| 乙型肝炎病毒DNA聚合酶逆转录酶蛋白反式调节基因1的克隆化研究 |
| |
| 引用本文： | 张黎颖,成军,邓红,王春花,刘妍.乙型肝炎病毒DNA聚合酶逆转录酶蛋白反式调节基因1的克隆化研究[J].胃肠病学和肝病学杂志,2004,13(5):466-470. |
| |
| 作者姓名： | 张黎颖 成军 邓红 王春花 刘妍 |
| |
| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金攻关项目 (No .C0 30 1 1 4 0 2，No C30 0 70 689)，军队“九、五”科技攻关项目 (No，98D0 63)，军队回国留学人员启动基金项目 (No .98H0 38)，军队“十、五”科技攻关青年基金项目 (No .0 1Q1 38)，军队“十、五”科技攻关面上项目 (No .0 1M |
| |
| 摘 要： | 目的 应用抑制性消减杂交 (SSH)技术及生物信息学 (bioinformatics)技术筛选并克隆乙型肝炎病毒 (HBV)DNA聚合酶(DNAPolymerase)逆转录酶 (RT)区蛋白的反式调节新型靶基因 ,进一步阐明HBV感染相关疾病的发病机制。方法 以HBVDNA聚合酶RT基因的表达质粒pcDNA3 1( -) RT转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 1( -)为平行对照 ,提取mRNA并进行SSH分析。并应用分子生物学技术 ,结合生物信息学技术 ,克隆RT反式调节作用的新的靶基因。结果 对于所获基因片段序列分析表明 ,其中之一为新型基因片段。从HepG2细胞提取总RNA ,以逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列 ,并测序证实 ,因其可以被HBVDNA聚合酶逆转录酶RT反式激活 ,故命名为DNA多聚酶反式激活蛋白 1(DNAPTP1) ,已在GenBank中注册 ,注册号 :AY45 0 3 89。DNAPTP1基因的编码序列全长为 43 5个核苷酸 (nt) ,编码产物由 14 4个氨基酸残基 (aa)组成。结论 HBVDNA聚合酶逆转录酶RT在HBV进入宿主细胞的过程中起着重要的作用 ,最近的研究表明RT蛋白还具有反式激活的作用 ,上调宿主细胞某些基因的表达 ,从而改变宿主正常的免疫应答水平 ,引起病变。逆转录酶RT反式激活新靶基因的发现 ,为进一步研究RT蛋白的分子生物学机制和探索新型治疗
|
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 RT 反式激活 基因克隆化 |
| 修稿时间： | 2004年3月15日 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
