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水稻B-box锌指蛋白基因OsBBX26的 克隆及表达分析
引用本文:邓军,罗正良,朱菲莹,陈希,方勇,任鄄胜,任光俊,高方远.水稻B-box锌指蛋白基因OsBBX26的 克隆及表达分析[J].南方农业学报,2020,51(7):1606-1613.
作者姓名:邓军  罗正良  朱菲莹  陈希  方勇  任鄄胜  任光俊  高方远
作者单位:湖南省农业生物技术研究所,长沙 410125湖南省人民政府办公厅,长沙 410004四川省农业科学院作物研究所,成都 610066
摘    要:目的]克隆水稻B-box锌指蛋白基因(OsBBX26),并分析其在非生物胁迫下的表达模式,为探究水稻B-box蛋白的非生物胁迫响应机制提供理论依据.方法]以水稻模式品种日本晴为材料,采用RT-PCR克隆OsBBX26基因,对其进行生物信息学分析,并通过构建pBA-OsBBX26-YFP植物表达载体进行亚细胞定位.同时,采用实时荧光定量PCR检测分析OsBBX26基因的组织特异性及非生物胁迫(干旱、ABA、低温和高盐)下的表达模式.结果]克隆获得的OsBBX26基因(LOC_Os08g42440)cDNA全长序列为1467 bp,编码488个氨基酸,其编码蛋白分子量为51.86 kD,理论等电点(pI)为6.63,包含1个B-box锌指结构域和1个CCT结构域,其中B-box结构域位于第13~60位氨基酸,CCT结构域位于第435~478位氨基酸,该蛋白定位于细胞核中.OsBBX26基因位于8号染色体上,启动子区域除了含有TATA-Box和CAAT-Box等基本转录元件外,还含有与逆境相关的顺式作用元件,包括低温响应元件LTR、脱落酸响应元件ABRE、水杨酸响应元件TCA-element、厌氧响应元件ARE、茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif和TGACG-motif,以及MYB转录因子结合位点.OsBBX26蛋白与粳稻B-box蛋白亲缘关系最近,其次与籼稻B-box蛋白亲缘关系较近,与其他植物B-box蛋白也存在较高的相似性,其中与小米、大麦、高粱、玉米和短柄草B-box蛋白的氨基酸序列相似性分别达72%、72%、71%、69%和68%.OsBBX26基因在幼叶中的表达量最高,其次是在成熟叶片中,在幼根、成熟根、茎和幼穗中的表达量均极低,表明该基因表达具有明显的组织表达特异性.干旱、高盐、ABA和低温胁迫处理下OsBBX26基因均上调表达,干旱、高盐和ABA胁迫处理12 h达峰值,但低温胁迫处理在24 h后才达峰值.结论]OsBBX26基因受干旱、高盐、ABA和低温胁迫诱导均上调表达,推测其参与水稻植株响应多种非生物胁迫,在逆境响应中发挥重要调控作用.

关 键 词:水稻    B-box蛋白    克隆    非生物胁迫    表达分析    组织表达

Cloning and expression analysis of B-box zinc-finger protein gene OsBBX26 in rice
DENG Jun,LUO Zheng-liang,ZHU Fei-ying,CHEN Xi,FANG Yong,REN Juan-sheng,REN Guang-jun,GAO Fang-yuan.Cloning and expression analysis of B-box zinc-finger protein gene OsBBX26 in rice[J].Journal of Southern Agriculture,2020,51(7):1606-1613.
Authors:DENG Jun  LUO Zheng-liang  ZHU Fei-ying  CHEN Xi  FANG Yong  REN Juan-sheng  REN Guang-jun  GAO Fang-yuan
Abstract:
Keywords:
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