益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞（CFs）增殖、凋亡的影响及 相关机制。方法将分化完全的CFs 随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组，每组6 个复孔。除 空白血浆组外，其余各组以AngⅡ（10-7 mol·L-1）诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15% 空白血浆培养，益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养，干预24 h。采用CCK-8 法检测CFs 细胞增殖 情况；ELISA 法测定细胞中Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）、Ⅲ型胶原（Collagen Ⅲ）及转化生长因子（TGF-β1）含量；流 式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期；Western Blot 法检测细胞中TGF-β1、B 细胞白血病/淋巴瘤-2（Bcl-2）及 Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）的蛋白表达水平；RT-qPCR 法检测CFs 的增殖细胞核抗原（PCNA）、α-平滑肌肌动蛋 白（α-SMA）、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平。结果15%益心泰含药血浆对CFs 无明显的促细胞增殖或抑制作 用。与空白血浆组比较，模型组细胞G0/G1 期的细胞百分率明显降低（P＜0.01），S 期和G2/M 期的细胞百分率 明显升高（P＜0.01）；细胞凋亡率有所下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）；Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1 水平 均显著升高（P＜0.01）；TGF-β1、Bcl-2 蛋白表达明显上调（P＜0.01），Bax 蛋白表达明显下调（P＜0.01）； PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平均明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，益心泰含药血浆组细胞 的G0/G1 期细胞百分率明显升高（P＜0.01），S 期和G2/M 期的细胞百分率明显降低（P＜0.01），细胞凋亡率明 显升高（P＜0.01）；Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1 水平明显降低（P＜0.01）；TGF-β1、Bcl-2 蛋白表达明显下 调（P＜0.01），Bax 蛋白表达明显上调（P＜0.01）；PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/Ⅲ mRNA 表达水平均明显降 低（P＜0.01）。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs 细胞增殖分化及纤维化，可能与其调控Bax/Bcl-2 平衡及 下调纤维化相关因子表达有关。