNA表达显著下降,可能在隐球菌性脑膜炎的发病过程中起一定的作用。     

脓毒症患者CD14+单核细胞人类白细胞抗原-DR表达的观察

目的 通过研究脓毒症患者静脉血CD14^＋单核细胞人类白细胞抗原-DR（HLA—DR）表达百分率的变化，评价患者的免疫状态及与疾病的严重程度和预后的关系。方法在患者被诊断为脓毒症后的第1、4、7、14、28天或出ICU及死亡前最后一次抽取静脉血，用流式细胞仪测定CD14^＋单核细胞HLA—DR表达百分率及当天的APACHEⅡ评分和SOFA评分，至脓毒症消失。结果18例患者存活，26例死亡。从第4天开始，存活组CD14^＋单核细胞HLA—DR表达均高于死亡组（P〈0．001）。第1天、第4天CD14^＋单核细胞HLA—DR表达〉30％者生存率均明显高于表达〈30％者。CD14^＋单核细胞HIA—DR表达与APACHEⅡ评分、SOFA评分均存在负相关。结论脓毒症患者CD14^＋单核细胞HLA—DR表达持续低下可提示患者处于免疫抑制状态。检测CD14^＋单核细胞HIA—DR表达可用于判断脓毒症患者病情的严重程度和评估预后。     

特应性皮炎患者外周血Th17细胞比例及不同细胞因子微环境对其分化的影响

目的探讨Th17细胞在特应性皮炎(AD)发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例AD患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR(real-timeRT-PCR)检测PB-MC中Th17细胞相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23和TGF-βmRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中上述细胞因子的含量;同时以34例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。分离AD患者PBMC体外培养,加入不同细胞因子微环境,观察其对Th17细胞数量及特异性转录因子RORγt表达的影响。结果 AD患者外周血Th17细胞比例(CD4+IL17+T细胞/CD4+T细胞%)显著高于正常对照者(P<0.01)。PBMC中IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量均显著高于正常对照者(P<0.01),PBMC中TGF-βmRNA表达水平及其血清中含量与正常对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AD患者PBMC在不同细胞因子微环境中培养,IL-1β+IL-23+IL-6处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达最高,TGF-β处理组表达最低,与其余处理组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平低于IL-1β+IL-23+IL-6处理组,高于TGF-β处理组和未处理组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 AD患者外周血Th17细胞比例及相应促分化细胞因子表达水平升高,IL-1β+IL-23+IL-6对Th17细胞具有明显的促分化作用,Th17细胞在AD发病机制中发挥作用。     

类风湿性关节炎患者外周血单核细胞TLR2的表达及意义

目的：观察类风湿性关节炎（RA ）患者外周血单核细胞 Toll样受体2（TLR2）的表达变化,探讨其在类风湿性关节炎发病中的作用。方法采用流式细胞术检测外周血单核细胞表面 TLR2所表达的平均荧光强度,应用独立样本t检验对检测结果进行统计学处理。结果 RA 患者外周血 CD14＋CD45＋细胞表面 TLR2的平均荧光强度为357.68±86.97,正常人对照外周血单核细胞表面TLR2的平均荧光强度为223.71±87.70,活动期 RA患者外周血单核细胞 TLR2的表达水平高于正常对照（t＝5.478,P＝0.005,P＜0.01）。结论活动期RA患者外周血单核细胞TLR2表达增高,提示其在 RA发病机制中可能有重要作用。     

类风湿性关节炎患者早期外周血单个核细胞Toll样受体2、4表达及意义

目的探讨类风湿性关节炎(RA)早期患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLR)2、TLR4对其配体双糖链蛋白多糖(BGN)、脂多糖(LPS)的刺激反应性,阐明PBMC TLR2、TLR4在RA疾病早期中的作用。方法采用流式细胞术、实时荧光定量逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测BGN和LPS刺激前后,RA组和健康对照组外周血CD14+单核细胞TLR4+细胞频率、PBMC TLR2 mRNA和TLR4mRNA及上清液白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量变化。结果 RA早期患者TLR2 mRNA明显升高、TLR4 mRNA下降(P<0.01);经LPS刺激后,RA患者TLR4 mRNA升高3.50倍,而健康对照组下降到0.11倍;LPS和BGN促进了各组PBMC产生IL-6、TNFα,但RA早期患者组上升的倍数明显高于健康对照组。结论 PBMC TLR2、TLR4参与早期RA的发生、发展。     

TLR4在肾移植受者中的表达及其临床意义

目的:研究肾移植患者术后早期外周血单核细胞中Toll样受体4(TLR4)的表达改变及其与急性排异反应的关系.方法:首次接受肾移植手术受者60例,流式细胞术测定受者肾移植术前及术后第7、14、21天外周血单核细胞TLR4、CD80表达的百分率;根据肾移植术后两周内发生排斥与否将患者分为排斥组(13例)和非排异组(47例).20例健康成年志愿者标本为正常对照组.急性排异反应诊断标准依据临床表现、实验室检查、超声及移植肾穿刺活检等综合判断.结果:术前外周血单核细胞中TLR4、CD80即有表达,TLR4与对照组相比有统计学意义;术后1周两者表达到达顶峰,其后逐渐下降,排斥组外周血单核细胞TLR4、CD80表达峰值较肾功能正常组明显升高(P＜0.05),且持续时间较长.结论:TLR4、CD80在肾移植术后早期表达升高,并可增加肾移植术后急性排斥反应发生的风险.     

