Toll样受体4/核因子-κB对哮喘大鼠气道炎症和重构的影响

目的:探讨TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响.方法:将18只SD大鼠随机分成3组:对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只.造模成功后,利用HE染色、免疫组织化学方法及病理图像分析系统分析大鼠气道平滑肌的嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况、气道壁厚度以及增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的蛋白表达量.利用RT-PCR和Western blotting检测ASM中TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达.结果:哮喘4周组和哮喘8周组的气道壁EOS计数、气道壁厚度、气道反应性均较正常对照组显著增加(P<0.01);哮喘4周组和哮喘8周组的TLR4及NF-κB的mRNA水平和蛋白表达与对照组比较均显著增加(P<0.01);TLR4及NF-κB的mRNA水平随哮喘天数的增加而显著增加(P<0.01);哮喘4周组、哮喘8周组PCNA和Bcl-2的蛋白表达量均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘两组间上述指标差异显著(P<0.05或P<0.01).结论:TLR4/NF-κB可能参与哮喘大鼠气道炎症和气道重构的调控.     

Toll样受体4、NF-κB在溃疡性结肠炎中的表达

目的:研究Toll样受体4、NF-κB在溃疡性结肠炎(UC)中的表达变化,探讨两者在UC发病机制中的作用。方法:收集UC病例及非UC对照结肠镜活检标本或手术标本。采用免疫组化和RT-PCR技术,检测非UC对照及UC患者肠黏膜TLR4、NF-κBp65的表达水平,并做统计学分析。结果:RT-PCR结果显示,TLR4、NF-κBp65在UC组织中的表达情况显著高于在非UC对照组织的表达(TLR4:143.658±33.870,30.531±8.442,t=24.253,P0.01;NF-κBp65:185.773±37.625,23.810±7.038,t=31.664,P0.01)。免疫组化染色显示TLR4、NF-κB在UC组结肠黏膜表达增强。结论:TLR4、NF-κBp65在UC中表达高度上调,推测它们可能参与了UC的发病过程。     

大鼠脊髓挤压伤后小胶质细胞Toll样受体4表达的变化

目的探讨脊髓挤压伤后各时间点小胶质细胞Toll样受体4(TLR4)的表达变化及其与损伤面积和免疫球蛋白G渗出范围的关系。方法 48只成年雄性SD大鼠建立T8节段脊髓挤压伤模型,随机分为6组,每组8只;假手术对照组及挤压伤组动物在手术后0h、3h、24h、72h和7d用4%多聚甲醛灌注固定,取以挤压点为中心的2cm脊髓,冷冻切片后进行HE染色和免疫荧光染色,分别观察损伤面积的变化,TLR4表达和TLR4阳性小胶质细胞的分布,以及与血浆免疫球蛋白G(IgG)渗出范围的比较,并用IPP6.0软件计算各组的阳性数目。结果脊髓损伤后TLR4主要表达在小胶质细胞,在3～24h之间开始表达,伤后在72h达到高峰,7d时已经显著下降。阳性小胶质细胞的分布与IgG渗出范围一致。结论大鼠脊髓挤压伤模型中,表达在脊髓小胶质细胞上的TLR4可在脊髓继发性损伤中发挥重要作用,并与血脊髓屏障开放有关。     

Toll样受体4/核因子-κB对哮喘大鼠气道炎症和重构的影响

目的: 探讨TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响。方法: 将18只SD大鼠随机分成3组:对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只。造模成功后,利用HE染色、免疫组织化学方法及病理图像分析系统分析大鼠气道平滑肌的嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况、气道壁厚度以及增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的蛋白表达量。利用RT-PCR和Western blotting检测ASM中TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达。结果: 哮喘4周组和哮喘8周组的气道壁EOS计数、气道壁厚度、气道反应性均较正常对照组显著增加(P<0.01);哮喘4周组和哮喘8周组的TLR4及NF-κB的mRNA水平和蛋白表达与对照组比较均显著增加(P<0.01);TLR4及NF-κB的mRNA水平随哮喘天数的增加而显著增加(P<0.01);哮喘4周组、哮喘8周组PCNA和Bcl-2的蛋白表达量均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘两组间上述指标差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论: TLR4/NF-κB可能参与哮喘大鼠气道炎症和气道重构的调控。     

