Ghrelin对易损斑块内血管新生和心肌梗死后血管新生的影响及机制研究

目的：　探讨ghrelin对易损斑块内血管新生和心肌梗死后血管新生的影响及机制。方法：　将ApoE^-/-小鼠分为易损斑块组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组。所有ApoE^-/-小鼠均高脂饮食喂养12周诱导动脉粥样硬化易损斑块，构建的动脉粥样硬化易损斑块模型即为易损斑块组。遗传背景相同的C57BL/6J小鼠正常饮食喂养12周，分为正常对照组和单纯心梗组。第8周时，单纯心梗组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组结扎冠状动脉左前降支构建急性心梗模型。急性心梗造模后，ghrelin干预组腹腔注射ghrelin（100 μg/kg，2次/d），直至第12周实验结束。超声心动图检测各组左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）和左室短轴缩短率（left ventricular fraction shortening，LVFS），油红O染色观察主动脉窦粥样斑块面积的百分比，CD31免疫组化染色检测易损斑块内和心梗周边区新生血管生成密度（microvascular density，MVD），Masson染色检测心肌梗死面积。Real-time PCR和Western blot分别检测各组血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、血管生成素（angiopoietins，Ang）-1/2和络氨酸激酶受体（tyrosine-protein kinase receptor，Tie）-2的表达。结果：　①与单纯心梗组相比，易损斑块+心梗双模型组（65.518±4.160）%，P=0.000]心梗面积明显增加，LVEF（58.560±11.900）%，P=0.012]和LVFS（27.182±7.807）%，P=0.013]降低，心梗周边区MVD（5.800±0.837，P=0.000）减低，VEGF（1.870±0.122，P=0.001）、Ang-1（1.830±0.056，P=0.007）、Ang-2（1.660±0.217，P=0.006）和Tie-2（1.660±0.115，P=0.020）表达降低，ghrelin干预后可明显缩小心梗面积（39.751±3.039）%，P=0.000]，增加易损斑块+心梗双模型组LVEF（74.679±6.535）%，P=0.013]和LVFS（37.507±5.210）%，P=0.020），增加心梗周边区MVD（9.857±1.345，P=0.000），升高VEGF（3.503±0.384，P=0.004）、Ang-1（3.277±0.186，P=0.017）、Ang-2（3.450±0.187，P=0.000）和Tie-2（3.133±0.139，P=0.009）的表达；②易损斑块组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组主动脉窦粥样斑块面积的百分比、斑块内MVD、斑块内VEGF、Ang-1、Ang-2和Tie-2的基因与表达在3组间无统计学差异，ghrelin对易损斑块合并心梗小鼠斑块内血管新生无影响。结论：　Ghrelin可通过上调VEGF、Ang-1、Ang-2和Tie-2的基因与蛋白表达，促进易损斑块+心梗双模型组小鼠心梗后血管新生，减少心肌梗死面积，稳定和缩小易损斑块。Ghrelin对易损斑块+心梗双模型组小鼠斑块内血管新生无影响。

Effects and mechanisms of ghrelin on angiogenesis in vulnerable plaque and myocardial infarction