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“莪黄灌肠液”对人大肠癌SW480细胞HIF-1α通路uPA、uPAR基因表达的影响
作者姓名:侯俊明1  贾 勇1  文建华2  杨得振1  冯飞雪1  惠 阳3  马宗慧1  赵唯含1
作者单位:1.陕西中医药大学附属医院,陕西 咸阳 712000;2.浙江省医疗健康集团杭州医院,浙江 杭州 310000;3.陕西中医药大学,陕西 咸阳 712046
基金项目:陕西省重点研发计划(编号:2018ZDXM-SF-001);陕西省教育厅专项科学研究计划(编号:18JK0230);咸阳市科技成果推广计划(编号:2018KT-43)
摘    要:目的:通过莪黄灌肠液对SW480细胞HIF-1α通路uPA、uPAR基因表达的影响,探讨莪黄灌肠液对SW480细胞侵袭与迁移的影响。方法:根据随机数学分组的原则,将50只健康SD雄性大鼠分成随机5组并逐个编号,体重控制在(200±20)g。通过预实验得出的药物分组量分别灌胃给药:莪黄灌肠液(莪黄汤)每毫升药液中含生药2 g,莪黄灌肠液(莪黄汤)组由低、中、高(6.075 g/kg,12.15 g/kg,24.3 g/kg)剂量组(灌胃剂量2 ml)组成,空白组为生理盐水组(灌胃剂量2 ml,pH 7.2),阳性对照组由腹腔注射氟尿嘧啶0.025 g/(kg·d),调整注射剂量1 ml构成。标准化灌胃1周,无菌条件下提取各组含药血清。在体外使用含药血清体培养SW480细胞,划痕实验观察莪黄灌肠液含药血清在体外对SW480细胞迁移能力的影响;Transwell实验检测肿瘤细胞侵袭能力;Western-blot实验检测各组细胞中HIF-1α、uPA、uPAR蛋白表达。结果:预实验提示莪黄灌肠液对大鼠无明显副作用。SW480细胞具有明显的迁移及侵袭能力。各组莪黄灌肠液含药血清能抑制SW480细胞的侵袭与迁移特性,其中莪黄灌肠液各组(24.3 g/kg,12.15 g/kg,6.075 g/kg)和氟尿嘧啶组较空白组均能够有效抑制肿瘤细胞的侵袭与迁移作用,且氟尿嘧啶组作用最强,中药24.3 g/kg组表现出的抑制侵袭作用较12.15 g/kg,6.075 g/kg组均强(P<0.05)。莪黄灌肠液含药血清作用于肿瘤细胞24 h后,其细胞内HIF-1α、uPA、uPAR蛋白含量均有明显的下降,HIF-1α、uPA、uPAR蛋白表现出浓度依赖性(P<0.05)。结论:“莪黄灌肠液”可能通过作用于HIF-1α通路抑制SW480细胞的侵袭与转移。

关 键 词:大肠癌  莪黄灌肠液  SW480细胞  缺氧微环境  侵袭  转移  uPA  uPAR蛋白
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