5名电离辐射事故患者外周血T细胞T细胞抗原受体,T细胞分化抗原…

文中报道了５名事故性急性骨髓型放射病患者照后２．５和３．５年外周血Ｔ淋巴细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因，ＴＣＲ、Ｔ细胞分化抗原决定簇－３（ＣＤ３）表达与ＴＣＲ／ＣＤ３复合物功能的辐射效应。发现５名患者于照后２．５年，２名（５．２Ｇｙ和２．４Ｇｙ，５５岁）于照后３．５年外周血Ｔ细胞应答抗ＣＤ３单抗刺激而增殖的能力尚未完全恢复；经同时用ＩＬ－２和抗ＣＤ３单抗刺激，增殖能力比单用抗ＣＤ３单抗刺激有所增强；     

电离辐射致人T淋巴细胞CD3抗原表达的改变

用流式细胞仪、免疫细胞化学和免疫透射电镜方法，分析研究不同剂量γ线体外照射人外周血Ｔ淋巴细胞后，不同时间细胞表面ＣＤ３抗原的表达和分布。发现随照射剂量增加，ＣＤ３阳性细胞百分率减少，同一照射剂量随照后时间延长，ＣＤ３阳性细胞百分率缓慢增加。受照细胞胞浆内游离ＣＤ３随照射剂量增加而增多，并于浆内出现ＣＤ３－ＳＰＡ－胶体金颗粒（未照射细胞只见于细胞表面，全未见于浆内）。ＣＤ３、ＣＤ４双阳性流式细胞仪分     

白癜风患者外周血黑素细胞抗原特异性T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞水平及意义

目的 探讨白癜风患者外周血黑素抗原特异性CD8+T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞的变化及意义。方法 采用流式细胞术对初诊123例白癜风患者（观察组）和30例正常人（对照组）外周血中黑素细胞抗原特异性T细胞（CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL）、调节性T细胞（CD4+CD125+CD127-Tregs）及自然杀伤T细胞（CD3+TCRα24+β11+NKT）进行定量分析并进行比较。结果观察组CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL水平显著高于对照组（P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平均低于对照组（均P＜0.05）。不同分期白癜风患者外周血各种T细胞表达水平比较中,CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL在各期中均高于对照组（均P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平仅在进展期中均低于对照组（均P＜0.05）,稳定期则无统计学差异。3种细胞水平与患者的白斑面积明显相关（r=0.929、-0.982、-0.957,均P＜0.01）。结论CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL、CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平的异常导致白癜风患者体内免疫调节功能失衡,与白癜风的发生、发展有密切关系。     

运用短期外周血超抗原反应T细胞系研究超抗原诱导的T细胞凋亡

目的：建立短暂外周血抗原金黄色葡萄球菌Ａ肠毒素（ＳＥＡ）反应Ｔ细胞系,研究ＳＥＡ诱导的Ｔ细胞凋亡。方法：采用超抗原ＳＥＡ剌激ＰＢＭＣ增殖,ｒＩＬ－２维持细胞生长,高速度Ｆｉｃｏｌｌ离心去除死细胞建立细胞系。ＦＣＭ及琼脂糖凝胶电泳检测ＳＥＡ诱导短期外周血ＳＥＡ反应Ｔ细胞系凋亡。结果：ＳＥＡ０．５～５μｇ／ｍｌ,ｒＩＬ－２Ｕ／ｍｌ能有效建立ＳＥＡ反应Ｔ细胞系,此细胞系能在体外维持生长４０ｄ,对ＳＥＡ的     

冠心病病人血清可溶性白细胞介素－2受体水平及T淋巴细胞亚群的变化

采用双抗体夹心法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测了８４例冠心病病人血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平和外周血Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ４，ＣＤ８）的变化。结果显示，冠心病病人血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８明显降低，而ＣＤ８明显增高，与对照组相比差异有极显著意义（Ｐ＜０．００１），且急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的变化较不稳定心绞痛（ＵＡ）和陈旧性心肌梗塞（ＯＭＩ）更明显。１周内病死的ＡＭＩ病人ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＤ８的增高及ＣＤ４和ＣＤ４／ＣＤ８降低较存活者更明显（Ｐ＜０．００１）。提示血清ｓＩＬ－２Ｒ水平和Ｔ淋巴细胞亚群异常与冠心病的病情和预后有密切关系。     

哮喘儿童血清可溶性白细胞介素－2受体与外周血T细胞亚群检测

哮喘儿童血清可溶性白细胞介素－２受体与外周血Ｔ细胞亚群检测徐琳玲，林小璎，华雪玲，陈珊关键词：哮喘，白细胞介素－２受体／可溶性，Ｔ细胞．亚群，儿童近年来，Ｔ淋巴细胞与细胞因子及其受体在哮喘发病中的作用日益受到重视。为探讨可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩ...     

