青蛾丸对去势鼠成骨细胞增殖以及MMP3-OPN-MAPK通路蛋白表达的影响

目的探讨青蛾丸对去势鼠成骨细胞增殖和MMP3-OPN-MAPK通路蛋白表达及其作用机理。方法将15只饲养12周的去势鼠处死,选取股骨胫骨骨髓,进行体外成骨细胞传代培养。将含青蛾丸2g生药的药液喂养40只SD大鼠,随机均分为空白对照(A)组(给蒸馏水1ml),低浓度(B)组(给药0.5ml),中浓度(C)组(给药1ml),高浓度(D)组(给药2ml),提取各组处死大鼠含药血清干预成骨细胞,运用MTT法测定成骨细胞增殖能力,RT-PCR法测定通路蛋白MMP3、OPN和MAPK的mRNA水平。结果 1术后12周模型组大鼠腰椎及股骨骨密度为(0.153±0.011)g/cm2和(0.162±0.015)g/cm2,假手术组为(0.336±0.016)g/cm2和(0.293±0.005)g/cm2,两组有明显差异(P0.05),表明大鼠骨质疏松的模型建立成功。2成骨细胞增殖中B至D组均使MTT法检测的光吸收值升高,较A组显著性增加P0.01和P0.05),增加幅度与组别关系近似斜线,以D组促增殖作用最显著,增值率达到156%。3D组中MMP3含量明显低于其余各组(P0.01),OPN和MAPK含量高于其余各组(P0.05)。同时,B、C、D是随着复方含药血清依次增加的三组,B组中MMP3表达最多,其余组含量依次下降,三组中OPN含量基本依次增加,而MAPK含量在含药血清药物添加后明显增加,不同于A组(P0.01)。结论我们发现中药复方青蛾丸含药血清可以促进去势鼠成骨细胞的增殖并且通过MMP3-OPN-MAPK通路激活骨重建。