基于PPAR-α/CPT-1信号通路的桑叶总黄酮调控T2DM大鼠肝脏脂质代谢作用及其机制

目的 观察桑叶总黄酮改善2型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏脂代谢紊乱的药效学作用，并基于肝脏过氧化物酶增殖物激活受体-α（PPAR-α）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-l）蛋白探讨其作用机制。方法 采用醇提法+大孔树脂纯化法提取、纯化桑叶总黄酮，并进行鉴定。利用高脂肪饮食（HFD）+链脲佐菌素（STZ）法建立T2DM大鼠模型，选择血糖≥11.1 mmol·L^-1的大鼠，以桑叶总黄酮高、中、低剂量（300、150、75 mg·kg^-1）分别灌胃给药8周，观察大鼠体质量及血糖情况。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肝脏病理变化，生化法检测大鼠血清脂代谢指标总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织PPAR-α及CPT-1 mRNA和蛋白的表达。结果 桑叶总黄酮干预8周后，与正常组比较，模型组大鼠摄食量、肝脏指数、空腹血糖显著升高（P<0.01）；与模型组比较，桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠摄食量、空腹血糖、肝脏指数显著降低（P<0.01）。HE结果显示，正常组大鼠肝组织结构完整未见明显异常；模型组大鼠肝细胞空泡变性且有炎性浸润；桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠肝脏结构未见明显异常。血脂四项结果显示，与正常组比较，模型组大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高（P<0.01），HDL-C水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，各给药组TC、TG、LDL-C水平明显降低（P<0.05，P<0.01），HDL-C水平显著增加（P<0.01）。Real-time PCR结果显示，与正常组比较，模型组大鼠PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）。Western blot结果显示，与正常组比较，模型组大鼠PPAR-α和CPT-1蛋白表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 桑叶总黄酮可有效降低T2DM大鼠血糖，改善肝脏脂质代谢紊乱，其发挥降糖调脂的作用机制可能是通过激活调控PPAR-α和CPT-1蛋白、促进脂肪酸氧化分解，发挥调控脂质代谢，进而发挥降糖作用。