白细胞介素1β和干扰素γ对小鼠胰岛素瘤βTC-6细胞胰岛素分泌功能的影响

目的探讨炎性细胞因子白细胞介素1β（IL-1β）、干扰素γ（IFN-γ）对小鼠胰岛β细胞株βTC-6胰岛素分泌功能的影响。方法将βTC-6细胞培养于高糖DMEM培养基，48h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min，分别于含0、1．38、5．50和11．10mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min，放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平（GSIS）。在BTC-6细胞中分别加入不同浓度的IL-1β（0．15、1．50μg／L）和（或）IFN-γ（10、100U／m1），24h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min，在含1．38mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min，放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平。多组间数据比较采用单因素方差分析，两组间数据比较采用t检验。结果βTC-6细胞在1．38mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌达高峰，与无葡萄糖刺激时相比差异有统计学意义（151±14）对（120±4）mU／L，t=-4．215，P=0．006]；5．50、11．10mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌较1．38mmol／L葡萄糖刺激时明显下降（均P〈0．05）。与单纯1．38mmol／L葡萄糖刺激组相比，IL-1β（0．15μg／L）组（85．53±5．06）mU／L对（103．11±0．27）mU／L，t=4．897，P=0．039]、IL-1β（1．50μg／L）组（62．62±0．64）mU／L对（103．11±0．27）mU／L，t=212．66，P〈0．001]葡萄糖刺激下胰岛素分泌水平显著下降，下降程度与IL-1β的剂量呈正相关；与单纯葡萄糖刺激组相比，IFN-γ（100U／m1）组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降（73．2±1．6）对（105．2±1．8）mU／L，t=19．52，P：0．003]；与IL-1β（0．15μg／L）组及IFN-γ（100U／m1）组相比，IL-1β联合IFN-γ组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降（F=77．38，P〈0．001）。结论IL-1β和IFN-γ对13TC-6细胞的胰岛素分泌功能有抑制作用，且两者间具有协同效应。

Effect of interleukin-1β and interferon-γ on the insulin secretion in mice βTC-6 cells in vitro

Objective To investigate the effect of interleukin （IL）-1β and interferon （IFN）-γ on the insulin secretion in mice βTC-6 ceils in vitro. Methods βTC-6 cells were cultured in DMEM for 48 hours then pre-incubated for 30 minutes in Krebs-Ringer bicarbonate-Hepes （KRBH） buffer without glucose. The KRBH was then discarded and replaced with fresh buffer containing 1.38 mmol/L or 5.50 mmol/L or 11.10 mmol/L glucose for 1 hour. Supernatants were collected for insulin assays by an insulin radioimmunoassay （RIA） kit （GSIS）. IL-1β （0. 15, 1.50 μg/L） and/or IFN-γ （10, 100 U/ml） were added in βTC-6 cells for 24 hours then GSIS was measured as indicated with 1.38 mmol/L glucose stimulation. Data were analyzed by ONE-way ANOVA with correction for multiple comparisons or by Student＇s t-test for comparison between two groups. Results The insulin level reaches a peak in 1.38 mmol/L stimulation group compared with 0 mmol/L glucose stimulation group （ （ 151 ± 14） vs （ 120 ± 4） mU/L, t = -4.215, P = 0.006）. The insulin level 5.50 mmol/L and 11.10 mmol/L glucosestimulation groups were significantly lower than that in 1.38 mmol/L glucose stimulation group （ all P 〈 0. 05）. Compared with 1.38 mmol/L glucose stimulation alone group, the insulin level was significantly lower in IL-1β（0. 15 μg/L） group （ （85.53 ±5.06） vs （103.11±0. 27） mU/L, t =4. 897, P =0. 039） ; IL-1β（1.50μg/L） group （（62.62±0.64） vs （103.11±0.27） mU/L, t =212.66, P〈0. 001） and IFN-γ（ 100 U/ml） group （ （73.2 ± 1.6） vs （ 105.2 ± 1.8） mU/L, t = 19.52, P =0. 003）. Compared with IL-1β （0. 15μg/L） and IFN-γ（ 100 U/ml）groups, the insulin level in 1.38 mrnol/L glucose stimulation with IL-1β plus IFN-γgroup was significantly lower （ F = 77.38, P 〈 0. 001 ）. Conclusion IL-1β or IFN- γ, alone can inhibit the glucose-induced insulin secretion in BTC-6 cells or in a synergistic manner.