黄鳝藤黄微球菌的分离鉴定及药敏试验

为探讨黄鳝(Monopterus albus)出血病病原菌的种类及耐药情况,采用动物回归和细菌常规分类鉴定方法及16S rDNA基因系统发育学分析等手段,从四川名山地区黄鳝出血病病料中分离到具有致病性的菌株(HM₁),经人工感染实验证实该菌为黄鳝出血病的病原菌。动物致病性试验显示,该分离株对泥鳅和小白鼠不致病,对云斑有较弱的致病力。对该分离株的形态和生理生化指标进行分析,试验结果与报道的藤黄微球菌一致,为革兰氏阳性、球菌,无运动力,多成双、四联或簇状排列,不形成链状排列,不形成芽孢;接触酶和明胶液化阳性;乳糖、甘露醇、葡萄糖、七叶苷、硝酸盐还原、精氨酸双水解阴性等特征。采用细菌16S rDNA基因通用引物对该菌的16S rDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1 382 bp的核苷酸序列(GenBank登录号为：HM044913)。该序列经RDP (Ribosomal Database Project)数据库在线Classifer分析,结果表明该菌株属于微球菌属细菌。以该菌16S rDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列进行同源性比对分析和构建系统发育树,结果显示分离菌(HM1)与微球菌属的藤黄微球菌菌株的同源性高达99%,且在系统发育树上与其他不同来源的藤黄微球菌聚为一支。结合形态及生理生化特点将其确定为藤黄微球菌(Micrococcus luteus)。24种药物的药敏试验结果显示,该分离株对诺氟沙星、头孢唑啉、羧苄西林等18种药物敏感;对复达欣中度敏感;但对萘啶酸、加替沙星、磺胺异恶唑等5种药物耐药。     

藤黄微球菌致败血症7例及脓肿1 例

目的：报道藤黄微球菌致败血症7例及脓肿1例。方法：从患者血液及脓液中分离出菌株并作菌株鉴定和药敏试验。结果：从7例败血症患者中分离菌株7株，脓液中分离出1株，均鉴定为藤黄微珠菌。7例败血症治愈6例．死亡1例。结论：藤黄微球菌可致人体败血症和严重感染。     

黄鳝出血病病原菌的分离鉴定及药敏试验

通过对患出血病黄鳝（Monopterus albus）的血液进行常规细菌学检查、病原菌的形态观察及生理生化特性分析,结果表明：该病原菌为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）。回归感染试验和药敏试验结果表明：该病原菌对四环素、氯霉素、诺氟沙星和强力霉素高度敏感,对青霉素、安卡西林、头孢菌素耐药,对妥布霉素、新霉素、氧氟沙星、多粘菌素、庆大霉素、克林霉素、卡那霉素、先锋霉素Ⅵ号和红霉素、复方新诺明呈现出不同程度的敏感性。因此,四环素、氯霉素、诺氟沙星和强力霉素可作为治疗此病的备选药物。     

藤黄微球菌检测氧氟沙星残留方法的研究

通过制备藤黄微球菌菌悬液,选择最适菌层浓度,运用统计方法及精密度实验来制备标准反应曲线,建立氧氟沙星的残留检测方法,并进行了粪便中氧氟沙星的残留检测。结果表明,氧氟沙星在磷酸盐缓冲液中的最低检测限为0．5μg／mL,标准曲线的工作范围为0．5～8．0μg／g;在鸡粪便中添加氧氟沙星1．000μg和2．000μg／g的回收率分别为81．92±9．09和84．85±9．04。表明该方法灵敏度和回收率高,操作简便,不需特殊设备,样品用量少,易于推产话用干氢螽油厚酌窜号奔析．     

藤黄微球菌AD3的阿特拉津降解基因检测与分析

为了获得高效稳定的阿特拉津基因,分离出更多的阿特拉津降解菌,试验采用PCR基因扩增和氮源利用方法,对AD3菌株的阿特拉津降解基因进行了检测和测序,并与其他菌株阿特拉津降解基因的序列进行了比较。结果表明：Micrococcus luteus AD3菌株含有阿特拉津降解基因trzN,atzB,atzC和atzDEF。其中trzN基因中心区的序列与Arthrobacter sp.TC1的trzN完全相同,atzB和atzC基因中心区的序列与Pseudomonas sp.ADP的atzB和atzC完全相同。AD3菌株能以氰脲酸为唯一氮源生长,Micrococcus luteus AD3菌株能将阿特拉津彻底降解成CO2和NH3。     

黄鳝白头病病原菌的分离鉴定及药敏试验

对患白头病黄鳝(Monopterus albus)的肝和肾进行了常规细菌学检查以及病原菌的形态观察和生理生化特性分析,结果表明:该病原菌为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。回归感染试验和药敏试验结果表明:该菌株对头抱曲松、氟哌酸、复方新诺明3种药物高度敏感,对氧氟沙星、氨苄西林、乙酰螺旋霉素、四环素、青霉素、强力霉素6种药物耐药。因此,头抱曲松、氟哌酸和复方新诺明应作为治疗此病的备选药物。     

