稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用 |
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引用本文: | 刘俊秀,孙巧松,丰岩清,曾 缨,赖 蓉,陈 曦,黄 帆.稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用[J].中山大学学报(医学科学版),2010,31(6). |
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作者姓名: | 刘俊秀 孙巧松 丰岩清 曾 缨 赖 蓉 陈 曦 黄 帆 |
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作者单位: | 中山大学附属第一医院神经科,广东 广州 510080 |
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摘 要: | 【目的】 建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体65377; 【方法】 构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR65380;间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布65377;细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者65380;20例MS患者65380;30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较65377; 【结果】 限制性酶切消化65380;PCR65380;测序结果证明载体构建成功65377;间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达,且主要分布在细胞膜上65377;20 例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1 ∶ 60 - 1 ∶ 15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性65377; 【结论】 成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4 ,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化65377; 关键词: 视神经脊髓炎; NMO-IgG; 水通道蛋白4( AQP4); HEK293
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关 键 词: | 视神经脊髓炎 NMO-IgG 水通道蛋白4( AQP4) HEK293 |
收稿时间: | 2010-05-24; |
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