垂体肿瘤转化基因在膀胱癌组织中的表达及其对T24细胞的影响

目的 探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)在膀胱癌组织中的表达水平及其对T24细胞恶性生物学行为的影响.方法 应用免疫组化法检测膀胱癌患者膀胱癌组织与癌旁组织中PTTG蛋白表达量,比较不同年龄、性别、病灶直径、淋巴结转移、临床分期患者膀胱癌组织中PTTG蛋白表达水平,应用Spearman分析PTTG与各指标的相关性.将PT...     

组蛋白去乙酰酶抑制剂联合抗癌药物抑制膀胱癌的实验研究

目的观察组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275联合针对DNA的化疗药物对膀胱癌T24细胞的抑制作用。方法用MTT法测定MS-275单用及分别与阿霉素、丝裂霉素C和顺铂联用对T24细胞的抑制率,用金氏公式法判断联合用药的效果。结果MS-275分别与阿霉素、丝裂霉素C、顺铂联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加,MS-275与丝裂霉素C联用的协同作用最明显,而MS-275与阿霉素和顺铂在中低剂量下联用亦表现为协同作用。结论组蛋白去乙酰酶抑制剂可明显增强针对DNA的化疗药物对膀胱癌细胞的细胞毒作用,因此可为应用于晚期膀胱癌的化疗方案提供可能。     

木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞的影响

目的研究木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞体外增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法不同浓度木犀草素作用于指数生长期膀胱肿瘤T24细胞后应用MTS比色法检测细胞增殖的抑制作用。通过DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况。结果浓度为0.01～0.04mg/mL的木犀草素对体外培养的膀胱肿瘤T24细胞有明显的抑制作用。DNA凝胶电泳结果显示:空白对照组没有出现DNA"梯带";其他4组(除木犀草素0.004mg/mL组)均出现不同程度的DNA"梯带",显示出细胞凋亡的特征。结论木犀草素在浓度为0.01～0.04mg/mL时对膀胱肿瘤T24细胞有通过诱导细胞凋亡的方式抑制细胞生长的作用,可能具有治疗膀胱肿瘤的临床价值。     

端粒酶反义寡核苷酸对膀胱癌T24细胞体外增殖的影响

为探讨全硫代修饰的端粒酶反义寡核苷要酸（ASODT－t）抑制人膀胱癌T24细胞增殖并诱导及凋亡的可能性,采用光镜、电镜、四唑盐（MTT）比色法及流式细胞仪等检测不同浓度ASODT－t对T24细胞生长、细胞周期和诱导凋亡的作用。结果表明,不同浓度ASODT－t对T24细胞生长有抑制作用,且具有序列特异性及剂量依赖性。6μmol/L ASODT－t作用细胞72h,电镜观察可见典型凋亡特征,流式细胞仪检测到凋亡峰,凋亡率为10．4％,而无关寡核苷酸（N－ODN）片段则无此作用。结论：ASODT－t对人膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并可诱导其发生凋亡,进一步说明端粒酶与T24细胞恶性增殖有关,抑制端粒酶活性可能成为膀胱癌基因治疗的新靶点。     

端粒酶反义RNA转染逆转膀胱癌T24恶性表型的研究

为了研究端粒酶反义RNA对膀胱癌T24细胞恶性表型的抑制及促进其凋亡的作用,采用脂质体转染法将能转录出端粒酶反义RNA质粒导入膀胱癌T24细胞,应用PCR－ELISA法测定转染后T24细胞的端粒酶活性;光镜、电镜、MTT法及流式细胞检测（FCM）等方法观察端粒酶反义RNA对T24细胞的生长及凋亡的影响。结果显示,端粒酶反义RNA能显著抑制T24细胞的端粒酶活性,使其生长受抑制。形态学观察转染后T24细胞出现典型的凋亡现象。FCM检测发现细胞周期G1期前出现亚2倍体峰－凋亡峰。结论：转染端粒酶反义RNA能抑制膀胱癌T24细胞的恶性表型,并促进其凋亡,从而为 以端粒酶作为膀胱肿瘤基因治疗的新靶点提供实验依据。     

苦参素抑制人膀胱癌T24细胞生长作用研究

目的探讨苦参素对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及其可能机制。方法MTT法检测T24细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期改变和免疫组化,SP法检测Bcl 2和Bax蛋白表达的变化。结果2 mg•mL 1苦参素作用24和72 h后细胞生长抑制率为14.10%和49.67%; 8 mg•mL 1苦参素作用24和72 h后细胞生长抑制率为35.40%和80.50%。随着苦参素浓度的增加,G0/G1 期T24细胞所占比例逐渐上升,G2/M期细胞所占比例逐渐下降;且细胞内Bcl 2表达下调,Bax表达上调。结论苦参素通过诱导癌细胞周期阻滞于G0/G1期来抑制人膀胱癌T24细胞的生长增殖。其机制可能与下调Bcl 2和上调Bax蛋白表达,诱导癌细胞凋亡有关。     

