重组耻垢分枝杆菌减轻非嗜酸细胞性哮喘小鼠气道炎症的机制研究

目的观察重组耻垢分枝杆菌(recombinant Mycobacterium smegmatis,rMS)-Ag85a-IL-17a鼻腔黏膜免疫对非嗜酸细胞性哮喘(non-eosinophilic asthma,NEA)小鼠气道炎症反应的影响,并探讨相关机制.方法SPF级DO11.10小鼠随机分为对照组(CON组)、哮喘组(OVA组)、重组耻垢分枝杆菌免疫组(rMS组).OVA混悬液、rMS菌液分别经鼻腔滴入建立NEA及rMS免疫干预动物模型.采用ELISA法测定小鼠血清中抗IL-17A自身抗体滴度及肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中IL-6和IL-17A浓度,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测BALF中性粒细胞比例;比色法检测肺组织匀浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力,实时定量PCR法测定肺组织CXCL2和CXCL5 mRNA表达.结果与正常对照组比较,哮喘组小鼠BALF中白细胞数量明显增加,以中性粒细胞为主,且IL-6和IL-17A表达显著升高,差异有统计学意义(P均<0.01);肺组织匀浆中MPO活力增强,CXCL2和CXCL5 mRNA表达上调,差异有统计学意义(P均<0.01).与哮喘组比较,rMS组小鼠血清中出现高滴度抗IL-17A自身抗体,BALF白细胞总数、中性粒细胞数量以及IL-6和IL-17A表达水平明显下降,肺组织MPO活力减低,CXCL2和CXCL5 mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P均<0.01).结论rMS经鼻腔黏膜免疫可在小鼠体内诱导产生抗IL-17A自身抗体,降低非嗜酸细胞性哮喘小鼠气道炎性细胞数量,抑制炎症因子表达.