肝癌患者外周血T细胞亚群与IL－2R表达的临床研究

应用间接免疫荧光法对１４例肝细胞性肝癌患者围术期外周血Ｔ淋巴细胞亚群及单个核细胞ＩＬ－２Ｒ表达行动态观察。结果表明，肝癌患者ＣＤ＿３￣＋细胞、ＣＤ＿４￣＋细胞降低，ＣＤ＿４￣＋／ＣＤ＿８￣＋比值降低，ＣＤ＿８￣＋细胞百分率增高；ＩＬ－２Ｒ表达明显降低。手术切除肿瘤后第１０天，ＣＤ＿４￣＋细胞与ＣＤ＿４￣＋／ＣＤ＿８￣＋比值开始回升，术后３０天升至术前水平，ＩＬ－２Ｒ表达的变化过程与ＣＤ＿４￣＋细胞基本相同。表明手术切除肿瘤负荷能有效地提高宿主免疫功能。     

嵌合抗原受体修饰T细胞在复发、难治性慢性淋巴细胞白血病中的治疗进展

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结核杆菌耐热抗原和磷酸类抗原对人外周血 γδ T细胞活化和增殖的比较

目的:比较结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)和磷酸类抗原(HDMAPP)刺激正常人外周血γδT细胞活化和增殖的特点。方法:健康成人外周血单个核细胞(PBMC,1×106/ml),分别加Mtb-HAg(5μg/ml)和HDMAPP(2×10-9mol/ml)进行刺激,同时给予IL-2(50 u/ml)维持细胞增殖,另外设立只加IL-2的对照组。培养10 d后,采用抗CD3-FITC和抗TCRγδ-PE荧光抗体标记细胞,流式细胞术检测γδT细胞的比例。结果:正常人PBMC经Mtb-HAg刺激扩增后γδT细胞在扩增细胞中的比例明显低于HDMAPP组(P0.01),均明显高于IL-2对照组(P0.01)。各个体对2种抗原刺激扩增γδT细胞呈线性正相关关系(R2=0.855 1,P0.01)。结论:Mtb-HAg和HDMAPP均可优势激活人γδT细胞,且后者较前者有更强的活性。     

康复新对单纯皮肤创面和合并全身放射损伤时的促愈作用

目的：了解放射损伤后创面愈合速度和创面牵张强度的变化及康复新的促愈作用。方法：采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠全身５Ｇｙ＾６０Ｃｏγ线射复合背部两个圆形的全层皮肤创伤模型,观察康复新对伤后创面愈合速度,创面平均愈合时间和创面张强度的影响。     

离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射对caspase-3蛋白表达的影响。方法：采用体外传代培养的小鼠EL-4淋巴瘤细胞为实验材料；采用单克隆抗体免疫荧光标记，FACScan流式细胞仪(FCM)检测蛋白表达的变化；采用PI荧光标记及FCM测定细胞凋亡的变化；量效实验, 观察0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达及细胞凋亡的变化；时效实验, 观察4.0 Gy照射后2、4、8、12、24、48及72 h EL-4细胞caspase-3蛋白表达的变化。结果：量效实验表明，0.5、2.0、4.0及6.0 Gy X射线照射后24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。0.5、1.0及4.0 Gy 照射后24 h EL-4细胞凋亡明显增高，与假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.05或P<0.01)。 时效实验表明，4.0 Gy照射后8、12及24 h EL-4细胞中caspase-3蛋白表达均明显增高, 与同时间点假照射对照组比较，差异具有显著性 (P<0.01或P<0.001)。结论：电离辐射可诱导EL-4细胞caspase-3蛋白表达增高。同时诱导EL-4细胞凋亡。     

