| 刚地弓形虫His-TgPP2C融合蛋白的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 朱森,高学娟,刘小会,陈妙娟,刘丽杰,刘朗夏.刚地弓形虫His-TgPP2C融合蛋白的表达与纯化[J].广东医学,2012,33(2):177-179. |
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| 作者姓名： | 朱森 高学娟 刘小会 陈妙娟 刘丽杰 刘朗夏 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命与健康工程研究院,广州,510632 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目，中央高校基本科研业务费专项资金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建His-TgPP2C重组质粒,在大肠杆菌E.coil BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定.方法 利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA3-TgPP2C为模板,扩增出全长的TgPP2C基因,将所得的PCR产物插入带有His标签的原核表达载体pBAD-His中,得到重组质粒.经XhoⅠ、HindⅢ双酶切及测序鉴定正确后,转化至大肠杆菌E.coli BL21,通过异丙基-β-硫代半乳糖苷诱导表达His-TgPP2C融合蛋白,最后经Ni-NTA柱亲和层析纯化融合蛋白以及Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白.结果 得到构建好的His-PP2C质粒及纯化的目的 融合蛋白His-TgPP2C.结论 成功构建pBAD-His-TgPP2C原核表达载体,表达及纯化了His-PP2C融合蛋白,为深入研究TgPP2C蛋白在刚地弓形虫疾病发生发展过程中的作用奠定基础.
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| 关 键 词： | His-PP2C 融合蛋白 表达 纯化 刚地弓形虫 |
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