系统性红斑狼疮患者外周血中调节性T细胞相关分子TGF-β表达缺陷的研究

目的:研究与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)功能密切相关的分子转化生长因子(transforming growth factor,TGF-β)的转录?表达?分泌水平的异常?方法:分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和CD4+CD25+T细胞,以抗-CD3和抗-CD28刺激培养48 h,获取细胞,以三色流式细胞术检测CD4+CD25+LAP+T及CD8+CD25+LAP+T细胞,分析各亚群细胞比值;提取总mRNA,qRT-PCR测定TGF-β1的表达;收取上清用ELISA法检测总TGF-β1和游离的活化TGF-β1水平?结果:活动性SLE患者CD4+T细胞中LAP+/CD4+T?CD25+LAP+/CD4+T?LAP+/CD4+CD25+比值较正常人显著升高,抗-CD3?抗-CD28抗体刺激后LAP+/CD4+T?CD25+LAP+/CD4+T?LAP+/CD4+CD25+比值进一步升高,与正常人比较差异有统计学意义(P < 0.05);但均与疾病活动度无显著相关性;无论刺激与未刺激,SLE患者CD4+CD25+LAP+细胞中LAP染色的荧光强度亦高于相应正常组;而抗-CD3?抗-CD28抗体刺激后SLE患者PBMC及CD4+CD25+ T细胞培养上清中总TGF-β1和游离的活化 TGF-β1水平均显著低于正常人(P < 0.05);qRT-PCR证实,受刺激后CD4+CD25+T细胞内TGF-β1的mRNA转录水平低于正常人?结论:尽管活动性SLE患者CD4+CD25+T细胞膜表面潜伏态TGF-β(LAP)的表达较正常人明显增高,但其TGF-β表达依然存在缺陷,主要表现为TGF-β1的转录?分泌水平降低,游离的活化TGF-β1产生障碍,从而可能削弱了Treg细胞的免疫抑制作用?新鲜分离的以及受刺激后的CD4+CD25+T细胞LAP表达增高可能反映了活动性SLE患者T细胞亚群的活化和CD4+CD25+LAP+Treg细胞的反应性扩增?