抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义

目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB／c小鼠，利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体（mAb），用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵（SAS）纯化和HRP标记后，利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗，分别包被ELISA板及作为酶标mAb，建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化，获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验，选出2株mAb：7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法，检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb，建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。