电离辐射对小鼠骨髓 c-kit 阳性细胞损伤效应体外研究

目的：观察电离辐射引起小鼠骨髓 c-kit+细胞损伤变化。方法磁珠法分选小鼠 c-kit+细胞,生物发光法检测细胞活力,活性氧探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧水平,集落形成数目检测克隆形成能力,流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,基因芯片分析细胞内信号通路变化。结果与0 Gy 组(对照组)比较,c-kit+细胞受到1 Gy 和4 Gy 照射后,细胞活力下降,克隆形成能力下降,早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加,细胞内活性氧水平升高;与对照组比较,c-kit+细胞受到1 Gy 照射后,处于增殖期(S/G2/M 期)细胞比例增加;4 Gy 照射后处于增殖期(S/G2/M 期)细胞比例下降;c-kit+细胞受到4Gy 照射后 Srxn1、Psmb5、Cdkn1a、Smc1b、Bcl2l1、Lrdd 等基因表达上调;Mpo、Mtf1、Chek1、Rcc1 Ebag9、Ciapin1等基因表达下调。结论电离辐射能够引起骨髓 c-kit+细胞损伤,导致一系列信号通路表达变化。     

电离辐射对小鼠胸腺细胞蛋白质表达的影响

目的 :观察低剂量 X射线全身照射诱导小鼠胸腺细胞蛋白质表达变化及对细胞内外蛋白质交换的影响。方法 :采用双向电泳方法。结果 :75m Gy X射线全身照射小鼠后 4h,细胞浆出现 5个新蛋白点、4个增强蛋白点及 3个减弱蛋白点。正常细胞浆中的 5个蛋白点在照射后消失。照射后细胞外液出现 1个新蛋白点、1个增强蛋白点及 1个减弱蛋白点。正常细胞外液中的 3个蛋白点在照射后消失。正常细胞浆中的 2个蛋白点在照射后分别减弱和消失 ,而在细胞外液中出现和增强。正常细胞外液中的 2个蛋白点在照射后消失 ,而出现在细胞浆中。结论 :低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞蛋白质表达变化 ,并促进细胞内外大分子物质的交换     

Effect of radiation on TCR，CD_3，CD_（18），and CD_（25） expressionof human T cells

ＥｆｆｅｃｔｏｆｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎＴＣＲ，ＣＤ_３，ＣＤ_（１８），ａｎｄＣＤ_（２５）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｕｍａｎＴｃｅｌｌｓＭｉｎＲｕｉ（闵锐）；ＣｈｅｎｇＴｉａｎｍｉｎ（程天民）；ＬｕｏＣｈｅｎｇｊｉ（罗成基）；ＣｈｅｎＱｉ（陈杞）；Ｄ?..     

电离辐射对胸腺细胞周期进程的影响

本文采用流式细胞仪对小鼠Ｘ射线全身照射后胸腺细胞周期进程与Ｘ射线剂量效应关系进行了研究。４．０ＧｙＸ射线全身照射后４ｈ胸腺细胞便出现明显的ＤＮＡ合成抑制和Ｇ２阻滞，８ｈＧ２阻滞达到最高点。不同剂量全身照射的结果表明，低剂量（５０～１００ｍＧｙ）全身照射后胸腺细胞ＤＮＡ合成能力增强，而高剂量全身照射后则出现明显的ＤＮＡ合成抑制，Ｇ２阻滞和有丝分裂延迟。     

