lncRNA GHET1通过Wnt/β-catenin信号通路对子痫前期滋养层细胞生物学行为的影响

目的 探讨子痫前期（PE）患者胎盘组织中长链非编码RNA胃癌高表达转录本1（lncRNA GHET1）的表达及其对滋养层细胞增殖、细胞周期进展和侵袭能力的影响，并阐明其作用机制。 方法 30名孕产妇分为正常孕产妇组（正常组）15例和PE孕产妇组（PE组）15例，HE染色观察2组研究对象胎盘组织病理形态表现。体外培养滋养层HTR-8细胞，转染过表达lncRNA GHET1及对照序列质粒，并将滋养层细胞分为对照组（常规培养）、GHET1组（转染过表达lncRNA GHET1质粒）和阴性对照组（转染阴性对照序列质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测2组研究对象胎盘组织和各组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平，CCK-8法检测各组HTR-8细胞增殖率，流式细胞术检测各组不同细胞周期HTR-8细胞百分率，Transwell小室实验检测各组HTR-8细胞侵袭能力，Western blotting法检测各组HTR-8细胞中细胞性骨髓细胞瘤病病毒癌基因（c-Myc）、细胞周期素D1（cyclinD1）、上皮细胞-间充质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）蛋白表达 水平及Wnt/β-catenin信号通路中磷酸化糖原合成酶激酶3β（p-GSK3β）/糖原合成酶激酶3β（GSK3β）比值和β-连环蛋白（β-catenin）蛋白表达水平。 结果 与正常组比较，PE组患者胎盘组织绒毛发育不良，数量减少，绒毛内及间质血管分布紊乱，血管壁出现纤维素样坏死，钙化区域及绒毛上合体结节增加。与正常组比较，PE组患者胎盘组织中lncRNA GHET1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较，GHET1组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05），阴性对照组HTR-8细胞中lncRNA GHET1 mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，GHET1组HTR-8细胞增殖率、S期细胞百分率和侵袭细胞数明显升高（P<0.05），阴性对照组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，GHET1组HTR-8细胞中c-Myc、cyclinD1、Vimentin和β-catenin蛋白表达水平及p-GSK3β/GSK3β比值均明显升高（P<0.05），E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P<0.05），阴性对照组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 过表达lncRNA GHET1可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进滋养层细胞增殖、细胞周期进展和细胞侵袭，发挥改善PE进展的作用。

Effects of lncRNA GHET1 on biological behaviors of trophoblast cells in preeclampsia through Wnt/β-catenin signaling pathway