黄芪多糖抑制Toll样受体4/核因子κB p65通路治疗大鼠膝骨关节炎

背景：黄芪多糖治疗骨关节炎具有一定的作用,Toll样受体4/核因子κB通路在膝骨关节炎发病机制中发挥重要作用。目的：探讨黄芪多糖对膝骨关节炎的干预作用及其机制。方法：40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组和脂多糖组(n=8),除对照组之外,其余各组均建立膝骨关节炎模型。造模成功1周后,黄芪多糖低、高剂量组分别向大鼠膝关节腔内注射质量浓度为0.1,0.5 g/L的黄芪多糖生理盐水溶液0.2 mL,脂多糖组注射0.5 g/L黄芪多糖0.2 mL+500μg/kg脂多糖0.2 mL;模型组和对照组同法注射等量生理盐水;均3 d注射1次,干预6周。干预结束后,苏木精-伊红、番红O-固绿染色观察软骨、滑膜组织病理学变化,采用Mankin’s评分和国际骨关节炎研究协会评分进行评估;ELISA法检测滑膜组织中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、一氧化氮、丙二醛、超氧化物歧化酶表达水平;Western blot检测软骨组织中聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶3及核因子κB p65、Toll样受体4、MyD88表达。结果与结论：(1)与模型组相比,黄芪多糖...     

Toll样受体4在大鼠胰腺组织特异性分布表达

目的探索Toll样受体4(TLR4)在大鼠胰腺组织的特异性分布表达。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化SP方法 ,检测Wistar大鼠胰腺组织中TLR4mR NA及TLR4蛋白的分布表达。结果通过RT-PCR方法 (31个循环 ) ,从正常大鼠胰腺组织检测到549bp目的基因片段。免疫组化方法检测到大鼠胰腺内有TLR4表达 ,主要位于胰管上皮、血管、微血管内皮及胰岛组织 ,胰腺外分泌腺泡细胞未见TLR4表达。结论TLR4在大鼠正常胰腺组织内有分布表达 ,主要定位于上皮组织 (胰管上皮 )和内皮组织(动脉静脉及微血管内皮) ,提示大鼠胰腺内、外分泌部均具有天然免疫TLR4参与胰腺病理生理的相关受体基础     

Toll样受体2和Toll样受体4在免疫应答衣原体感染中的作用

衣原体是重要的人类病原体,其能够导致多种疾病的发生.由衣原体引起的许多人类疾病被认为是免疫病理学介导的.已经证明Toll样受体(TLRs)是多种病原体感染的主要模式识别受体( PRRs),在起始固有免疫应答,建立适应性免疫应答中发挥着重要作用.在TLR家族中,TLR2和TLR4与衣原体感染的相关性研究备受关注,在识别衣原体感染、调节宿主的早期免疫应答、炎症反应和病理形成中执行着关键性的作用.研究TLR2和TLR4在免疫应答衣原体感染中的作用可以更好地理解TLRs介导的分子免疫机制,可能有助于研发免疫治疗的分子靶标,最终有效预防、控制衣原体感染引起的疾病.     

电针对脑缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4/核因子κB信号通路的影响

背景：炎症反应是诱发脑缺血再灌注损伤的重要因素之一。研究表明电针可有效降低缺血性脑卒中后炎症反应,改善神经功能缺损症状,但机制尚未明确。目的：观察电针对脑缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4/核因子κB信号通路及炎性因子表达的影响。方法：48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组16只,采用大脑中动脉线栓阻断法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型。造模24 h后对电针组大鼠行电针干预,每天1次,每次20 min,共5 d;假手术组和模型组不做任何干预。干预5 d后根据Longa法评定各组大鼠神经功能损伤程度;TTC染色和苏木精-伊红染色分别观察大鼠脑梗死体积及脑组织病理形态,荧光定量PCR和Western blot分别检测大脑皮质中Toll样受体4、核因子κB mRNA和蛋白表达;酶联免疫法检测血清中炎性因子白细胞介素6、白细胞介素18和肿瘤坏死因子α水平。结果与结论：(1)与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分、血清白细胞介素6、白细胞介素18、肿瘤坏死因子α水平、大脑皮质Toll样受体4、核因子κB mRNA及蛋白表达水平明显升高(P <0.01);与模型组比较,电针组大...     

