| 原发型肝癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选 |
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| 引用本文： | 刘辉,潘泽亚,周伟平,李爱军,傅思源,尹磊,吴孟超.原发型肝癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选[J].中国现代医学杂志,2008,18(6):691-694. |
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| 作者姓名： | 刘辉 潘泽亚 周伟平 李爱军 傅思源 尹磊 吴孟超 |
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| 作者单位： | 第二军医大学东方肝胆外科医院,上海,200438 |
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| 摘 要： | 目的 构建人原发型肝癌组织cDNA文库,以SEREX方法从cDNA文库中筛选肝癌抗原基因.方法 采用确诊的原发型肝癌患者新鲜手术切除癌组织构建cDNA文库,测定原始文库滴度,进行蓝白筛选以确定文库的重组率.以肝癌患者的血清,采用血清学方法筛选所构建的cDNA文库,阳性克隆经PCR检测鉴定后进行序列分析.结果 成功构建了混合原发型肝癌cDNA文库经测定原始文库滴度为7.42X106pfu/mL,含3.96×106个重组子,重组率为93%,扩增文库滴度为3.92×109pfu/mL,cDNA插入片段大小在0.5～3.0 kb之间.文库经3轮血清学筛选共获得31个阳性克隆,分别代表了24个独立的cDNA插入片段(抗原基因).其中17个与已知基因高度同源,另外7个基因与GenBank中已知基因的部分同源,其中有3个是新基因.利用SMART技术构建了高质量的人原发型肝癌组织cDNA表达文库,有利于以cDNA文库为基础的进一步的实验研究.结论 应用SEREX技术初步筛选原发型肝癌组织cDNA文库,共得到17个原发型肝癌相关抗原基因,其中有3个是新基因,可能为原发型肝癌的免疫学研究提供新的研究分子.
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| 关 键 词： | 原发型肝癌 cDNA文库 重组cDNA表达文库的血清学分析 抗原基因 原发型肝癌 肝癌组织 表达文库 抗原基因 初步筛选 genes screening tissue hepatocellular carcinoma cDNA library 分子 免疫学 相关 应用 研究 实验 质量 技术构建 SMART 利用 |
| 文章编号： | 1005-8982(2008)06-0691-03 |
| 修稿时间： | 2007年11月18 |
Construction of cDNA library from hepatocellular carcinoma tissue and screening of antigenic genes |
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| LIU Hui,PAN Ze-ya,ZHOU Wei-ping,LI Ai-jun,FU Si-yuan,YIN Lei,WU Meng-chao.Construction of cDNA library from hepatocellular carcinoma tissue and screening of antigenic genes[J].China Journal of Modern Medicine,2008,18(6):691-694. |
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| Authors: | LIU Hui PAN Ze-ya ZHOU Wei-ping LI Ai-jun FU Si-yuan YIN Lei WU Meng-chao |
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| Affiliation: | LIU Hui,PAN Ze-ya,ZHOU Wei-ping,LI Ai-jun,FU Si-yuan,YIN Lei,WU Meng-chao (Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200438,P.R.China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | primary hepatocellular carcinoma cDNA library SEREX antigenic gene |
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