| 沙利度胺抑制肿瘤细胞分泌VEGF/bFGF机制的探讨* |
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| 引用本文： | 黄海宁,汪汇,龙超良,张浩,汪海. 沙利度胺抑制肿瘤细胞分泌VEGF/bFGF机制的探讨*[J]. 中国应用生理学杂志, 2022, 38(2): 169-174. DOI: 10.12047/j.cjap.6262.2022.032 |
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| 作者姓名： | 黄海宁 汪汇 龙超良 张浩 汪海 |
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| 作者单位： | 1.济宁医学院附属医院, 山东 济宁 272029; 2.北京赛德维康医药研究院, 北京 100039; 3.江苏师范大学健康科学学院, 徐州 221116; 4.中国人民解放军总医院, 北京 100853 |
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| 基金项目： | *国家973计划项目子课题(2011CB518206);济宁医学院教师科研扶持基金(JYFC2019FKJ161 ) |
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| 摘 要： | 目的: 探讨Cereblon(CRBN)对沙利度胺抑制人肺癌A549细胞及人肝癌HepG2细胞分泌VEGF/bFGF的影响。方法: 采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立稳定敲低CRBN的A549细胞系(A549CRBN)及HepG2细胞系(HepG2CRBN)并通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印记(Western blot)实验验证。将A549细胞分为阴性对照组(A549luciferase)、CRBN低表达组(A549CRBN);HepG2细胞分为阴性对照组(HepG2luciferase)、CRBN低表达组(HepG2CRBN),以上细胞按照 3×105 cells/well接种到6孔板中,放入37℃,5%CO2的培养箱中培养24 h,分别加入1 ml含100 μmol/L沙利度胺(thalidomide组)和1 ml 1‰ DMSO(control组)的培养液,继续培养24 h再行后续实验,每组设计3个复孔。MTS法检测沙利度胺对细胞增殖的影响;Real-time PCR检测VEGF、bFGF、c-jun mRNA表达,ELISA法检测VEGF、bFGF蛋白表达。结果: 与对照组比较,沙利度胺在浓度为1、10、50、100 μmol/L 时对A549 及HepG2细胞的增殖能力无显著影响(P＞0.05)。与A549CRBN或HepG2CRBN组比较,A549luciferase及HepG2luciferase组分泌的VEGF及bFGF均显著降低(P＜0.05)。与A549luciferase或HepG2luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制A549luciferase和HepG2luciferase细胞的VEGF和bFGF的表达(P＜0.05),而对A549CRBN和HepG2CRBN细胞中VEGF和bFGF的表达无显著抑制作用;与HepG2luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制HepG2luciferase细胞的c-Jun表达(P＜0.01),而对HepG2CRBN细胞的c-Jun表达无显著抑制作用。结论: 沙利度胺对A549和HepG2细胞VEGF和bFGF表达的抑制作用可能是通过CRBN介导的,而c-Jun可能是抑制作用的关键转录因子之一。
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| 关 键 词： | 沙利度胺 血管新生 细胞培养 血管内皮生长因子(VEGF) 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) cereblon(CRBN) |
| 收稿时间： | 2021-11-29 |
Mechanism of the inhibitory effects of thalidomide on expressions of VEGF and bFGF |
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| HUANG Hai-ning,WANG Hui,LONG Chao-liang,ZHANG Hao,WANG Hai. Mechanism of the inhibitory effects of thalidomide on expressions of VEGF and bFGF[J]. Chinese journal of applied physiology, 2022, 38(2): 169-174. DOI: 10.12047/j.cjap.6262.2022.032 |
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| Authors: | HUANG Hai-ning WANG Hui LONG Chao-liang ZHANG Hao WANG Hai |
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| Affiliation: | 1. Affiliated Hospital of Jining Medical University, Jining 272029; 2. Thadweik Academy of Medicine, Beijing 100039; 3. College of Heacth Science, Jiangsu Normal University, Xuzhou 221116; 4. General Hospital of PLA, Beijing 100853, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | thalidomide angiogenesis cell culture VEGF bFGF cereblon(CRBN) |
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