丹酚酸A抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用丹酚酸A抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用

目的观察丹酚酸A(SAA)的抑制核苷转运活性及其抗肿瘤作用。方法用3H-TdR和3H-UR转运测定法,克隆生成测定法以及小鼠移植性肉瘤180模型。结果SAA抑制艾氏腹水癌细胞的胸苷和尿苷的转运,其IC₅₀分别为18.1和17.1 μmol·L^-1。SAA能明显增强5-FU、丝裂霉素C、MTX对KB细胞、肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性。体内试验,SAA 200 mg·kg^-1和5-FU 10 mg·kg^-1单独使用的抑瘤率分别为41%和27%;SAA和5-FU联合使用的抑瘤率为63%(CDI=0.86)。结论SAA有抑制肿瘤细胞核苷转运的活性,可增强5-氟尿嘧啶等药物的抗肿瘤作用,有可能用于肿瘤联合化疗。     

降低Raf1表达促进膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的 下调T24膀胱癌细胞株中Raf1的表达,观察癌细胞株的细胞凋亡情况.方法 使用SiRNA干扰方法阻断Raf1在T24膀胱癌细胞株中的表达,随后用流式细胞仪观察细胞凋亡情况,使用westem-blot法确认细胞凋亡途径.结果 使用SiRNA干扰后Raf1表达显著降低,随之凋亡细胞数量明显增高,western-blot法确认Raf1表达降低后Caspase-3和PARP蛋白被激活.结论 Raf1表达抑制促使T24细胞凋亡,其凋亡通路是通过Caspase-3和PARP途径,此研究可能对膀胱癌的治疗提供新思路.     

丹酚酸A抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用

目的观察丹酚酸A(SAA)的抑制核苷转运活性及其抗肿瘤作用.方法用3H-TdR和3H-UR转运测定法,克隆生成测定法以及小鼠移植性肉瘤180模型.结果SAA抑制艾氏腹水癌细胞的胸苷和尿苷的转运,其IC50分别为18.1和17.1 μmol·L-1.SAA能明显增强5-FU、丝裂霉素c、MTX对KB细胞、肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性.体内试验,SAA 200 mg·kg-1和5-FU 10 mg·kg-1单独使用的抑瘤率分别为41%和27%;SAA和5-FU联合使用的抑瘤率为63%(CDI=0.86).结论SAA有抑制肿瘤细胞核苷转运的活性,可增强5-氟尿嘧啶等药物的抗肿瘤作用,有可能用于肿瘤联合化疗.     

γδT细胞对肝癌细胞的杀伤作用

目的 探讨γδT细胞对肝癌细胞的杀伤作用.方法 异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)和rhIL-2活化正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析活化后的γδT细胞含量,用ELISA法检测培养上清液中IFN-γ含量,用乳酸脱氢酶释放法测定活化γδT细胞的杀伤活性.结果 体外活化的PBMC在10 d时γδT细胞比例从扩增前(4.34±1.79)%增加到(55.65±6.88)%,PBMC经IPP刺激培养后IFN-γ分泌量较不含IPP的对照组有显著增高,至第7天达峰值,活化后的淋巴细胞对肝癌细胞有较高杀伤活性.结论 IPP作为刺激剂可获得大量γδT细胞,刺激PBMC后可分泌大量IFN-γ,γδT细胞在体外对肝癌细胞有较高的杀伤活性.     

pp242对膀胱癌T24细胞增殖及侵袭能力的影响

目的探讨pp242对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭能力的影响。方法将T24细胞贴壁培养于10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100μg/mL链霉素的1640培养液中,37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养。取对数生长期细胞,处理组加入浓度为50、100、200、500 nM pp242;对照组不加药物,每天更换1640培养液。采用CCK-8法检测各组细胞生长抑制率、transwell小室法检测细胞体外侵袭能力的变化。结果 pp242对T24细胞有显著的增殖抑制作用,transwell法检测pp242处理后的T24体外侵袭能力明显下降,均呈剂量依赖性。结论 pp242对膀胱癌T24细胞具有抑制增殖和侵袭能力的作用,有望成为一种新的膀胱癌治疗药物。     