黄鳝出血病研究进展

黄鳝出血病是黄鳝(Monopterus albus)养殖中频发的一种细菌性疾病,其暴发速度快、传染力强、死亡率高,给黄鳝养殖业带来巨大经济损失。本研究对关于嗜水气单胞菌的生物学特性、鉴定方式、分子生物学与生理生化学研究进展以及黄鳝出血病常见的预防和治疗措施等进行了综述,并在对目前黄鳝出血病防控过程中出现的问题和未来发展趋势进行了总结。     

猪链球菌的分离鉴定及药敏试验

郑州市南郊某猪场发生一起临床症状、剖检病变疑似猪链球菌病病例,经病原分离鉴定后,实验室确诊为猪链球菌病。药敏实验表明链球菌对头孢菌素、青霉素、卡那霉素等高度敏感。     

链球菌的分离鉴定及药敏试验

为分离和鉴定疑似链球菌感染病料,该试验采用革兰氏阳性菌选择性培养基进行分离培养,并进行生化试验鉴定及药敏试验。结果表明:6份病料中分离出6株链球菌菌株,根据生化试验鉴定表推断出,有4株为C群,1株为D群,1株为E群。药敏试验结果表明,先锋必和青霉素对链球菌有较好的抑制作用,此结果为链球菌病的研究和防治提供一定的理论依据。     

沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

本实验为了探明某猪场患病猪感染病原菌情况,并进行药敏试验,从某猪场患病猪体内分离出的一株沙门氏菌,对其进行生化鉴定及药物敏感性试验。在选择性培养基上筛选出疑似沙门氏菌,再进一步做了镜检、三糖铁及生化试验,该菌在麦康凯培养基上呈无色菌落;SS琼脂上呈中心发黑的无色菌落;在三糖铁琼脂上能发酵葡萄糖和乳糖并产生H2S。生化特征符合猪霍乱沙门氏菌。结果该菌为猪霍乱沙门氏菌。体外药敏试验结果表明,分离菌株对链霉素、庆大霉素、多粘菌素B、诺氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星敏感。     

黄鳝抗菌肽hepcidin基因cDNA的克隆及表达分析

根据已知鱼类抗菌肽hepcidin的同源性设计简并引物,利用同源克隆结合RACE法从黄鳝(Monopterus albus)肝脏中扩增得到了黄鳝hepcidin基因全长cDNA序列(GenBank accession number FJ436808).结果表明,黄鳝hepcidin基因cDNA全长712 bp,5′端非翻译区有133 bp,3′端非翻译区有306 bp,包含1个273 bp的开放阅读框,编码1个长90氨基酸的前体肽.同源性分析表明,黄鳝hepcidin推测的氨基酸序列与其他鱼类报道的hepcidin具有较高的同源性,并具有8个半胱氨酸这一典型特征,是hepcidin家族的1个新成员.采用半定量PCR法对该基因在健康成体不同组织的转录本和脂多糖(LPS)对该基因表达的影响进行了分析.结果发现,该基因在肝脏中表达量最高,其次是肾脏,在心脏、皮肤、脑、血液、小肠、脾脏和胃中的表达量较低,而在肌肉中没有检测到该基因的转录本;LPS注射24 h后,各组织的hepcidin基因表达量都有明显升高.     

黄鳝肌肉矿物元素的分析

本文对黄鳝的幼鳝(体重62.3-76.0g)、小成鳝(体重108.3-121.4g)和大成鳝(体重222.8-242.8g)肌肉中的矿物元素的组成进行了分析.结果表明:黄鳝肌肉中含有20种以上的矿物元素.具有重要生理功能的硒等微量元素含量较丰富.含量为0.038mg/100g.本研究在分析与比较的基础上评价了黄鳝矿物元素的营养价值.     

黄鳝对饲料中胆碱的需要量

用添加胆碱含量为0、0 1%、0 3%、0 5%、0 8%、1 0%、1 2%、1 5%和2 0%(均为质量分数)的配合饲料,在水泥池中(2m×6m×0 8m)饲养黄鳝,试验时间为90d。结果表明,随着饲料中胆碱含量的增加,黄鳝的生长加快,饲料系数降低,肝体指数减小;当饲料中胆碱添加量为0 8%～1 2%时,黄鳝的生长率最高,饲料系数最低,肝体指数、肝脏脂肪含量较小,与用动物饵料养殖的效果基本接近。这表明黄鳝饲料中胆碱的添加量不应少于0 8%,以0 8%～1 2%为宜。     

黄鳝性逆转相关基因的克隆和表达

运用cDNA末端快速扩增(Rapid-Amplification of cDNA Ends,RACE)技术和半定量RT-PCR技术,克隆了黄鳝(Monopterus albus)性腺差异表达基因(F64)的cDNA全长序列,分析了该基因于各期性腺组织的表达情况。结果表明,F64基因cDNA全长1 721 bp,含有142 bp的5’-UTR、268 bp的3’-UTR、1 311 bp的开放阅读框(ORF),共编码436个氨基酸;在线SignalP分析表明,F64亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F64在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅴ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。     