Toll样受体3相关信号转导途径与病毒感染

哺乳动物的Toll样受体（Toll—like receptor，TLR）是一种重要的模式识别受体，TLR3是Toll样受体家族中的一员，与病毒感染密切相关。本文就TLR3相关信号转导途径与病毒感染及凋亡作一综述。     

Toll样受体2和Toll样受体4在HBV感染后的免疫作用

Toll样受体（TLR）是启动固有免疫和调节适应性免疫的重要分子,参与肝脏对病毒及细菌的免疫TLR2、TLR4过程。在HBV的慢性化进程中,TLR2、TLR4与Thl和Th2的免疫平衡及调节性T细胞（Treg）的免疫抑制相关,HBV感染后,HBcAg刺激巨噬细胞产生TNF—α的作用需要TLR2参与,HBeAg的表达与否与TLR2的表达状态有关,而TLR4通过诱导iNOS的表达和激发HBV特异性免疫在体内抗HBV过程中起重要作用：     

人脐血血清对巨噬细胞Toll样受体4表达及功能的影响

目的研究人脐血血清(cord blood serum,CBS)对巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)表达及功能的影响。方法取足月孕妇脐带血和外周血血清,与RAW264.7细胞共孵育,电镜下观察形态学变化,MTT法检测血清对RAW264.7细胞活性的影响;RT-PCR和流式细胞术检测RAW264.7细胞TLR4基因和蛋白表达水平;免疫荧光技术检测RAW264.7细胞I_κB_α水平,RR-PCR检测RAW264.7细胞COX-2的表达,以反映TLR4信号途径活化程度。结果人脐血血清可下调RAW264.7细胞TLR4的mRNA和蛋白表达水平;人脐血血清预孵育可抑制由LPS诱导的RAW264.7细胞NF-_κB激活和COX-2的表达。结论人脐血血清能抑制巨噬细胞TLR4的表达及其下游信号传递,这为阐明脐血血清对脐血细胞免疫功能调节的机制提供了新的实验线索。     

Caspase-3在出生后大鼠海马中的表达

目的 探讨Wistar大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3与凋亡之间的关系. 方法 应用免疫荧光方法观测活化的Caspase-3和赫斯特荧光染料33342(Hoechst 33342)在生后不同时期大鼠海马CA1、CA3区和齿状回(DG)中的表达情况. 结果 在CA1区,活化的Caspase-3的表达在生后7d(P7)达到高峰;在CA3区,P2达到高峰,然后逐渐减弱.在DG,P7后又有所增强,到P14达到高峰,并在所观测的其余时段维持此水平.观测的3个区的凋亡细胞数目都在P7达到高峰,然后逐渐减少. 结论 在大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3的表达存在特定的时空格局.活化的Caspase-3在CA1区与CA3区有丝分裂后期细胞和DG神经前体细胞中的作用和机制不同.     

依达拉奉对惊厥持续状态幼年大鼠海马中caspase-3和caspase-12表达的影响

目的:探讨依达拉奉(edaravone,ED)对幼年大鼠惊厥持续状态(status convulsion,SC)后海马中caspase-3和caspase-12表达的影响。方法:将195只SD幼年雄性大鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、SC组和ED组;各组又均按时点分为4 h、12 h、24 h、48 h和72 h 5个亚组,每组13只。采用氯化锂-匹鲁卡品化学点燃法制备幼年大鼠SC模型。应用免疫组织化学法检测大鼠海马中caspase-3和caspase-12蛋白表达情况,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测caspase-3和caspase-12 mRNA的表达。结果:(1)免疫组织化学法检测SC 24~72 h组幼年大鼠海马中caspase-3表达增强,与NS组比较差异有统计学意义(P0.05);与SC组比较,ED 48~72 h组的caspase-3表达明显降低,差异有统计学意义(P0.05);RT-PCR法检测结果显示caspase-3 mRNA的表达趋势与蛋白基本相似。(2)免疫组织化学法检测SC组幼年大鼠海马中12~72 h组caspase-12表达增强,与NS组比较差异有统计学意义(P0.01);与SC组比较,ED 24~72组caspase-12表达明显降低,差异有统计学意义(P0.05);RT-PCR法检测结果显示caspase-12 mRNA的表达趋势与蛋白基本相似。(3)经比较,ED组Ⅴ级惊厥率较SC组低,差异有统计学意义(P0.05);且ED组惊厥潜伏期也较SC组明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。结论:依达拉奉可抑制匹鲁卡品所致SC大鼠海马caspase-12和caspase-3的表达,提示依达拉奉对SC引起的脑损伤可能有保护作用。     