猪苓多糖对膀胱癌细胞钙离子浓度的影响

目的　观察猪苓多糖对人T2 4膀胱癌细胞内钙离子 (Ca2 )浓度的影响 ,探讨猪苓多糖抗癌机理。方法　体外培养人T2 4细胞经钙荧光指示剂 (calciumcrimson AM )负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定猪苓多糖作用前后细胞内Ca2 随时间的变化。结果　猪苓多糖低剂量 (0 .2mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 降低 ,高剂量 (>1mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 升高 ,最后维持在高钙水平上。猪苓多糖主要促进细胞核内Ca2 升高 ,细胞浆Ca2 无明显改变。结论　猪苓多糖可引起T2 4细胞内Ca2 水平的显著变化 ,而且这种变化主要表现在细胞核内 ,提示猪苓多糖可能有诱导细胞凋亡的作用     

冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用

目的探讨不同浓度的冬凌草甲素（ORI）在不同时间点对膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用,为临床决策提供参考依据。方法将冬凌卓甲豢作用于T24细胞,利用酶标仪在不同时间点（λ=570nm）测定不同浓度的冬凌草甲素吸光度,同样方式用MTT法检测细胞的抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,其数值均以均数±标准差表示,每组结果由两位研究者重复测量2次校埘。结果随着培养时间的延长及浓度的增加,T24细胞的吸发光度数值呈明显下降趋势,差异有统计学意义（P〈0．05）。浓度为8μmol／L时抑制率递增,16μmol/L时抑制率已接近50％,而32μmol／L时抑制率最高可达70％以上,变化显著,差异有统计学意义（P〈0．05）。随时间、浓度梯度的变化,T24细胞凋亡率不断增加,最高可达60％以上,差异有统计学意义（P〈0．05）。证明冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞增殖的抑制具有明显的浓度-效应与时间-效应的关系。结论冬凌草甲素可诱导膀胱癌T24细胞凋亡,有明显的抗肿瘤作用。     

蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响

摘要目的：研究蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其在膀胱癌中的抗肿瘤机制。方法：采用MTT法测定蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测蟾毒灵对癌细胞凋亡和细胞周期的影响;RT—PCR法检测癌细胞周期蛋白D1（CyclinDl）基因表达情况。结果：蟾毒灵可抑制人膀胱癌T24细胞的增殖,并呈现出时间和浓度依赖性;蟾毒灵能诱导T24细胞凋亡;20nmol／L浓度的蟾毒灵预处理膀胱癌T24细胞后,与对照组（36．42％）进行比较,可分别在12h（69．76%）和24h（88．14%）显著诱导细胞G0／G1期阻滞（P〈0．05）,且可降低膀胱癌T24细胞的CyclinDlmRNA表达水平。结论：蟾毒灵能显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导T24细胞G0／G1周期阻滞,下调人膀胱癌T24细胞CyclinDl基因表达。     

蛇床子素逆转人膀胱肿瘤T24／ADM细胞耐药作用及其机制

目的研究蛇床子素（osthole,OST）对T24／ADM细胞多药耐药的逆转及对P-gP表达、功能的影响。方法采用MTT法筛选OST对T24／ADM细胞无毒或低毒浓度,以筛选出的浓度作为耐药逆转的实验浓度。分别利用MTF法分别检测阿霉素（adriamycin,ADM）、氟尿嘧啶（fluorouracil,Fu）及顺铂（cisplatin,DDP）对细胞株T24和T24／ADM以及OST处理后的T24／ADM细胞的半数抑制浓度IC50。用流式细胞仪测定OST对T24／ADM细胞上P-gP表达的影响。结果浓度17Ixmol／LOST对T24／ADM无明显细胞毒性,T24／ADM对ADM、FU和DDP均有不同程度的。耐药,耐药倍数分别为18．86、5．09、3．28,使用17μmol／LOST处理后T24／ADM对上述ADM、Fu和DDP的敏感性均有不同程度的提高,ADM对耐药细胞株的IC蜘由（0．962±0．017）μxg／mL降至（0．364±0．031）μg／mL,逆转指数为2．64;FU对耐药细胞株的IC。由（0．723±0．003）μg／mL降至（0．463±0．021）μxg／mL,逆转指数为1．56;DDP对耐药细胞株的IC50由（0．664±0．007）μg／mL降至（0．587±0．016）μg／mL,逆转指数为1．13,使T24／ADM细胞内P-gP蛋白表达明显下降,下降了16．32％（P〈0．05）。结论蛇床子素在体外能部分逆转T24／ADM的耐药性,逆转机制可能是通过抑制P—gP蛋白表达实现的。