Toll样受体4在妊娠期糖尿病患者外周血和胎盘组织中的表达及意义

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者外周血和胎盘组织中Toll样受体4(TLR4)的表达及其意义。方法选取2013年2月至2015年2月该院收治的30例妊娠期糖尿病产妇作为GDM组,以及同期体检健康的30例产妇作为健康组。采集2组产妇外周血和胎盘组织,采用RT-PCR法检测外周血单个核细胞TLR4mRNA表达,采用免疫组化检测胎盘组织TLR4蛋白表达。结果 GDM组(0.63±0.12)外周血单个核细胞TLR4mRNA相对表达量明显高于健康组(0.32±0.07),差异有统计学意义(t=12.223,P0.05)。GDM组胎盘组织绒毛滋养细胞、脱膜细胞和羊膜上皮细胞中TLR4蛋白表达明显高于对照组(Z=2.325、2.374、2.162,P0.05)。结论妊娠期糖尿病患者外周血单个核细胞,以及胎盘组织绒毛滋养细胞、脱膜细胞和羊膜上皮细胞中TLR4表达明显增强,推测TLR4可能与GDM的发病有关。     

检测隐球菌患者外周血中Toll样受体4的表达及临床意义

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在隐球菌性脑膜炎患者外周血中蛋白的表达.方法:收集30例隐脑患者和30例健康体检者全血,采用流式细胞术检测TLR4的蛋白表达,ELISA法检测血清中IL-12、IL-4的表达,并用免疫散射法检测血清IgG、IgA、IgM的含量,并分析TLR4与它们的相关性.结果:隐球菌性脑膜炎患者TLR4蛋白表达显著低于对照组(P＜0.05),且TLR4蛋白表达水平与IgG、IL-12显著相关(分别为r=0.436 9、P＜0.001,r=0.534 4、P＜0.001),与IL-4(r=0.0111,P=0.6168)不相关.结论:隐脑患者TLR4蛋白表达显著下降,IgG、IL-12与TLR4蛋白的变化具有一定的相关性,为我们进一步研究隐脑的致病机制打下基础.     

TGFB1和TLR4 mRNA在糖尿病肾病患者外周血单核细胞中的表达及其与病情严重度的关系

目的分析转化生长因子B1(TGFB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA在糖尿病肾病(DN)患者外周血单核细胞中的表达及其与病情严重度的关系。方法选取186例2型糖尿病患者为研究对象,根据2型糖尿病诊断及DN诊断、临床分期参考标准将其分为单纯2型糖尿病组(A组)、早期DN组(B组)、临床期DN组(C组)、肾衰竭期组(D组),同时选取60例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组患者外周血单核细胞TGFB1和TLR4 mRNA的表达水平。结果⑴单因素方差分析显示,各组研究对象外周血单核细胞TLR4、TGFB1 mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P0.05)。进一步两两比较显示,外周血单核细胞TLR4、TGFB1 mRNA表达水平,D组显著高于C组、B组、A组、对照组(P0.05),C组显著高于B组、A组、对照组(P0.05),B组患者显著高于A组、对照组(P0.05),A组患者显著高于对照组(P0.05)。⑵DN患者外周血单核细胞TLR4、TGFB1 mRNA表达水平与血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG),全血糖化血红蛋白(HbAlc)等指标呈显著正相关(P0.05),与血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLC),估算肾小球滤过率(e GFR)等指标呈显著负相关(P0.05),与年龄、体重指数、收缩压、舒张压、病程等指标无显著相关性(P0.05)。⑶血清LDL-C、FBG、HbAlc,外周血单核细胞TLR4、TGFB1 m RNA是DN发生发展的独立危险因素(P0.05),血清HDL-C是DN发生发展的独立保护因素(P0.05)。结论 DN患者外周血单核细胞TGFB1、TLR4 mRNA呈高表达状态,且患者病情越严重,两者表达水平越高,它们是影响DN发生发展的独立危险因素。     

白癜风患者外周血单个核细胞中TLR7、TLR9、NF-κB的表达及意义研究

目的探究白癜风患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体9(TLR9)、核因子-κB(NF-κB)的表达情况及其意义。方法前瞻性选取2017年4月至2018年4月沈阳市第七人民医院收治的33例白癜风患者作为观察组,33例同期健康体检者为对照组。使用流式细胞仪检测两组PBMC中的TLR7、TLR9表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组PBMC中的NF-κB表达情况。结果流式细胞仪结果显示,观察组患者PBMC中的TLR7表达量为(94.65±3.931)%,高于对照组的(92.84±3.52)%,但差异无统计学意义(P0.05);而观察组患者PBMC中的TLR9表达量为(86.68±11.01)%,低于对照组的(90.75±5.74)%,但差异无统计学意义(P 0.05); PCR反应结果显示,观察组患者PBMC中的NF-κB mRNA表达量为(0.96±1.52),高于对照组的(0.24±0.35),差异具有统计学意义(P 0.05)。结论白癜风患者PBMC中TLR7表达过量,TLR9则低表达,但与正常健康者的表达情况未见较大差异,而该信号通路的信号分子NF-κB表达量远高于正常健康者,推测TLR7、TLR9、NF-κB的表达与白癜风可能存在一定的关系,但具体机制需进一步探寻。     

急性脑梗死患者外周血单核细胞TLR4表达及其与TpP、Fn的相关性研究

目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者外周血单核细胞Toll样受体4 (TLR4)的表达及其与血栓前体蛋白(TpP)和纤维连接蛋白(Fn)的相关性及临床意义.方法 以79例ACI患者作为脑梗死组,以30例健康体检者作为健康对照组,采用流式细胞术检测外周血中单核细胞TLR4的表达,用ELISA法测定血浆TpP、Fn水平.结果...