黄鳝不同生长阶段消化器官及其消化酶的变化

选取野生黄鳝的稚鳝12尾（体重22．25－25．95g)，幼鳝9尾（体重64．65－78．89g)，成鳝6尾（体重207.16-224.16g)，对不同生长阶段的黄鳝分别随机分为3个重复，在实验室内饥饿24h，解剖并取出黄鳝的胃，肠和肝脏分别称重，并测量肠的长度，然后分别取一定量胃，肠和肝脏匀浆，制取上清液测定酶活力，结果显示，不同生长阶段黄鳝的胃重／体重基本一致，黄鳝的肠长／体长指数从稚鳝到成鳝有下降的趋势，不同生长阶段的肝脏指数相互之间差异显著（P＜0．05），稚鳝与成鳝肝脏指数相关极显著（P＜0．01），幼鳝胃蛋白酶活力高于其他阶段，但差异不显著（P＞0．05），稚鳝与幼鳝的肠蛋白酶活力基本一致，但与成鳝相比差异显著（P＜0．05），肝脏蛋白酶活力随黄鳝的长大而增加，但相互之间差异不显著（P＞0．05），稚鳝，幼鳝，成鳝的肠道淀粉酶活力相互之间差异显著（P＜0．05），其中稚鳝和成鳝差异极显著（P＜0．01），稚鳝和幼鳝的肠脂肪酶与成鳝相比差异显著（P＜0．05），但稚鳝与幼鳝之间差异不显著（P＞0．05），稚鳝的肝脏淀粉酶活力与幼鳝，成鳝相比差异显著（P＜0．05），但幼鲜与成鲜之间的肝脏淀粉酶活力差异不显著（P＞0．05），3个不同阶段黄鳝的肝脏脂肪酶活力差异也不显著（P＜0．05）。     

黄鳝网箱养殖技术

总结黄鳝网箱养殖技术,包括鳝苗挑选、水质控制、鳝苗运输、放养密度、饲料管理以及水蛭防治等方面内容,以提高黄鳝养殖水平。     

黄鳝皮肤白蛋白的纯化及性质

通过阴离子交换层析和凝胶过滤层析,从黄鳝(Monopterus albus)皮肤中得到其白蛋白,命名为MAA-skin.该蛋白为单链蛋白质,相对分子质量为67 ×103,经Schiff's试剂鉴定为非糖蛋白,其N-末端氨基酸序列为GHVKW.用纯化的黄鳝血清白蛋白(MAA -serum)为免疫原免疫大白兔,制备抗MAA...     

名特水产养殖对象黄鳝免疫基因的研究现状

通过检索黄鳝核苷酸序列,分析黄鳝已经克隆出的免疫相关的基因.主要免疫基因有MHC、细胞间粘附分子、硒蛋白、肝抗菌肽、补体成分等;与疾病相关的酶类有弹性蛋白酶、醛缩酶、肽基脯氨酰异构酶等;Y-box结合蛋白、抗增殖蛋白、泛素蛋白等蛋白也参与免疫反应.     

尼尔雌醇对产后雌性黄鳝性腺转化及发育的影响

在饵料中分别添加0、4、8、12、16μg／g尼尔雌醇,对产后雌鳝（Monopterus albus）进行为期8周的饲养试验,以观察黄鳝性腺转化及发育状况。结果表明：随着尼尔雌醇投喂浓度的增加,黄鳝卵巢成熟系数逐步增大;对照组黄鳝的性腺表现为乳白色细索状的精巢样组织,而其他4个试验组黄鳝均保持为卵巢外观。其中,剂量为4μg／g和8μg／g时的试验组黄鳝卵母细胞以Ⅲ～Ⅳ时相为主,剂量为12弘g／g和16pg／g的则以Ⅴ时相为主,对照组性腺组织中以开始发育的精原细胞为主,及少量败育的Ⅴ～Ⅳ时相卵母细胞,说明尼尔雌醇对黄鳝的产后卵巢存在不同程度的维持效应,从而延缓性转变时间。     

黄鳝体内寄生虫感染的初步研究

对黄鳝体内寄生虫感染情况进行了研究.结果表明,黄鳝体内寄生虫主要为毛细线虫和新棘衣棘头虫;毛细线虫的感染率为18.6%～76.2%,平均54.2%,感染强度为1.2～5.1,平均4.3;新棘衣棘头虫的感染率为27.9%～86.5%,平均70.8%,感染强度为6.8～22.3,平均17.1,两种寄生虫对黄鳝的感染率和感染强度均随黄鳝体长的增大而增大.新棘衣棘头虫和毛细线虫在黄鳝体内呈聚集分布,但其寄生对黄鳝的肥满度没有产生明显的影响.