siRNA介导靶向下调TRPV1对偏头痛大鼠的影响及可能机制研究

目的:分析siRNA介导靶向下调瞬时感受器电位香草酸受体(transient receptor potential vanilloid,TRPV1)对偏头痛大鼠的影响,并探讨其可能机制。方法:选取24只成年雌性SD大鼠,采用硝酸甘油皮下注射法建立偏头痛模型,造模成功后根据处理方式不同分为siRNA-TRPV1组、siRNA空载组和空白对照组,每组8只。采用实时荧光定量PCR法检测各组血液TRPV1mRNA表达情况;观察三组大鼠各时间段爬笼、挠头次数;并采用ELISA法检测对应时间小鼠血液缓激肽(bradykinin,BK)、前列腺素E(PGE)、趋化因子2(CCL2)和5-羟色胺(5-HT)表达水平,同时分析其与TRPV1mRNA的关系。结果:siRNA-TRPV1组、siRNA空载组和空白对照组三组大鼠血液TRPV1mRNA相对水平、BK、PGE、CCL2和5-HT比较差异具有统计学意义(P<0.001),siRNA-TRPV1组明显低于siRNA空载组和空白对照组(P<0.001),但siRNA空载组和空白对照组两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。经Pearson法分析得知,TRPV1mRNA与BK、PGE呈正相关(r=0.631/0.694/0.654/0.663,P=0.001/0.001/0.001/0.001)。siRNA-TRPV1组、siRNA空载组和空白对照组三组大鼠耳红开始时间、结束时间及各时间段爬笼及挠头次数比较差异均具有统计学意义(P<0.05),且表现为siRNA空载组和空白对照组两组比较差异无统计学意义(P>0.05),siRNA-TRPV1组开始时间晚于以上两组,而结束时间则早于前两组(P<0.05);siRNA-TRPV1组各时间段爬笼及挠头次数明显少于siRNA空载组和空白对照组(P<0.05)。结论:靶向下调TRPV1可明显减少硝酸甘油致偏头痛大鼠爬笼、挠头等症状发生次数,与BK、PGE、CCL2和5-HT等相关炎症因子水平降低相关,为偏头痛患者的有效治疗提供了新思路。

Effect of siRNA mediated targeted down-regulation of TRPV1 on migraine rats and its possible mechanism