Toll样受体4与动脉粥样硬化关系的研究进展

动脉粥样硬化是心脑血管疾病的病理基础。但目前关于动脉粥样硬化的发病机制还不是很清楚。普遍认为免疫应答,包括固有免疫和适应性免疫在动脉粥样硬化的发生发展中起了重要作用。Toll受体4（TLR4）是抗原相关分子模式（PAMP）受体,在识别微生物感染、激发先天性免疫反应中发挥了重要作用。近来发现炎症在动脉粥样硬化发展的各个阶段均发挥了重要作用,虽然目前确切的证据还缺乏,但是越来越多的调查发现,病原体感染引起的分子和细胞的改变表明炎症具有这种作用。     

Sombati细胞模型中Toll样受体4的表达及意义

 目的：研究Sombati细胞模型中神经元Toll样受体4（TLR4）表达变化,探讨TLR4在Sombati癫痫细胞发病过程中的意义。方法：将新生SD乳鼠海马神经元进行体外培养至第9天,随机分为对照组和Sombati细胞模型组,分别检测TLR4蛋白及TLR4 mRNA的表达。结果：免疫组化结果显示Sombati细胞TLR4蛋白表达增强,荧光定量PCR显示Sombati细胞组TLR4 mRNA表达增加(P<0. 05),且随时间的延长而增强。结论：Sombati细胞模型中TLR4 mRNA与蛋白表达均增加,可能与癫痫的发病有关。     

乳酸杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜Toll样受体2及核因子-kappa B表达的影响

目的:观察乳酸杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜Toll样受体2(TLR2)及核因子-kappa B(NF-κB)表达的影响,探讨乳酸杆菌辅助治疗溃疡性结肠炎的机制.方法:采用三硝基苯磺酸/乙醇法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型.观察并评估大鼠一般状态及组织损伤情况,以RT-PCR法和免疫组织化学分别检测TLR2、NF-κB表达.结果:乳酸杆菌组组织损伤情况明显较模型组减轻.模型组大鼠肠黏膜TLR2、NF-κB表达情况明显高于正常对照组和乳酸杆菌组.结论:乳酸杆菌可以通过抑制TLRs/NF-κB通路发挥对溃疡性结肠炎的辅助治疗作用.     

癫痫大鼠海马神经元Fas、FasL和Caspase-3的表达

目的观察Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达,探讨Fas、FasL和Caspase-3表达与癫痫的关系,为癫痫的生物治疗提供实验依据。方法通过腹腔注射戊四氮建立癫痫大鼠模型,用免疫组织化学方法和图像分析技术检测Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达。结果 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达水平和阳性细胞数量与正常对照组相比均明显增多(<0.05)。结论 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马过表达。     

癫痫持续状态大鼠海马Bim与Caspase-3的表达

目的:探讨在匹罗卡品致痫的癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)大鼠模型中,Bcl-2-相互作用细胞死亡介导因子(Bim)与Caspase-3在大鼠海马组织中的表达。方法:雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,应用匹罗卡品产生SE 60 min后终止发作,24 h后取材,行HE染色及TUNEL染色,观察海马神经元的损伤及凋亡情况,Western Blot测定海马组织中Bim的表达,免疫组化检测Caspase-3的表达。采用Pearson相关分析法分析Bim与Caspase-3表达的相关性。结果:SE后24 h,海马组织HE染色见神经元数量减少,TUNEL染色阳性细胞数明显增加,Western Blot中Bim出现相对分子量26kD的条带,免疫组化染色可见大量Caspase-3阳性神经元。结论:大鼠SE后24 h,Bim与Caspase-3在海马组织神经元表达增加,且二者的表达呈正相关(r=0.901,P=0.001),海马神经元出现凋亡。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3的表达降低

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3(TLR3)的表达及其临床意义.方法 分别采集慢性乙型肝炎患者和健康志愿者外周血,荧光定量PCR法检测血清HBV DNA复制水平;使用RT-PCR、流式细胞术以及免疫印迹技术分别检测外周血单个核细胞TLR3的mRNA、蛋白的表达;使用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素β(IFN-p)水平.结果 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中的TLR3表达显著低于健康志愿者,且降低水平与血清HBV DNA复制水平相关;慢性乙型肝炎患者外周血TNF-α、IFN-β浓度显著低于健康志愿者,且降低的水平与血清HBV DNA复制水平相关.结论 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR3的表达与乙肝病毒的复制水平相关.