电离辐射和5-氟尿嘧啶对EL-4细胞周期的解偶联作用

目的：研究电离辐射和5-氟尿嘧啶（5-FU）对EL-4细胞周期解偶联的时间-效应关系和剂量-效应关系。方法：取指数生长期EL-4细胞,采用不同照射剂量（0、1.0、2.0和4.0 Gy）电离辐射和不同浓度5-FU（0、0.001、0.010、0.100和1.000 mg•L^-1）处理EL-4细胞,于0、4、8、16、24和48 h后分别收集细胞,碘化丙啶（PI）荧光标记及流式细胞术（FCM）检测细胞倍体变化。结果：与假照组比较,2.0 Gy X射线照射后,EL-4细胞二倍体细胞百分率在照射后8~24 h显著增加（P<0.05或P<0.01）,48 h恢复至正常水平;四倍体细胞百分率在照射后8~48 h显著降低（P<0.05或P<0.01）;八倍体细胞百分率在照射后16~24 h显著降低（P<0.05）。1.0~4.0 Gy X射线照射后16 h,与假照组比较,二倍体细胞百分率剂量依赖性增加（P<0.05或P<0.01）,四倍体细胞百分率呈剂量依赖性下降（P<0.01）,八倍体细胞百分率变化不显著。0.100 mg•L^-1 5-FU 给药后,与0 mg•L^-1组比较,EL-4细胞二倍体细胞百分率在给药后16~48 h显著降低（P<0.01）;四倍体细胞百分率在给药后8~24 h显著增加（P<0.05 或 P<0.01）,48 h回降;八倍体细胞百分率在给药后4~16 h显著增加（P<0.05）。不同剂量5-FU给药后16 h,与0 mg•L^-1组比较,EL-4细胞二倍体细胞百分率显著降低（P<0.05或P<0.01）,四倍体细胞百分率显著增加（P<0.05或P<0.01）,二者变化在0.001~1.000 mg•L^-1剂量范围内呈剂量依赖性;八倍体细胞百分率仅在0.010和0.100 mg•L^-1组显著增加（P<0.05或P<0.01）。结论：1.0~4.0　Gy电离辐射无诱导EL-4细胞发生细胞周期解偶联作用,0.010~0.100 mg•L^-1 5-FU可以诱导EL-4细胞发生细胞周期解偶联。     

电离辐射对小肠上皮细胞PrxⅠ和PrxⅥ基因表达的影响

目的：探讨电离辐射对BALB／c小肠上皮细胞PrxⅠ和PrxⅥ基因表达的影响。方法：采用^60Co辐射源全身照射BALB／c小鼠的方法建立电离辐射损伤的动物模型，总剂量为9．0Gy；在照射前，照射后3、24h和72h分离BALB／c小鼠的小肠上皮细胞；采用Tripure试剂盒提取小肠上皮细胞总RNA，而后采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法检测PrxⅠ和PrxⅥ基因表达，并进行半定量分析。结果：成功的分离了小鼠小肠上皮细胞；采用Tripure试剂盒提取的小肠上皮细胞总RNA经OD260／OD280比值测定和甲醛变性凝胶电泳证实所提取的RNA无降解并有足够的程度；正常小肠上皮细胞内有PrxⅠ和PrxⅥ基因的表达，在电离辐射后两者均有一短暂降低，随后逐渐升高，至照射后3d仍高于正常对照。结论：电离辐射后PrxⅠ和PrxⅥ基因表达在应激期内出现一短暂性降低，在辐射后期PrxⅠ和PrxⅥ基因表达升高，提示PrxⅠ和PrxⅥ基因可能参与辐射引起的小肠上皮细胞修复。     

电离辐射对Beclin1过表达和低表达MCF-7细胞模型细胞自噬和凋亡的影响及其调控机制

目的:建立Beclin 1过表达和低表达MCF-7细胞模型,检测4 Gy照射后细胞自噬和凋亡的变化,探讨Beclin 1的分子调控作用机制。方法:实验分为MCF-7组、MCF-7+4Gy组、MCF-7-Beclin1+4Gy组和MCF-7-Belin1 RNAi+4Gy组。利用分子生物学方法构建Beclin 1过表达载体pcDNA3.1-Beclin 1,并建立Beclin 1过表达和低表达细胞模型。细胞经4 Gy照射后,采用MDC染色荧光显微镜观察自噬细胞百分比,AnnexinⅤ-FITC和PI染色流式细胞术检测凋亡细胞百分比,Western blotting法检测Beclin 1、P53、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:与MCF-7组比较,MCF-7+4 Gy组、MCF-7-Beclin 1+4 Gy组和MCF-7-Beclin 1 RNAi+4 Gy组自噬和凋亡细胞百分比均明显升高(P<0.05 或 P<0.01),以MCF-7-Beclin 1+4 Gy组升高最明显,且高于MCF-7+4 Gy组 (P<0.05);各组坏死细胞百分比无明显差异。4 Gy照射后,MCF-7组和MCF-7-Beclin 1组细胞中Beclin 1、P53和Bax蛋白表达水平均升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,且以MCF-7-Beclin 1组最为明显。结论:成功建立Beclin 1过表达和低表达MCF-7细胞模型,电离辐射能够诱导其细胞自噬和凋亡,且对Beclin 1过表达细胞作用更明显。Beclin1通过激活P53,进而抑制Bcl-2和激活Bax,从而形成以P53为中心的自噬与凋亡分子调控机制。